Waktu dan Tempat Penelitian Sampel Berudu Deskripsi Morfologi

III. METODE PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian dilakukan pada bulan Januari – April 2012 di Laboratorium Molekuler Departemen Biologi FMIPA IPB.

B. Sampel Berudu

Sampel berudu merupakan koleksi yang dikumpulkan dari beberapa daerah di Pulau Jawa. Jumlah spesies yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 17 spesies dari 6 famili. Nama spesies, asal lokasi dan tahun koleksi sampel disajikan dalam Tabel 1. Tabel 1 Daftar nama spesies, asal lokasi sampel dan tahun koleksi sampel berudu No Nama Spesies Asal Lokasi Tahun Koleksi N Famili Bufonidae 1 Phrynoidis aspera Yogyakarta 2009 3 2 Duttaphrynus melanostictus Jawa Barat 2012 14 3 Leptophryne cruentata Jawa Barat 2011 5 Famili Dicroglossidae 4 Fejervarya limnocharis Yogyakarta 2009 6 5 Limnonectes microdiscus Yogyakarta 2002 2 6 Limnonectes kuhlii Jawa Barat 2002 3 Famili Megophryidae 7 Leptobrachium hasseltii Yogyakarta 2007 4 8 Megophrys montana Yogyakarta 2002 5 Famili Microhylidae 9 Kaloula baleata Yogyakarta 2007 2 10 Microhyla achatina Jawa Barat 2002 11 Famili Ranidae 11 Huia masonii Yogyakarta 2009 4 12 Odorana hosii Yogyakarta 2009 3 13 Hylarana chalconota Yogyakarta 2011 2 Famili Rhacophoridae 14 Polypedates leucomystax Jawa Barat 2012 10 15 Philautus vittiger Jawa Barat 2008 7 16 Rhacophorus margaritifer Jawa Barat 2009 10 17 Rhacophorus reinwardtii Jawa Barat 2002 3 Total 94 Ket: : Koleksi milik Kelompok Studi Herpetologi KSH Fak. Biologi UGM

C. Deskripsi Morfologi

Pengamatan morfologi berupa pola warna tubuh dan ekor, letak mata, nostril, anal, mulut dan geligi dilakukan dengan mikroskop stereo. Pengukuran morfometri seluruh individu berudu dilakukan untuk mendapatkan variasi ukuran tubuh berudu. Tahap perkembangan berudu ditentukan berdasarkan Gosner 1960. Terminologi dan pengukuran morfometri berudu dilakukan berdasarkan Altig 2007, yaitu: BL - body length, IND - internarial distance, IOD - interorbital distance, LB - limb bud, MTH - maximum tail height, OD - oral disc, SP - spiracle, TAL - tail length, TL - total length, TMA – tail muscle axis, TMH - tail muscle height, TMW - tail muscle width, and VT - vent tube Gambar 8. Gambar 8. Terminologi dan morfometrika berudu; A dorsal dan B lateral

D. Ekstraksi dan Isolasi DNA