III. METODE PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan pada bulan Januari – April 2012 di Laboratorium
Molekuler Departemen Biologi FMIPA IPB.
B. Sampel Berudu
Sampel berudu merupakan koleksi yang dikumpulkan dari beberapa daerah di Pulau Jawa. Jumlah spesies yang digunakan dalam penelitian ini
sebanyak 17 spesies dari 6 famili. Nama spesies, asal lokasi dan tahun koleksi sampel disajikan dalam Tabel 1.
Tabel 1 Daftar nama spesies, asal lokasi sampel dan tahun koleksi sampel berudu
No Nama Spesies
Asal Lokasi Tahun Koleksi
N
Famili Bufonidae 1
Phrynoidis aspera Yogyakarta
2009
3
2 Duttaphrynus melanostictus
Jawa Barat 2012
14
3 Leptophryne cruentata
Jawa Barat 2011
5
Famili Dicroglossidae 4
Fejervarya limnocharis Yogyakarta
2009
6
5 Limnonectes microdiscus
Yogyakarta 2002
2
6 Limnonectes kuhlii
Jawa Barat 2002
3
Famili Megophryidae 7
Leptobrachium hasseltii Yogyakarta
2007
4
8 Megophrys montana
Yogyakarta 2002
5
Famili Microhylidae 9
Kaloula baleata Yogyakarta
2007
2
10 Microhyla achatina
Jawa Barat 2002
11
Famili Ranidae 11
Huia masonii Yogyakarta
2009
4
12 Odorana hosii
Yogyakarta 2009
3
13 Hylarana chalconota
Yogyakarta 2011
2
Famili Rhacophoridae 14
Polypedates leucomystax Jawa Barat
2012
10
15 Philautus vittiger
Jawa Barat 2008
7
16 Rhacophorus margaritifer
Jawa Barat 2009
10
17 Rhacophorus reinwardtii
Jawa Barat 2002
3
Total
94
Ket: : Koleksi milik Kelompok Studi Herpetologi KSH Fak. Biologi UGM
C. Deskripsi Morfologi
Pengamatan morfologi berupa pola warna tubuh dan ekor, letak mata, nostril, anal, mulut dan geligi dilakukan dengan mikroskop stereo. Pengukuran
morfometri seluruh individu berudu dilakukan untuk mendapatkan variasi ukuran tubuh berudu. Tahap perkembangan berudu ditentukan berdasarkan Gosner
1960. Terminologi dan pengukuran morfometri berudu dilakukan berdasarkan Altig 2007, yaitu: BL - body length, IND - internarial distance, IOD -
interorbital distance, LB - limb bud, MTH - maximum tail height, OD - oral disc, SP - spiracle, TAL - tail length, TL - total length, TMA
– tail muscle axis, TMH - tail muscle height, TMW - tail muscle width, and VT - vent tube Gambar 8.
Gambar 8. Terminologi dan morfometrika berudu; A dorsal dan B lateral
D. Ekstraksi dan Isolasi DNA