Aplikasi Metode Spektrofotometri Secara Panjang Gelombang Berganda Terhadap Penetapan Kadar Teofilin dan Efedrin Hidroklorida Dalam Sediaan Tablet

(1)

Lampiran 1. Sampel Tablet A, Tablet G, dan Tablet I

Gambar 1. Tablet A

(2)

Lampiran 1. (Lanjutan)

(3)

Lampiran 2. Komposisi Tablet A, Tablet G, dan Tablet I Daftar Spesifikasi Sampel

1. Tablet A

Nama Sampel : ASMADEX®

Nomor Registrasi : DTL 9205002310 A1 Expire Date : Januari 2019

Komposisi : Theophylline ... 130 mg Ephedrine HCl ... 10 mg

2. Tablet G

Nama Sampel : GRAFASMA®

Nomor Registrasi : DTL 9231102410 A1 Expire Date : September 2017

Komposisi : Theophylline ... 130 mg Ephedrine HCl ... 10 mg 3. Tablet I

Nama Sampel : IFASMA®

Nomor Registrasi : DKL 7609203410 A1 Expire Date : September 2017

Komposisi : Theophylline ... 130 mg Ephedrine HCl ... 10 mg

(4)

Lampiran 3. Gambar Alat-Alat Pengukuran Kadar Campuran Teofilin dan Efedrin HCl

Gambar 4. Spektrofotometer UV-Visible (Shimadzu UV 1800)

(5)

Lampiran 3. (Lanjutan)

(6)

Lampiran 4. Perhitungan Pembuatan HCl 0,1 N HCl 37% (v/v) setara dengan HCl 12 N

V1 x N1 = V2 x N2

V1 x 12 N = 1000 ml x 0,1 N

V1 =

1000 ml

12 N x 0,1 N = 8,3 ml

(7)

Lampiran 5. Bagan Alir Pembuatan Larutan Induk Baku dan Serapan Maksimum Teofilin

ditimbang sebanyak 50 mg

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml

dilarutkan dan dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda

dipipet 2,5 ml

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda

dipipet 4,05 ml

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda

diukur serapan pada panjang gelombang 200-400 nm

Baku Teofilin

LIB II Teofilin (50 μg/ml)

Teofilin (8,1 μg/ml)

Panjang Gelombang Teofilin = 270,40 nm

(8)

Lampiran 6. Bagan Alir Pembuatan Larutan Induk Baku dan Serapan Maksimum Efedrin HCl

ditimbang sebanyak 53 mg

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dan dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda

dipipet 8,5 ml

dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda

diukur serapan pada panjang gelombang 200-400 nm

Baku Efedrin HCl

LIB I Efedrin HCl (1060 μg/ml)

Efedrin HCl (360,4 μg/ml)

Panjang Gelombang Efedrin HCl = 262,8 nm; 256,8 nm; 251,2 nm

(9)

Lampiran 7. Bagan Alir Penentuan Panjang Gelombang Analisis Teofilin dan Efedrin HCl

Efedrin HCl (360,4 μg/ml) Teofilin (8,1 μg/ml)

diukur serapan dari masing-masing teofilin dan efedrin HCl pada panjang gelombang 200 - 400 nm

ditumpang-tindihkan spektrum serapan dari masing-masing komponen

ditentukan panjang gelombang analisis dalam rentang 215-300 nm

dipilih panjang gelombang berdasarkan panjang gelombang maksimum teofilin dan efedrin HCl

(10)

Lampiran 8. Bagan Alir Pembuatan dan Pengukuran Larutan Standar Teofilin

dipipet masing-masing sebanyak 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml, dan 6 ml

dimasukkan masing-masing ke dalam labu tentukur 25 ml

dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N Larutan Standar Teofilin

(4 µg/ml, 6 µg/ml, 8 µg/ml, 10 µg/ml, dan 12 µg/ml)

Data Kalibrasi Teofilin LIB II Teofilin (50 μg/ml)

diukur serapan pada panjang gelombang: 270,40 nm; 262,80 nm; 256,80 nm; dan 251,20 nm

(11)

Lampiran 9. Bagan Alir Pembuatan dan Pengukuran Larutan Standar Efedrin HCl

dipipet masing-masing sebanyak 4 ml, 6 ml, 8,5 ml, 10 ml, dan 12 ml

dimasukkan masing-masing ke dalam labu tentukur 25ml

dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N Larutan Standar Efedrin HCl

(169,6 µg/ml; 254,4 µg/ml; 360,4 µg/ml; 424 µg/ml; dan 508,8 µg/ml)

Data Kalibrasi Efedrin HCl LIB I Efedrin HCl (1060 μg/ml)

diukur serapan pada panjang gelombang: 270,40 nm; 262,80 nm; 256,80 nm; dan 251,20 nm.

(12)

Lampiran 10. Bagan Alir Pembuatan Larutan Baku Campuran Teofilin dan Efedrin HCl

Kedua larutan dicampurkan ke dalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N

Larutan diukur pada panjang gelombang 200-400 nm

Lakukan pengulangan sebanyak 6 kali

Efedrin HCl = 12 mg Teofilin = 10 mg

Dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml Dilarutkan dan dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N Larutan Teofilin

(400 µg/ml)

Dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml Dilarutkan dan dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N Larutan Efedrin HCl

(480 µg/ml)

Diambil 0,5 ml _{Diambil 18,85 ml}

Teofilin : 8,00 μg/ml Efedrin HCl : 361,92 μg/ml

(13)

Lampiran 11. Bagan Alir Penentuan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A

ditimbang (berat 20 tablet = 7516 mg)

digerus dalam lumpang sampai halus dan homogen

ditimbang setara 10 mg teofilin (penimbangan dilakukan sebanyak 6 kali pengulangan)

dihitung kesetaraan efedrin HCl yang terkandung di dalamnya

dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dilarutkan dengan pelarut HCl 0,1 N

dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda

dikocok sampai homogen disaring larutan

dibuang ± 10 ml filtrat pertama ditampung filtrat selanjutnya dipipet sebanyak 1,7 ml

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml

dipipet 5 ml (metode adisi standar)

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dicukupkan campuran dengan pelarut HCl 0,1 N diukur pada empat panjang gelombang yang telah ditentukan (270,4 nm; 262,8 nm; 256,8 nm; dan 251,2 nm)

dihitung Larutan Efedrin HCl

(1000 μg/ml)

Kadar 20 tablet

Serbuk

(14)

Lampiran 12. Bagan Alir Penentuan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet G

ditimbang (berat 20 tablet = 4244 mg)

digerus dalam lumpang sampai halus dan homogen

ditimbang setara 10 mg teofilin (penimbangan dilakukan sebanyak 6 kali pengulangan)

dihitung kesetaraan efedrin HCl yang terkandung didalamnya

dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dilarutkan dengan pelarut HCl 0,1 N

dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda

dikocok sampai homogen disaring larutan

dibuang ± 10 ml filtrat pertama ditampung filtrat selanjutnya dipipet sebanyak 1,5 ml

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml

dipipet 5 ml (metode adisi standar)

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dicukupkan campuran dengan pelarut HCl 0,1 N diukur pada empat panjang gelombang yang telah ditentukan (270,4 nm; 262,8 nm; 256,8 nm; dan 251,2 nm)

dihitung Larutan Efedrin HCl

(1000 μg/ml)

Kadar 20 tablet

Serbuk

(15)

Lampiran 13. Bagan Alir Penentuan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet I

ditimbang (berat 20 tablet = 6626 mg)

digerus dalam lumpang sampai halus dan homogen

ditimbang setara 10 mg teofilin (penimbangan dilakukan sebanyak 6 kali pengulangan)

dihitung kesetaraan efedrin HCl yang terkandung didalamnya

dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dilarutkan dengan pelarut HCl 0,1 N

dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda

dikocok sampai homogen disaring larutan

dibuang ± 10 ml filtrat pertama ditampung filtrat selanjutnya dipipet sebanyak 1,7 ml

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml

dipipet 5 ml (metode adisi standar)

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dicukupkan campuran dengan pelarut HCl 0,1 N diukur pada empat panjang gelombang yang telah ditentukan (270,4 nm; 262,8 nm; 256,8 nm; dan 251,2 nm)

dihitung Larutan Efedrin HCl

(1000 μg/ml)

Kadar 20 tablet

Serbuk

(16)

Lampiran 14. Perhitungan Kadar Teoritis dari Campuran Baku Teofilin dan Efedrin HCl

Pengulangan 1 Kadar Teofilin:

Teofilin = 10 mg

25 ml = 400 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 400 µg/ml = 25 ml x 8,01 µg/ml

V1 = 0,5 ml

Kadar Efedrin HCl:

Efedrin HCl =12 mg

25 ml = 480 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 480 µg/ml = 25 ml x 361,92 µg/ml

V1 = 18,85 ml

Pengulangan 2 Kadar Teofilin:

Teofilin = 11 mg

25 ml = 440 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 440 µg/ml = 25 ml x 8,01 µg/ml

V1 = 0,45 ml

Kadar Efedrin HCl:

Efedrin HCl =13 mg

25 ml = 520 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 520 µg/ml = 25 ml x 361,92 µg/ml

V1 = 17,4 ml

Pengulangan 3 Kadar Teofilin:

Teofilin = 13 mg

25 ml = 520 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 520 µg/ml = 25 ml x 8,01 µg/ml

(17)

Lampiran 14. (Lanjutan) Kadar Efedrin HCl:

Efedrin HCl =12 mg

25 ml = 480 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 480 µg/ml = 25 ml x 361,92 µg/ml

V1 = 18,85 ml

Pengulangan 4 Kadar Teofilin:

Teofilin = 13 mg

25 ml = 520 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 520 µg/ml = 25 ml x 8,01 µg/ml

V1 = 0,4 ml

Kadar Efedrin HCl:

Efedrin HCl =13 mg

25 ml = 520 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 520 µg/ml = 25 ml x 361,92 µg/ml

V1 = 17,4 ml

Pengulangan 5 Kadar Teofilin:

Teofilin = 13 mg

25 ml = 520 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 520 µg/ml = 25 ml x 8,01 µg/ml

V1 = 0,4 ml

Kadar Efedrin HCl:

Efedrin HCl =14 mg

25 ml = 560 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 560 µg/ml = 25 ml x 361,92 µg/ml

(18)

Lampiran 14. (Lanjutan) Pengulangan 6

Kadar Teofilin:

Teofilin =13 mg

25 ml = 520 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 520 µg/ml = 25 ml x 8,01 µg/ml

V1 = 0,4 ml

Kadar Efedrin HCl:

Efedrin HCl =14 mg

25 ml = 560 µg/ml

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 560 µg/ml = 25 ml x 361,92 µg/ml

(19)

Lampiran 15. Data Penimbangan dan Serapan dalam Tablet

Tabel 15.1 Data Penimbangan dan Serapan dalam Tablet A Pengulangan Penimbangan

(gram)

Serapan pada Panjang Gelombang

270,40 nm 262,80 nm 256,80 nm 251,20 nm

1 0,0290 0,342 0,485 0,471 0,343

2 0,0290 0,342 0,485 0,471 0,343

3 0,0300 0,345 0,475 0,471 0,349

4 0,0300 0,347 0,480 0,470 0,352

5 0,0300 0,345 0,475 0,471 0,349

6 0,0300 0,345 0,475 0,471 0,349

Tabel 15.2 Data Penimbangan dan Serapan dalam Tablet G Pengulangan Penimbangan

(gram)

Serapan pada Panjang Gelombang

270,40 nm 262,80 nm 256,80 nm 251,20 nm

1 0,0180 0,350 0,544 0,536 0,381

2 0,0180 0,350 0,545 0,533 0,384

3 0,0180 0,350 0,545 0,533 0,384

4 0,0210 0,350 0,545 0,533 0,384

5 0,0210 0,350 0,545 0,533 0,384

6 0,0220 0,353 0,551 0,535 0,385

Tabel 15.3 Data Penimbangan dan Serapan dalam Tablet I Pengulangan Penimbangan

(gram)

Serapan pada Panjang Gelombang

270,40 nm 262,80 nm 256,80 nm 251,20 nm

1 0,0260 0,319 0,485 0,488 0,371

2 0,0260 0,318 0,477 0,488 0,371

3 0,0027 0,319 0,485 0,488 0,371

4 0,0027 0,320 0,493 0,488 0,371

5 0,0028 0,319 0,485 0,488 0,371

(20)

Lampiran 16. Contoh Perhitungan Kadar Teoritis dari Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A

Komposisi tablet A = Teofilin ... 130 mg Efedrin HCl ... 10 mg Berat 20 tablet A = 7516 mg

Berat setara teofilin adalah 10 mg (pemilihan 10 mg adalah agar tahap pengenceran tidak banyak sehingga dapat mengurangi kesalahan pengerjaan), jadi penimbangan berat serbuk tablet A yang mengandung kesetaraan 10 mg teofilin adalah:

Berat serbuk tablet A = berat setara teofilin x berat 20 tablet A kandungan teofilin dalam 20 tablet

= 10 mg x 7516 mg 130 mg x 20 tablet

= 28,91 mg

Dalam 28,91 mg serbuk tablet A mengandung kesetaraan teofilin sebesar 10 mg. Berat serbuk tablet A yang ditimbang adalah 29 mg, jadi berat setara teofilin yang seharusnya adalah:

Berat serbuk tablet A = berat setara teofilin x berat 20 tablet A kandungan teofilin dalam 20 tablet

29 mg = berat setara teofilin x 7516 mg 130 mg x 20 tablet

Berat setara teofilin = 10,0319 mg

Konsentrasi teofilin dan efedrin HCl dalam 29 mg serbuk tablet A yang dimasukkan ke labu tentukur 100 ml adalah:

Teofilin = 10,0319 mg x 1000 100 ml

= 100,319 µg/ml

Efedrin HCl: Kandungan teofilin dalam tablet A = Konsentrasi teofilin Kandungan efedrin HCl dalam tablet A Konsentrasi efedrin HCl

130 mg = 100,319 µg/ml a 10 mg Konsentrasi efedrin HCl Konsentrasi efedrin HCl = 7,7169 µg/ml

(21)

Lampiran 16. (Lanjutan)

Selanjutnya dilakukan pengenceran terhadap teofilin menjadi konsentrasi yang diinginkan (rentang konsentrasi teofilin = 4-12 µg/ml) dan konsentrasi yang saya pilih adalah 7 µg/ml.

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 100,319 µg/ml = 25 ml x 7 µg/ml

V1 = 1,74 ml ≈ 1,75 ml

Konsentrasi teofilin dan efedrin HCl dalam 1,75 ml adalah: Teofilin:

V1 x C1 = V2 x C2

1,75 ml x 100,319 µg/ml = 25 ml x C2

C2 = 7,0223 µg/ml

Efedrin HCl:

V1 x C1 = V2 x C2

1,75 ml x 7,7169 µg/ml = 25 ml x C2

C2 = 0,5402 µg/ml

Karena konsentrasi efedrin HCl tidak dalam rentang 169,6-508,8 µg/ml, jadi perlu dilakukan metode adisi standar terhadap efedrin HCl sebesar:

Efedrin HCl = 137,5 mg x 1000 = 1375 µg/ml 100 ml

V1 x C1 = V2 x C2

5 ml x 1375 µg/ml = 25 ml x C2

C2 = 275 µg/ml

Konsentrasi teoritis teofilin dan efedrin HCl:

• Teofilin = 7,0223 µg/ml

• Efedrin HCl (sebelum penambahan baku) = 0,5402 µg/ml

(22)

Lampiran 17. Rekapitulasi Kadar Teoritis dari Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet

Tabel 17.1 Rekapitulasi Tablet A Pengulangan Berat (mg)

Konsentrasi Teoritis (µg/mL)

Konsentrasi Efedrin HCl yang

ditambahkan (µg/ml) Teofilin Efedrin HCl

1 29 7,0223 0,5402 275

2 29 7,0223 0,5402 275

3 30 7,0570 0,5428 275

4 30 7,0570 0,5428 275

5 30 7,0570 0,5428 275

6 30 7,0570 0,5428 275

Tabel 17.2 Rekapitulasi Tablet G Pengulangan Berat (mg)

Konsentrasi Teoritis (µg/ml)

Konsentrasi Efedrin HCl yang

ditambahkan (µg/ml) Teofilin Efedrin HCl

1 18 7,2780 0,5598 399,8

2 18 7,2780 0,5598 399,8

3 18 7,2780 0,5598 399,8

4 21 7,2045 0,5542 399,8

5 21 7,2045 0,5542 399,8

6 22 7,2912 0,5598 399,8

Tabel 17.3 Rekapitulasi Tablet I Pengulangan Berat (mg)

Konsentrasi Teoritis (µg/ml)

Konsentrasi Efedrin HCl yang

ditambahkan (µg/ml) Teofilin Efedrin HCl

1 26 6,3254 0,4866 322,6

2 26 6,3254 0,4866 322,6

3 27 6,3568 0,4890 322,6

4 27 6,3568 0,4890 322,6

5 28 6,3725 0,4902 322,6

6 28 6,3725 0,4902 322,6

Keterangan:

• Berat 20 Tablet A = 7516 mg

• Berat 20 Tablet G = 4244 mg

(23)

Lampiran 18. Perhitungan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A dengan Operasi Matriks

Pengulangan 1

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.342 0.485 0.471 0.343 � ��1

�2� = � 7.11918 275,517� Pengulangan 2

��1 �2�=

-⎝ ⎜

⎛_�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202 0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.342 0.485 0.471 0.343 � ��1

�2� = � 7.11918 275.517� Pengulangan 3

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.345 0.475 0.471 0.349 � ��1

�2� = � 7.08606 275.528� Pengulangan 4

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.347 0.480 0.470 0.352 � ��1

�2� = � 7.15063 275.521� Pengulangan 5

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.345 0.475 0.471 0.349 � ��1

�2� = � 7.08606 275.528� Pengulangan 6

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.345 0.475 0.471 0.349 � ��1

�2� = � 7.08606 275.528� Keterangan:

C1 = Konsentrasi Teofilin

(24)

Lampiran 19. Perhitungan Kadar Akurasi dari Hasil Matriks Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A

Pengulangan 1

Teofilin = 7,11918 µg/ml

7,0223 µg/ml x 99,69 % = 101,07% Efedrin HCl = (275,517−275)µg/ml

0,5402 µg/ml x 99,60 % = 95,32% Pengulangan 2

Teofilin = 7,11918 µg/ml

7,0223 µg/ml x 99,69 % = 101,07% Efedrin HCl = (275,517−275)µg/ml

0,5402 µg/ml x 99,60 % = 95,32% Pengulangan 3

Teofilin = 7,08606 µg/ml

7,0570 µg/ml x 99,69 % = 100,10% Efedrin HCl = (275,528−275)µg/ml

0,5428 µg/ml x 99,60 % = 96,88% Pengulangan 4

Teofilin = 7,15063 µg/ml

7,0570 µg/ml x 99,69 % = 101,01% Efedrin HCl = (275,521−275)µg/ml

0,5428 µg/ml x 99,60 % = 95,60% Pengulangan 5

Teofilin = 7,08606 µg/ml

7,0570 µg/ml x 99,69 % = 100,10% Efedrin HCl = (275,528−275)µg/ml

0,5428 µg/ml x 99,60 % = 96,88% Pengulangan 6

Teofilin = 7,08606 µg/ml

7,0570 µg/ml x 99,69 % = 100,10% Efedrin HCl = (275,528−275)µg/ml

(25)

Lampiran 20. Perhitungan Statistik Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A

1. Kadar Teofilin

No.

(X)

Kadar Akurasi dari Hasil Matriks (%)

X - X (X - X)2

1. 101,07 0,49 0,2401

2. 101,07 0,49 0,2401

3. 100,10 -0,48 0,2304

4. 101,01 0,43 0,1849

5. 100,10 -0,48 0,2304

6. 100,10 -0,48 0,2304

X = 100,58 Σ (X - X)2= 1,3563

SD =

�

∑��−��

�−1 =

�

1,3563

6−1 =

�

1,3563

5 = 0,5208

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel = (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 5 = 0,975; 5 = 2,5706

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−0,48

0,5208⁄√6

�

= 2,2578 (Data diterima)

t hitung 6 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−0,48

0,5208⁄√6

�

= 2,2578 (Data diterima)

Semua data diterima, maka kadar teofilin sebenarnya untuk α = 0,05; dk =5 adalah:

μ = �� ± ttabel x

�� √�

= (100,58 ± 2,5706 x 0,5208

√6 )

= (100,58 ± 0,55) % 2. Kadar Efedrin HCl

No.

(X)

Kadar Akurasi dari Hasil Matriks (%)

X - X (X - X)2

1. 95,32 -0,83 0,6889

2. 95,32 -0,83 0,6889

3. 96,88 0,73 0,5329

4. 95,60 -0,55 0,3025

5. 96,88 0,73 0,5329

6. 96,88 0,73 0,5329

X = 96,15 Σ (X - X)2= 3,279

SD =

�

∑��−��

�−1 =

�

3,279

6−1 =

�

3,279

5 = 0,8098

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel = (1 – ½ α); dk

(27)

Lampiran 20. (Lanjutan) = 0,975; 5 = 2,5706

0,73

0,8098⁄√6

�

= 2,1547 (Data diterima)

Semua data diterima, maka kadar teofilin sebenarnya untuk α = 0,05; dk =5 adalah:

μ = �� ± ttabel x

�� √�

= (96,15 ± 2,5706 x 0,8098

√6 )

(28)

Lampiran 21. Perhitungan %KV (Koefisien Variasi) Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A

%KV = ��

� x 100%

%KV Teofilin = 0,5208

100,58 X 100% = 0,5178 % %KV Efedrin HCl = 0,8098

(29)

Lampiran 22. Data Perhitungan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet G dengan Operasi Matriks

Pengulangan 1

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.350 0.544 0.536 0.381 � ��1

�2� = � 7.2563 340,354� Pengulangan 2

��1 �2�=

-⎝ ⎜

⎛_�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202 0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.350 0.545 0.533 0.384 � ��1

�2� = � 7.25851 340 ,349� Pengulangan 3

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.350 0.545 0.533 0.384 � ��1

�2� = � 7.25851 340 ,349� Pengulangan 4

��1 �2�=

-⎝ ⎜

⎛_�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202 0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.350 0.545 0.533 0.384 � ��1

�2� = � 7.25851 340 ,349� Pengulangan 5

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.350 0.545 0.533 0.384 � ��1

�2� = � 7.25851 340 ,349� Pengulangan 6

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.353 0.551 0.535 0.385 � ��1

�2� = � 7.35056 340,346� Keterangan:

C1 = Konsentrasi Teofilin

(30)

Lampiran 23. Perhitungan Kadar Akurasi dari Hasil Matriks Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet G

Pengulangan 1

Teofilin = 7,2563 µg/ml

7,2780 µg/ml x 99,69 % = 99,39% Efedrin HCl = (340,354−339,8)µg/ml

0,5598 µg/ml x 99,60 % = 98,67% Pengulangan 2

Teofilin = 7,25851 µg/ml

7,2780 µg/ml x 99,69 % = 99,42% Efedrin HCl = (340,349−339,8)µg/ml

0,5598 µg/ml x 99,60 % = 97,62% Pengulangan 3

Teofilin = 7,25851 µg/ml

7,2780 µg/ml x 99,69 % = 99,42% Efedrin HCl = (340,349−339,8)µg/ml

0,5598 µg/ml x 99,60 % = 97,62% Pengulangan 4

Teofilin = 7,25851 µg/ml

7,2045 µg/ml x 99,69 % = 100,44% Efedrin HCl = (340,349−339,8)µg/ml

0,5542 µg/ml x 99,60 % = 98,60% Pengulangan 5

Teofilin = 7,25851 µg/ml

7,2045 µg/ml x 99,69 % = 100,44% Efedrin HCl = (340,349−339,8)µg/ml

0,5542 µg/ml x 99,60 % = 98,60% Pengulangan 6

Teofilin = 7,35056 µg/ml

7,2912 µg/ml x 99,69 % = 100,50% Efedrin HCl = (340,346−339,8)µg/ml

(31)

Lampiran 24. Perhitungan Statistik Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet G

1. Kadar Teofilin

No.

(X)

Kadar Akurasi dari Hasil Matriks (%)

X - X (X - X)2

1. 99,39 -0,54 0,2916

2. 99,42 -0,51 0,2601

3. 99,42 -0,51 0,2601

4. 100,44 0,51 0,2601

5. 100,44 0,51 0,2601

6. 100,50 0,57 0,3249

X = 99,93 Σ (X - X)2= 1,6569

SD =

�

∑��−��

�−1 =

�

1,6569

6−1 =

�

1,6569

5 = 0,5757

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel = (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 5 = 0,975; 5 = 2,5706

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

0,51

0,5757⁄√6

�

= 2,1702 (Data diterima)

t hitung 6 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

0,57

0,5757⁄√6

�

= 2,4255 (Data diterima)

Semua data diterima, maka kadar teofilin sebenarnya untuk α = 0,05; dk =5 adalah:

μ = �� ± ttabel x

�� √�

= (99,93 ± 2,5706 x 0,5756

√6 )

= (99,93 ± 0,60) % 2. Kadar Efedrin HCl

No.

(X)

Kadar Akurasi dari Hasil Matriks (%)

X - X (X - X)2

1. 98,67 0,55 0,3025

2. 97,62 -0,50 0,2500

3. 97,62 -0,50 0,2500

4. 98,60 0,48 0,2352

5. 98,60 0,48 0,2352

6. 97,64 -0,48 0,2352

X = 98,12 Σ (X - X)2= 1,5081

SD =

�

∑�X−X�

n−1 =

�

1,5081

6−1 =

�

1,5081

5 = 0,5492

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel = (1 – ½ α); dk

(33)

Lampiran 24. (Lanjutan) = 0,975; 5 = 2,5706

−0,48

0,5492⁄√6

�

= 2,1409 (Data diterima)

Semua data diterima, maka kadar efedrin HCl sebenarnya untuk α = 0,05; dk =5 adalah:

μ = �� ± ttabel x

�� √�

= (98,12 ± 2,5706 x 0,5492

√6 )

(34)

Lampiran 25. Perhitungan %KV (Koefisien Variasi) Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet G

%KV = ��

� x 100%

%KV Teofilin = 0,5757

99,93 X 100% = 0,5761% %KV Efedrin HCl = 0,5492

(35)

Lampiran 26. Data Perhitungan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet I dengan Operasi Matriks

Pengulangan 1

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.319 0.485 0.488 0.371 � ��1

�2� = � 6,42212 323 ,098� Pengulangan 2

��1 �2�=

-⎝ ⎜

⎛_�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202 0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.318 0.477 0.488 0.371 � ��1

�2� = � 6,34724 323 ,097� Pengulangan 3

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.319 0.485 0.488 0.371 � ��1

�2� = � 6,42212 323 ,098� Pengulangan 4

��1 �2�=

-⎝ ⎜

⎛_�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202 0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.320 0.493 0.488 0.371 � ��1

�2� = � 6,49699 323,099� Pengulangan 5

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.319 0.485 0.488 0.371 � ��1

�2� = � 6,42212 323 ,098� Pengulangan 6

��1 �2�=

-⎝ ⎜ ⎛

�0.0437 0.0419 0.0314 0.0202_{0.0001 0.0007 0.0009 0.0007}� �

0.0437 0.0001 0.0419 0.0314 0.0007 0.0009 0.0202 0.0007 � 1 ⎠ ⎟ ⎞ −1

X �0.0437 0.0419 0.0314 0.0202

0.0001 0.0007 0.0009 0.0007� � 0.320 0.493 0.488 0.371 � ��1

�2� = � 6,49699 323,099� Keterangan:

C1 = Konsentrasi Teofilin

(36)

Lampiran 27. Perhitungan Kadar Akurasi dari Hasil Matriks Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet I

Pengulangan 1

Teofilin = 6,42212 µg/ml

6,3254 µg/ml x 99,69 % = 101,21% Efedrin HCl = (323,098−322,6)µg/ml

0,4866 µg/ml x 99,60 % = 101,93% Pengulangan 2

Teofilin = 6,34724 µg/ml

6,3254 µg/ml x 99,69 % = 100,03% Efedrin HCl = (323,097−322,6)µg/ml

0,4866 µg/ml x 99,60 % = 101,73% Pengulangan 3

Teofilin = 6,42212 µg/ml

6,3568 µg/ml x 99,69 % = 100,71% Efedrin HCl = (323,098−322,6)µg/ml

0,4890 µg/ml x 99,60 % = 101,43% Pengulangan 4

Teofilin = 6,49699 µg/ml

6,3568 µg/ml x 99,69 % = 101,89% Efedrin HCl = (323,099−322,6)µg/ml

0,4890 µg/ml x 99,60 % = 101,64% Pengulangan 5

Teofilin = 6,42212 µg/ml

6,3725 µg/ml x 99,69 % = 100,47% Efedrin HCl = (323,098−322,6)µg/ml

0,4902 µg/ml x 99,60 % = 101,18% Pengulangan 6

Teofilin = 6,49699 µg/ml

6,3725 µg/ml x 99,69 % = 101,64% Efedrin HCl = (323,099−322,6)µg/ml

(37)

Lampiran 28. Perhitungan Statistik Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet I

1. Kadar Teofilin

No.

(X)

Kadar Akurasi dari Hasil Matriks (%)

X - X (X - X)2

1. 101,21 0,22 0.0484

2. 100,03 -0,96 0.9216

3. 100,71 -0,28 0.0784

4. 101,89 0,90 0.8100

5. 100,47 -0,52 0.2704

6. 101,64 0,65 0.4225

X = 100,99 Σ (X - X)2= 2,5513

SD =

�

∑��−��

�−1 =

�

2,5513

6−1 =

�

2,5513

5 = 0,7143

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel = (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 5 = 0,975; 5 = 2,5706

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−0,52

0,7143⁄√6

�

= 2,2291 (Data diterima)

t hitung 6 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

0,65

0,7143⁄√6

�

= 1,7833 (Data diterima)

Data 2 dan 4 ditolak karena nilai t hitung≥ t tabel, maka data yang dipakai adalah

data nomor 1,3,5, dan 6. No.

(X) Kadar Akurasi

dari hasil

matriks (%) X - X (X - X)

1. 101,21 0,20 0,0400

3. 100,71 -0,30 0,0900

5. 101,64 0,63 0,3969

6. 100,47 -0,54 0,2916

X = 101,01 Σ (X - X)2= 0,8185

SD =

�

∑��−��

�−1 =

�

0,8185

4−1 =

�

0,8185

3 = 0,5223

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = 4-1 = 4-1 = 3 Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 3 = 0,975; 3 = 3,1824

Dasar penerimaan data jika t hitung≤ t tabel.

t hitung =

X−X

SD /√n

t hitung 1 =

�

�−�

�� √�⁄

�

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

0,63

0,5223⁄√4

�

= 2,4129 (Data diterima)

t hitung 6 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−0,54

0,5223⁄√4

�

= 2,0682 (Data diterima)

Semua data diterima, maka kadar teofilin sebenarnya adalah:

μ = �� ± ttabel x ��

√�

= 101,01 ± 3,1824x 0,5223 √4

= (101,01 ± 0,83)% 2. Kadar Efedrin HCl

No.

(X)

Kadar Akurasi dari Hasil Matriks (%)

X - X (X - X)2

1. 101,93 0,38 0,1444

2. 101,73 0,18 0,0324

3. 101,43 -0,12 0,0144

4. 101,64 0,09 0,0081

5. 101,18 -0,37 0,1369

6. 101,39 -0,16 0,0256

X = 101,55 Σ (X - X)2= 0,3618

SD =

�

∑�X−X�

n−1 =

�

0,3618

6−1 =

�

0,3618

5 = 0,2690

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel = (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 5 = 0,975; 5

(40)

Lampiran 28. (Lanjutan) = 2,5706

−0,16

0,2690⁄√6

�

= 1,4572 (Data diterima)

Data 1 dan 4 ditolak karena nilai t hitung≥ t tabel, maka data yang dipakai adalah

data nomor 2,3,4, dan 6. No.

(X) Kadar Akurasi

dari hasil

matriks (%) X - X (X - X)

2. 101,73 0,18 0,0324

3. 101,43 -0,12 0,0144

4. 101,64 -0,09 0,0081

6. 101,39 0,16 0,0256

(41)

Lampiran 28. (Lanjutan)

SD =

�

∑�X−X�

n−1 =

�

0,0805

4−1 =

�

0,0805

3 = 0,1638

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = 4-1 = 4-1 = 3 Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 3 = 0,975; 3 = 3,1824

0,16

0,1638⁄√4

�

= 1,9536 (Data diterima)

Semua data diterima, maka kadar efedrin HCl sebenarnya adalah:

μ = �� ± ttabel x ��

√�

= 101,55 ± 3,1824x 0,1638 √4

(42)

Lampiran 29. Perhitungan %KV (Koefisien Variasi) Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet I

%KV = ��

� x 100%

%KV Teofilin = 0,5223

101,01 X 100% = 0,5171% %KV Efedrin HCl = 0,1638

(43)

Lampiran 30. Spektrum Serapan dari Larutan Baku Campuran Teofilin dan Efedrin HCl

Gambar 7. Pengulangan 1

Gambar 8. Pengulangan 2

Gambar 9. Pengulangan 3

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

1.000

0.800

0.600

0.400

0.200

(44)

Lampiran 30. (Lanjutan)

Gambar 10. Pengulangan 4

Gambar 11. Pengulangan 5

Gambar 12. Pengulangan 6

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

1.000

0.800

0.600

0.400

0.200

(45)

Lampiran 31. Spektrum Serapan dari Sampel Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A

Gambar 13. Pengulangan 1

Gambar 14. Pengulangan 2

Gambar 15. Pengulangan 3

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

1.250

1.000

0.500

(46)

Lampiran 31. (Lanjutan)

Gambar 16. Pengulangan 4

Gambar 17. Pengulangan 5

Gambar 18. Pengulangan 6

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

1.250

1.000

0.500

(47)

Lampiran 32. Spektrum Serapan dari Sampel Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet G

Gambar 19. Pengulangan 1

Gambar 20. Pengulangan 2

Gambar 21. Pengulangan 3

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

0.700

0.600

0.400

0.200

(48)

Lampiran 32. (Lanjutan)

Gambar 22. Pengulangan 4

Gambar 23. Pengulangan 5

Gambar 24. Pengulangan 6

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

0.700

0.600

0.400

0.200

(49)

Lampiran 33. Spektrum Serapan dari Sampel Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet I

Gambar 25. Pengulangan 1

Gambar 26. Pengulangan 2

Gambar 27. Pengulangan 3 nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

0.900

0.800

0.600

0.400

0.200

(50)

Lampiran 33. (Lanjutan)

Gambar 28. Pengulangan 4

Gambar 29. Pengulangan 5

Gambar 30. Pengulangan 6

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

0.900

0.800

0.600

0.400

0.200

(51)

(52)

(53)

(54)

(55)

(56)

DAFTAR PUSTAKA

Andrianto, Y.C. (2009). Validasi Metode Penetapan Kadar Campuran Parasetamol dan Ibuprofen Secara Spektrofotometri UV dengan Aplikasi Metode Panjang Gelombang Berganda. Skripsi. Yogyakarta: Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Halaman 1-3, 23-26.

Bliesner, D.M. (2006). Validating Chromatographic Methods: A Practical Guide. New Jersey: John Wiley and Sons, Inc. Halaman 1.

Budiarto, E. (2004). Metodologi Penelitian Kedokteran: Sebuah Pengantar. Cetakan Pertama. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 46. Day, R.A., dan Underwood, A.L. (1986). Quantitative Analysis. Edisi Kelima.

Penerjemah: Pudjaatmaka, A.H. (2002). Analisis Kimia Kuantitatif. Edisi Kelima. Jakarta: Penerbit Erlangga. Halaman 413-415.

Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 53.

Ditjen BKAK. (2014). Farmakope Indonesia. Edisi Kelima. Jakarta: Kementerian Kesehatan RI. Halaman 57, 363, 1250-1251.

Ermer, J., dan McB., J.H.M. (2005). Method Validation in Pharmaceutical Analysis: A Guide to Best Practice. Weinheim: Wiley-VCH. Halaman 63, 80, 86.

Gandjar, I.G., dan Rohman, A. (2012). Analisis Obat secara Spektrofotometri dan Kromatografi. Cetakan Pertama. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 466-467.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian. 1(3): 117-135.

Huber, L. (2007). Validation and Qualification in Analytical Laboratories. Edisi Kedua. New York: Informa Healthcare USA, Inc. Halaman 125-126. Khopkar, S.M. (1985). Basic Concepts of Analytical Chemistry. Penerjemah:

Saptorahardjo, A., dan Nurhadi, A. (1990). Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: UI-Press. Halaman 215.

Moffat, A.C., Osselton, M.D., dan Widdop, B. (2005). Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons. Edisi Ketiga. London: Pharmaceutical Press. Halaman 351, 517.

Moffat, A.C., Osselton, M.D., dan Widdop, B. (2011). Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons. Edisi Keempat. London: Pharmaceutical Press. Halaman 1337, 2138.

(57)

Mulja, M., dan Suharman. (1995). Analisis Instrumental. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 35 dan 52.

Munson, J.W. (1984). Pharmaceutical Analysis: Modern Methods. Part B. Penerjemah: Harjana. (1991). Analisis Farmasi: Metode Modern. Parwa B. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 334 dan 385.

Owen, T. (1996). Fundamentals of UV-Visible Spectroscopy. Germany: Hewlett-Packard. Halaman 48.

Pratiwi, P. (2011). Optimasi Fase Gerak Metanol-Air dan Laju Alir pada Penetapan Kadar Campuran Teofilin dan Efedrin HCl Dalam Tablet dengan Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Halaman 20.

Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Cetakan Pertama. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 224-233, 240-243, 254-255, 261-262.

Satiadarma, K., Mulja, H.M., Tjahjono, D.H., dan Kartasasmita, R.E. (2004). Asas Pengembangan Prosedur Analisis. Edisi Pertama. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 46-47, 88-91, 97.

Sentuerk, Z., Erk, N., Oezkan, S.A., Akay, C., dan Cevheroglu, S. (2002). Determination of Theophylline and Ephedrine HCl in Tablets by Ratio-Spectra Derivative Spectrophotometry and LC. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 29: 291-298.

Sudjana. (2005). Metode Statistika. Bandung: Penerbit Tarsito. Halaman 93, 145, 201, 225.

Sweetman, S.C. (2009). Martindale: The Complete Drug Reference. Edisi Ketiga Puluh Enam. London: Pharmaceutical Press. Halaman 418.

Tan, T.H., dan Rahardja, K. (2007). Obat-Obat Penting Kasiat, Penggunaan, dan Efek-Efek Sampingnya. Edisi Keenam. Jakarta: PT. Elex Media Komputindo. Halaman 646, 651.

Tarigan, T.O. (2015). Penetapan Kadar Campuran Teofilin dan Efedrin Hidroklorida dalam Sediaan Tablet dengan Metode Spektrofotometri Derivatif. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Halaman 30-47.

Watson, D.G. (2005). Pharmaceutical Analysis: A Textbook for Pharmacy Students and Pharmaceutical Chemists. Edisi Kedua. Penerjemah: Syarief, W.R. (2007). Analisis Farmasi: Buku Ajar Untuk Mahasiswa Farmasi dan Praktisi Kimia Farmasi. Edisi Kedua. Jakarta: EGC. Halaman 126.

(58)

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian

Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental dengan menggunakan metode yang dikembangkan dari metode spektrofotometri secara multikomponen dan adanya percobaan bereksperimen dalam menentukan panjang gelombang yang akan digunakan terhadap penetapan kadar campuran teofilin dan efedrin hidroklorida yang terkandung dalam tiga sediaan tablet merek dagang.

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada bulan Desember 2015 sampai dengan Februari 2016 di Laboratorium Farmasi Fisik Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

3.3 Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah spektrofotometer UV-Visible, Personal Computer (PC) yang dilengkapi dengan software UV Probe 2.42 (UV-1800 Shimadzu), neraca analitik (Ohaus), sonikator (Branson 1510), kuvet, kertas saring, lumpang dan alu, bola karet, spatula, alat gelas dan alat-alat lainnya yang diperlukan dalam penyiapan sampel. Gambar beberapa alat-alat di atas dapat dilihat pada Lampiran 3 halaman 49.

3.4 Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah HCl p.a (Emerck), baku teofilin (sertifikat pengujian dapat dilihat pada Lampiran 34 halaman 96), baku efedrin hidroklorida (sertifikat pengujian dapat dilihat pada Lampiran 35 halaman

(59)

97), tablet Asmadex® (PT Dexa Medica) yang kemudian pada penelitian ini disebut tablet A, tablet Grafasma® (PT Graha Farma) yang kemudian pada penelitian ini disebut tablet G, dan tablet Ifasma® (PT Ifars) yang kemudian pada penelitian ini disebut tablet I.

3.5 Pengambilan Sampel

Metode pengambilan sampel dilakukan cara sampling purposif yang dikenal juga sebagai sampel pertimbangan, dimana sampel ditentukan atas dasar pertimbangan bahwa sampel yang diambil dapat mewakili populasi (Budiarto, 2004). Sampel yang digunakan yaitu tablet A, tablet G, dan tablet I yang mengandung teofilin 130 mg dan efedrin HCl 10 mg. Gambar sediaan dan daftar spesifikasi sediaan tablet masing-masing dapat dilihat pada Lampiran 1 dan 2 halaman 46 dan 48.

3.6 Prosedur Penelitian 3.6.1 Pembuatan Pelarut

Diencerkan 8,3 ml HCl 37% (v/v) dengan 1 Liter akuades (Ditjen POM RI,

1979). Perhitungan pembuatan pereaksi dapat dilihat pada Lampiran 4 halaman 51.

3.6.2 Pembuatan Larutan Induk Baku

3.6.2.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Teofilin

Ditimbang dengan seksama 50 mg baku pembanding teofilin BPFI kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml, dilarutkan dengan HCl 0,1 N hingga larut, dan dicukupkan volume dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi 1000 μg/ml (LIB I). Dari larutan LIB I dipipet 2,5 ml lalu dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml, dicukupkan

(60)

dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 50 μg/ml (LIB II). Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 5 halaman 52.

3.6.2.2 Pembuatan Larutan Induk Baku Efedrin HCl

Ditimbang dengan seksama 50 mg baku pembanding efedrin HCl BPFI, kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml, dilarutkan dengan HCl 0,1 N hingga larut, dan dicukupkan volume dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi 1000 μg/ml (LIB I). Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 53.

3.6.3 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum

3.6.3.1 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Teofilin

Diambil sebanyak 4,05 ml dari LIB II teofilin (konsentrasi = 50 μg/ml), kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml. Selanjutnya larutan diencerkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda, lalu dikocok sampai homogen untuk memperoleh larutan teofilin dengan konsentrasi 8,1 μg/ml. Diukur serapannya pada panjang gelombang 200-400 nm. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 5 halaman 52.

3.6.3.2 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Efedrin HCl

Diambil sebanyak 9 ml dari LIB I efedrin HCl (konsentrasi = 1000 μg/ml) kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml untuk diencerkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda, lalu dikocok sampai homogen untuk memperoleh larutan efedrin HCl dengan konsentrasi 361,9 μg/ml. Diukur serapannya pada panjang gelombang 200-400 nm. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 53.

(61)

3.6.4 Penentuan Panjang Gelombang Analisis dari Tumpang Tindih Spektrum

Dibuat larutan teofilin dengan konsentrasi 8,1 μg/ml dan larutan efedrin HCl dengan konsentrasi 361,92 μg/ml. Kemudian kedua larutan ini diukur serapannya masing-masing pada panjang gelombang 200–400 nm. Selanjutnya spektrum serapan dari masing-masing komponen ditumpang-tindihkan, pembacaan spektrum ini dilakukan pada rentang panjang gelombang antara teofilin dan efedrin HCl bertumpang tindih secara keseluruhan. Kemudian dipilih titik panjang gelombang yang akan digunakan, pemilihan panjang gelombang diambil dari spektrum serapan maksimum masing-masing komponen. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampuran 7 halaman 54.

3.6.5 Penentuan Serapan pada Empat Panjang Gelombang 3.6.5.1 Pembuatan Larutan Standar Teofilin

Larutan standar dibuat dalam 5 labu tentukur 25 ml yang memiliki konsentrasi masing-masing 3,73 μg/ml; 5,60 μg/ml; 8,10 μg/ml; 9,33 μg/ml; dan 11,19 μg/ml, dengan cara mengencerkan sebanyak 1,86 ml; 2,80 ml; 4,05 ml; 4,66 ml; dan 5,59 ml secara berurutan dari LIB II teofilin (konsentrasi = 50 μg/ml) menggunakan pelarut HCl 0,1 N. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 8 halaman 55.

3.6.5.2 Pembuatan Larutan Standar Efedrin HCl

Larutan standar dibuat dalam 5 labu tentukur 25 ml yang memiliki konsentrasi masing-masing 166,67 μg/ml; 250 μg/ml; 361,92 μg/ml; 416,67 μg/ml; dan 500 μg/ml, dengan cara mengencerkan sebanyak 4,17 ml; 6,25 ml; 9,05 ml; 10,42 ml; dan 12,5 ml secara berurutan dari LIB I efedrin HCl (konsentrasi = 1000

(62)

μg/ml) menggunakan pelarut HCl 0,1 N. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 9 halaman 56.

3.6.5.3 Penentuan Serapan Larutan Standar

Larutan standar teofilin dan efedrin HCl yang telah dibuat, diukur absorbansinya pada empat panjang gelombang yang telah ditentukan. Nilai serapan kedua senyawa ditentukan dengan menggunakan persamaan regresi yang dioperasikan pada data konsentrasi dan absorbansi masing-masing komponen pada setiap panjang gelombang pengukuran.

Dari persamaan regresi yang diperoleh : y = ax + b Keterangan:

y = Harga serapan (A)

a = Koefisien regresi yang menunjukkan nilai serapan x = Konsentrasi (µg/ml)

b = Konstanta

3.6.6 Penentuan Spektrum Serapan Campuran Baku Teofilin dan Efedrin HCl

Ditimbang masing masing 10 mg teofilin dan efedrin HCl, masing masing dimasukkan ke labu tentukur 25 ml, dilarutkan dengan pelarut HCl 0,1 N sampai garis tanda. Kemudian dipipet 0,5 ml dari larutan teofilin (konsentrasi = 400 μg/ml) dan 22,62 ml dari larutan efedrin HCl (konsentrasi = 400 μg/ml), campur larutan kedalam labu tentukur 25 ml dan diencerkan dengan pelarut HCl 0,1 N. Diukur serapan pada panjang gelombang 200-400 nm. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 10 halaman 57.

(63)

3.6.7 Penentuan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A, Tablet G, dan Tablet I

Ditimbang 20 tablet merek dagang yang mengandung teofilin 130 mg dan efedrin HCl 10 mg, kemudian digerus dalam lumpang sampai halus dan homogen. Selanjutnya ditimbang seksama sejumlah serbuk setara dengan 10 mg teofilin (penimbangan serbuk dilakukan sebanyak 6 kali pengulangan), dihitung kesetaraan efedrin HCl yang terkandung di dalamnya. Selanjutnya dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dan dilarutkan dengan HCl 0,1 N (dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit), kemudian dicukupkan dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda, dikocok sampai homogen. Larutan tersebut kemudian disaring, lebih kurang 10 ml filtrat pertama dibuang. Filtrat selanjutnya ditampung dan dipipet sebanyak 1,7 ml dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml.

Kemudian ditambahkan 5 ml dari larutan efedrin HCl (konsentrasi = 1000 μg/ml) dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml yang di dalamnya terdapat 1,7 ml filtrat. Campuran tersebut dicukupkan dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda sehingga diperoleh larutan yang di dalamnya terdapat teofilin dengan konsentrasi 7 μg/ml dan efedrin HCl dengan konsentrasi 360 μg/ml. Diukur serapan pada empat panjang gelombang yang telah ditentukan. Bagan alir prosedur penelitian penentuan kadar teofilin dan efedrin HCl dalam tablet A, tablet G, dan tablet I masing-masing dapat dilihat pada Lampiran 11 halaman 58, Lampiran 12 halaman 59, dan Lampiran 13 halaman 60.

Menurut Harmita (2004) dalam metode adisi standar (penambahan bahan baku), sejumlah sampel yang dianalisis ditambah analit dengan kadar yang diperlukan dari kadar analit yang diperkirakan, dicampur dan dianalisis kembali. Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya. Dalam kedua

(64)

metode tersebut, kadar yang diperoleh dinyatakan sebagai rasio antara hasil yang diperoleh dengan hasil yang sebenarnya:

% Kadar Sampel = CA − CB

C_C

x

100 %

Keterangan:

CA = Konsentrasi perolehan sampel setelah penambahan bahan baku

CC = Konsentrasi teoritis sampel sebelum penambahan bahan baku

CB = Konsentrasi baku yang ditambahkan

3.6.8 Perhitungan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Campuran

Perhitungan kadar masing-masing komponen dalam campuran dilakukan atas dasar serapan campuran (Ac) dan serapan tiap komponen pada multi panjang gelombang yang telah diketahui dari hasil pengukuran dengan menggunakan persamaan matriks:

[c] = [[a] x [a1]]-1 x [a] x Ac] Keterangan:

[c] = Kadar komponen dari campuran

[a] = Matriks serapan senyawa penyusun campuran

[a1] = Matriks perubahan bentuk serapan senyawa penyusun campuran

[[a] X [a1]]-1 = Invers matriks dikali transpose matriks serapan senyawa penyusun campuran

[Ac] = Matriks nilai serapan sampel

3.6.9 Analisis Hasil

Analisis hasil dilakukan untuk mengetahui validitas metode yang digunakan dalam penelitian, berikut parameter yang diukur:

a. Akurasi

Nilai akurasi dihitung dari hasil matriks kadar yang terukur dibandingkan dengan kadar teoritis dikalikan % kadar sertifikat analisis. Akurasi dikatakan baik jika berada dalam rentang 90-110% (Andrianto, 2009).

(65)

Akurasi dari hasil matriks diperoleh dengan rumus:

Akurasi dari hasil matriks = Kadar perolehan matriks

Kadar teoritis x % Kadar sertifikat analisis

b. Presisi

Penentuan presisi berdasarkan nilai koefisian variasi (KV) atau Coefficient of variation (CV). Jika KV lebih kecil dari 2% maka dinilai mempunyai presisi yang baik (Andrianto, 2009).

Koefisien variasi (KV) diperoleh dengan rumus:

KV = Standar deviasi kadar hasil

Harga rerata kadar hasil x 100%

c. Analisis Data Penetapan Kadar Secara Statistik

Data perhitungan kadar teofilin dan efedrin HCl dianalisis secara statistik dengan menggunakan uji ttabel distribusi t dapat dilihat pada Lampiran 29

halaman 84 dan Lampiran 30 halaman 85. Rumus yang digunakan adalah:

SD =

�

∑�X−X� 2

n−1

Untuk mencari thitung digunakan rumus:

thitung = X−X SD /√n

Data diterima jika thitung < ttabel pada interval kepercayaan 95% dengan

nilai α = 0,05. Keterangan:

SD = Standard deviation / simpangan baku Xi = Kadar dalam satu perlakuan

−

X _{= Kadar rata-rata dalam satu sampel}

n = Jumlah pengulangan α = Tingkat kepercayaan

(66)

Menurut Sudjana (2005), untuk menghitung kadar teofilin dan efedrin HCl sebenarnya dalam sampel secara statistik dapat digunakan rumus:

μ = X� ± ttabel x SD √n

Keterangan:

SD = Standard deviation / simpangan baku

−

X _{= Kadar rata-rata dalam satu sampel}

n = Jumlah pengulangan

(67)

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penentuan Spektrum Serapan Maksimum

Berdasarkan hasil penelitian, diperoleh panjang gelombang maksimum teofilin (konsentrasi = 8,1 μg/ml) pada 270,40 nm dan untuk efedrin HCl (konsentrasi = 360,4 μg/ml) pada 262,80 nm; 256,80 nm; dan 251,20 nm.

Spektrum serapan maksimum teofilin dan efedrin HCl masing-masing dapat dilihat pada Gambar 4.1 dan Gambar 4.2, sedangkan tumpang tindih spektrum serapan teofilin dan efedrin HCl dapat dilihat pada Gambar 4.3.

Gambar 4.1 Spektrum Serapan Maksimum Teofilin (8,1 μg/ml)

Gambar 4.2 Spektrum Serapan Maksimum Efedrin HCl (360,4 μg/ml) nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

2.500

2.000

1.500

1.000

0.500

0.000

262,80 nm 256,80 nm

(68)

Gambar 4.3 Tumpang Tindih Spektrum Serapan Maksimum Teofilin (8,1 µg/ml) dan Efedrin HCl (360,4 µg/ml)

Penentuan spektrum serapan maksimum teofilin dan efedrin HCl dilakukan pada panjang gelombang 200-400 nm. Panjang gelombang maksimum untuk teofilin dalam suasana asam (A11 = 536a) terletak pada 270 nm, sedangkan

untuk efedrin HCl dalam suasana asam (A11 = 12a) terletak pada 263 nm, 257 nm,

dan 251 nm (Moffat, dkk., 2011).

Berdasarkan teori dengan hasil yang diperoleh, perbedaan panjang gelombang maksimum masing-masing teofilin dan efedrin HCl tidak kurang dan tidak lebih dari 2 nm. Dalam hal ini, panjang gelombang maksimum masing-masing komponen telah memenuhi syarat (Moffat, dkk., 2005). Spektrum serapan maksimum teofilin dan efedrin HCl dapat dilihat pada Gambar 4.4.

Gambar 4.4 Spektrum Serapan Maksimum Teofilin (a) dan Efedrin HCl (b) (Moffat, dkk., 2011)

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

2.500

2.000

1.500

1.000

0.500

(69)

4.2 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Analisis

Tumpang tindih spektrum serapan maksimum teofilin (8,1 µg/ml) dan efedrin HCl (360,4 µg/ml) pada skala yang diatur dapat dilihat pada Gambar 4.5.

Gambar 4.5 Tumpang Tindih Spektrum Serapan Maksimum Teofilin (8,1 µg/ml) dan Efedrin HCl (360,4 µg/ml) pada Skala yang Diatur

Dari Gambar 4.5 dapat dilihat bahwa hasil tumpang tindih spektrum serapan dibuat dengan menggabungkan kedua serapan dari teofilin (konsentrasi 8,1 µg/ml) dan efedrin HCl (konsentrasi 360,4 µg/ml). Pembacaan spektrum serapan ini dilakukan pada panjang gelombang 215-300 nm, karena pada panjang gelombang ini teofilin dan efedrin HCl tumpang tindih secara keseluruhan.

Metode spektrofotometri secara multikomponen dalam menetapkan kadar campuran teofilin dan efedrin HCl, hanya dapat menggunakan dua panjang gelombang maksimum dari masing-masing komponen, yakni 270,40 nm dari teofilin dan 256,80 nm dari efedrin HCl. Sedangkan dua panjang gelombang lain dari efedrin HCl yakni 262,80 nm dan 251,20 nm tidak dapat digunakan karena metode spektrofotometri secara multikomponen hanya menggunakan dua panjang gelombang maksimum dalam perhitungan matriks.

nm .

200.00 250.00 300.00 320.00

0.500

0.400

0.300

0.200

0.100

(70)

Berbeda dengan metode spektrofotometri secara panjang gelombang berganda, metode ini dapat menetapkan kadar campuran yang terdapat lebih dari dua panjang gelombang dari masing-masing komponen dengan syarat panjang gelombang yang diambil merupakan panjang gelombang maksimum (Rohman, 2007). Syarat lainnya bahwa masing-masing komponen masih memiliki serapan pada panjang gelombang yang ditentukan (Andrianto, 2009).

Pada penelitian ini, dipilih empat titik panjang gelombang dalam penetapan kadar teofilin dan efedrin HCl dalam tablet. Pemilihan empat panjang gelombang ini berdasarkan jumlah panjang gelombang maksimum antara teofilin dan efedrin HCl, yakni 270,40 nm dari teofilin; 262,80 nm; 256,80 nm; dan 251,20 nm dari efedrin HCl. Empat titik panjang gelombang analisis yang akan digunakan dalam penetapan kadar dalam tablet dapat dilihat pada Gambar 4.6.

Gambar 4.6 Empat Titik Panjang Gelombang yang akan Digunakan dalam Penetapan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet

Berdasarkan Gambar 4.6, dapat diketahui apakah empat panjang gelombang yang ditentukan memenuhi syarat lainnya bahwa masing-masing komponen masih memiliki serapan pada panjang gelombang yang ditentukan. Pada panjang gelombang 270,40 nm, efedrin HCl masih memberikan serapan dan

nm .

200.00 250.00 300.00 320.00

0.500

0.400

0.300

0.200

0.100

0.000

270,40 nm 262,80 nm

256,80 nm

(71)

merupakan serapan maksimum dari teofilin. Pada panjang gelombang 251,20 nm; 256,80 nm; dan 262,80 nm; teofilin sudah memberikan serapan dan ketiga panjang gelombang tersebut merupakan serapan maksimum dari efedrin HCl. Jadi, keempat panjang gelombang tersebut dapat digunakan untuk menetapkan kadar teofilin dan efedrin HCl dalam tablet.

4.3 Hasil Perbandingan Spektrum Serapan Campuran Teofilin dan Efedrin HCl Sebelum Penambahan Baku dengan Sesudah Penambahan Baku

Spektrum campuran teofilin dan efedrin HCl sebelum penambahan baku dengan sesudah penambahan baku dapat dilihat Gambar 4.6 dan Gambar 4.7.

Gambar 4.7 Spektrum Serapan Campuran Teofilin dan Efedrin HCl (Sebelum Metode Adisi Standar)

Gambar 4.8 Spektrum Serapan Campuran Teofilin dan Efedrin HCl (Sesudah Metode Adisi Standar)

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

1.000

0.800

0.600

0.400

0.200

(72)

Dari Gambar 4.7 dan Gambar 4.8 dapat dilihat bahwa adanya perbedaan spektrum sebelum penambahan baku dengan sesudah penambahan baku. Sebelum penambahan baku, spektrum yang terlihat hanya teofilin sedangkan efedrin HCl tidak terlihat dan tidak dapat dilakukan penetapan kadar efedrin HCl karena konsentrasinya di dalam campuran kecil atau hampir tidak ada.

Oleh karena itu, diperlukan metode adisi standar terhadap efedrin HCl agar konsentrasi efedrin HCl dapat meningkat dan absorbansinya turut meningkat. Menurut Harmita (2004), dalam metode adisi (penambahan bahan baku), sejumlah sampel yang dianalisis ditambah analit dengan kadar biasanya 98% sampai 102% dari kadar analit yang diperkirakan, dicampur dan dianalisis kembali. Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya.

4.4 Hasil Perbandingan Spektrum Serapan Campuran Baku Teofilin dan Efedrin HCl dengan Spektrum Tablet A, Tablet G, dan Tablet I

Spektrum serapan campuran teofilin dan efedrin HCl antara campuran baku dengan campuran yang terdapat dalam tablet A, tablet G, dan tablet I dapat dilihat Gambar 4.9, Gambar 4.10, Gambar 4.11 dan Gambar 4.12.

Gambar 4.9 Spektrum Serapan Campuran Baku Teofilin dan Efedrin HCl

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

1.000

0.800

0.600

0.400

0.200

(73)

Gambar 4.10 Spektrum Serapan Teofilin dan Efedrin HCl pada Tablet A

Gambar 4.11 Spektrum Serapan Teofilin dan Efedrin HCl pada Tablet G

Gambar 4.12 Spektrum Serapan Teofilin dan Efedrin HCl pada Tablet I

nm .

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

0.700

0.600

0.400

0.200

(74)

Berdasarkan Gambar 4.9, Gambar 4.10, Gambar 4.11, dan Gambar 4.12 dapat dilihat bahwa spektrum serapan campuran teofilin dan efedrin HCl pada tablet A, tablet G, dan tablet I memberikan spektrum serapan yang serupa dengan campuran baku teofilin dan efedrin HCl.

Perhitungan kadar teoritis dari campuran baku teofilin dan efedrin HCl dapat dilihat pada Lampiran 14 halaman 61 dan spektrum serapan dari larutan baku yang dibuat sebanyak 6 kali dapat dilihat pada Lampiran 30 halaman 88. Contoh perhitungan kadar teoritis dari teofilin dan efedrin HCl dalam tablet A dapat dilihat pada Lampiran 16 halaman 65 dan rekapitulasi kadar teoritis dari teofilin dan efedrin HCl dalam tablet A, tablet G, dan tablet I dapat dilihat pada Lampiran 17 halaman 67. Spektrum serapan dalam tablet A yang dibuat sebanyak 6 kali dapat dilihat pada Lampiran 31 halaman 90. Spektrum serapan dalam tablet G yang dibuat sebanyak 6 kali dapat dilihat pada Lampiran 32 halaman 92. Spektrum serapan dalam tablet I yang dibuat sebanyak 6 kali dapat dilihat pada Lampiran 33 halaman 94.

4.5 Hasil Penentuan Serapan pada Empat Panjang Gelombang

Setelah dilakukan pengukuran serapan masing-masing larutan dengan berbagai konsentrasi pada empat titik panjang gelombang, yakni 270,40 nm; 262,80 nm; 256,80 nm; dan 251,20 nm, maka data perhitungan serapan teofilin dan efedrin HCl dapat dilihat pada Tabel 4.1 dan Tabel 4.2.

(75)

Tabel 4.1 Data Perhitungan Serapan Teofilin C

(µg/ml)

λ1 = 270,40 nm λ2 = 262,80 nm λ3 = 256,80 nm λ4 = 251,20 nm

A A11 A A12 A A13 A A14

0 0

0,0437 0 0,0419 0 0,0314 0 0,0202

4 0,175 0,169 0,124 0,08

6 0,263 0,25 0,188 0,121

8 0,349 0,334 0,255 0,161

10 0,433 0,42 0,315 0,203

12 0,528 0,503 0,374 0,242

a = 0,0437 a = 0,0419 a = 0,0314 a = 0,0202 b = -0,0003 b = 0 b = 0,0001 b = -0,0004 r = 0,99992 r = 0,99998 r = 0,99986 r = 0,99997 Keterangan:

a = Koefisien regresi yang menunjukkan nilai serapan b = Konstanta

r = Koefisien korelasi

Tabel 4.2 Data Perhitungan Serapan Efedrin HCl C

(µg/ml)

λ1 = 270,40 nm λ2 = 262,80 nm λ3 = 256,80 nm λ4 = 251,20 nm

A A11 A A12 A A13 A A14

0 0

0,0001 0 0,0007 0 0,0009 0 0,0007

169,6 0,018 0,11 0,142 0,113

254,4 0,026 0,166 0,216 0,171

360,4 0,037 0,237 0,307 0,243

424 0,044 0,28 0,363 0,288

508,8 0,053 0,339 0,438 0,348

a = 0,0001 a = 0,0007 a = 0,0009 a = 0,0007 b = 0 b = -0,0018 b = -0,0021 b = -0,0018 r = 0,999861 r = 0,999916 r = 0,999943 r = 0,999924 Keterangan:

a = Koefisien regresi yang menunjukkan nilai serapan b = Konstanta

r = Koefisien korelasi

Data serapan yang diperoleh ini kemudian digunakan untuk menetapkan kadar teofilin dan efedrin HCl dalam tablet dengan menggunakan perhitungan matriks.

(76)

4.6 Kadar dan Koefisien Variasi (%KV) dari Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet

Pembuatan larutan sampel pada tablet A, tablet G, dan tablet I dilakukan metode adisi standar. Sampel yang telah dipreparasi kemudian diukur serapannya pada empat panjang gelombang yang telah diperoleh sebelumnya, yaitu panjang gelombang 270,40 nm; 262,80 nm; 256,80 nm; dan 251,20 nm.

Data serapan larutan sampel yang telah diperoleh tersebut digunakan untuk mengukur kadar masing-masing dengan cara memasukkan data yang tersedia pada rumus perhitungan matriks. Kemudian dari perhitungan akan diperoleh kadar masing-masing komponen campurannya, kemudian dihitung akurasi dari hasil matriks dan koefisien variasinya (%KV). Data konsentrasi, kadar, dan koefisien variasi (%KV) teofilin dan efedrin HCl dalam tablet A, tablet G, dan tablet I masing-masing dapat dilihat pada Tabel 4.3, Tabel 4.4, dan Tabel 4.5.

Tabel 4.3 Data Konsentrasi, Kadar, dan Koefisien Variasi (%KV) Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A

No Sampel

Teofilin Efedrin HCl

Konsentrasi perolehan

matriks (μg/ml )

Konsentrasi teoritis (μg/ml) Kadar akurasi hasil matriks (%) Konsentrasi perolehan matriks (μg/ml )

Konsentrasi teoritis (μg/ml )

Kadar akurasi

hasil matriks

(%) 1 7,11918 7,0223 101,07 0,517 0,5402 95,32 2 7,11918 7,0223 101,07 0,517 0,5402 95,32 3 7,08606 7,0570 100,10 0,528 0,5428 96,88 4 7,15063 7,0570 101,01 0,521 0,5428 95,60 5 7,08606 7,0570 100,10 0,528 0,5428 96,88 6 7,08606 7,0570 100,10 0,528 0,5428 96,88 Rata-rata dari akurasil hasil

matriks

100,58 Rata-rata dari akurasi hasil matriks

96,15

(77)

Tabel 4.4 Data Konsentrasi, Kadar, dan Koefisien Variasi (%KV) Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet G

Tabel 4.5 Data Konsentrasi, Kadar, dan Koefisien Variasi (%KV) Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet I

No Sampel

Teofilin Efedrin HCl

Konsentrasi perolehan

matriks (μg/ml )

Konsentrasi teoritis (μg/ml) Kadar akurasi hasil matriks (%) Konsentrasi perolehan matriks (μg/ml )

Konsentrasi teoritis (μg/ml )

Kadar akurasi

hasil matriks

(%)

1 7,25630 7,2780 99,39 0,554 0,5598 98,67

2 7,25851 7,2780 99,42 0,549 0,5598 97,62

3 7,25851 7,2780 99,42 0,549 0,5598 97,62

4 7,25851 7,2045 100,44 0,549 0,5542 98,60 5 7,25851 7,2045 100,44 0,549 0,5542 98,60 6 7,35056 7,2912 100,50 0,546 0,5598 97,64

Rata-rata dari akurasil hasil matriks

99,93 Rata-rata dari akurasi hasil matriks

98,12

%KV 0,5761 %KV 0,5597

No Sampel

Teofilin Efedrin HCl

Konsentrasi perolehan

matriks (μg/ml )

Konsentrasi teoritis (μg/ml) Kadar akurasi hasil matriks (%) Konsentrasi perolehan matriks (μg/ml )

Konsentrasi teoritis (μg/ml )

Kadar akurasi

hasil matriks

(%) 1 6,42212 6,3254 101,21 0,498 0,4866 101,93 2 6,34724 6,3254 100,03 0,497 0,4866 101,73 3 6,42212 6,3568 100,71 0,498 0,4890 101,43 4 6,49699 6,3568 101,89 0,499 0,4890 101,64 5 6,42212 6,3725 100,47 0,498 0,4902 101,18 6 6,49699 6,3725 101,64 0,499 0,4902 101,39 Rata-rata dari akurasil hasil

matriks

101,01 Rata-rata dari akurasi hasil matriks

101,55

(78)

Hasil penetapan kadar teofilin dan efedrin HCl dalam tablet A, tablet G, dan tablet I masing-masing dapat dilihat pada Tabel 4.6, Tabel 4.7, dan Tabel 4.8.

Tabel 4.6 Hasil Penetapan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet A

Rentang kadar akurasi dari hasil matriks tablet A untuk masing-masing teofilin dan efedrin HCl adalah 100,10%-101,07% dan 95,32%-96,88%. Koefisien variasi (%KV) untuk masing-masing teofilin dan efedrin HCl adalah 0,5178% dan 0,8422%. Teofilin dan efedrin HCl dalam tablet A memiliki nilai presisi yang baik karena %KV teofilin dan efedrin HCl termasuk kurang dari 2%.

Data penimbangan dan serapan dari tablet A dapat dilihat pada Lampiran 15 halaman 64. Perhitungan matriks tablet A dapat dilihat pada Lampiran 18 halaman 68, perhitungan kadar akurasi hasil matriks tablet A dapat dilihat pada Lampiran 19 halaman 69, dan perhitungan statistik kadar teofilin dan efedrin HCl pada tablet Adapat dilihat pada Lampiran 20 halaman 70. Perhitungan koefisien variasi (%KV) tablet A dapat dilihat pada Lampiran 21 halaman 73.

Tabel 4.7 Hasil Penetapan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet G

Rentang kadar akurasi dari hasil matriks tablet G untuk masing-masing teofilin dan efedrin HCl adalah 99,39%-100,50% dan 97,62%-98,67%. Koefisien variasi (%KV) untuk masing-masing teofilin dan efedrin HCl adalah 0,5761% dan

No Obat Tablet A Kandungan di

dalam label

Persyaratan Kandungan ( %) 1 Teofilin (100,58 ± 0,55)%

(130,039-131,469) mg 130 mg 97-102 2 Efedrin HCl (96,15 ± 0,87)%

(9,528-9,702) mg 10 mg 92,5-107,5

No Obat Tablet G Kandungan di

dalam label

Persyaratan Kandungan ( %) 1 Teofilin (99,93 ± 0,60)%

(129,129-130,689) mg 130 mg 97-102 2 Efedrin HCl (98,12 ± 0,58)%

(79)

0,5597%. Teofilin dan efedrin HCl dalam tablet G memiliki nilai presisi yang baik karena %KV teofilin dan efedrin HCl termasuk kurang dari 2%.

Data penimbangan dan serapan dari tablet G dapat dilihat pada Lampiran 15 halaman 64. Perhitungan matriks tablet G dapat dilihat pada Lampiran 22 halaman 74, perhitungan kadar akurasi hasil matriks tablet G dapat dilihat pada Lampiran 23 halaman 75, dan perhitungan statistik kadar teofilin dan efedrin HCl pada tablet Gdapat dilihat pada Lampiran 24 halaman 76. Perhitungan koefisien variasi (%KV) dapat dilihat pada Lampiran 25 halaman 79.

Tabel 4.8 Hasil Penetapan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet I

Rentang kadar akurasi dari hasil matriks tablet I untuk masing-masing teofilin dan efedrin HCl adalah 100,47%-101,64% dan 101,39%-101,73%. Koefisien variasi (%KV) untuk masing-masing teofilin dan efedrin HCl adalah 0,5171% dan 0,1613%. Teofilin dan efedrin HCl dalam tablet I memiliki nilai presisi yang baik karena %KV teofilin dan efedrin HCl termasuk kurang dari 2%.

Data penimbangan dan serapan dari tablet I dapat dilihat pada Lampiran 15 halaman 64. Perhitungan matriks tablet I dapat dilihat pada Lampiran 26 halaman 80, perhitungan kadar akurasi hasil matriks dapat dilihat pada Lampiran 27 halaman 81, dan perhitungan statistik kadar teofilin dan efedrin HCl pada tablet Idapat dilihat pada Lampiran 28 halaman 82. Perhitungan koefisien variasi (%KV) tablet I dapat dilihat pada Lampiran 29 halaman 87.

No Obat Tablet I Kandungan di

dalam label

Persyaratan Kandungan ( %) 1 Teofilin (101,01 ± 0,83)%

(130,234-132,392) mg 130 mg 97-102 2 Efedrin HCl (101,55 ± 0,26)%

(80)

4.7 Hasil Beberapa Penelitian Penetapan Kadar Campuran Teofilin dan Efedrin HCl

Hasil beberapa penelitian penetapan kadar campuran teofilin dan efedrin HCl dapat dilihat pada Tabel 4.9.

Tabel 4.9 Hasil Beberapa Penelitian Penetapan Kadar Campuran Teofilin dan Efedrin HCl Unsur RUJUKAN Cindy Febriani (2016) Sentuerk

(2002) Pratiwi (2011) Tarigan (2015)

Metode Spektrofotometri derivatif secara ratio-spectra Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Spektrofotometri derivatif secara zero-crossing Spektrofotometri UV secara panjang

gelombang berganda

Pelarut Metanol

Fase gerak: metanol-air

(60:40) Laju alir: 0,75ml/menit

HCl 0,1 N HCl 0,1 N

Panjang Gelombang Teofilin: 231,8 nm Efedrin HCl: 250,3 nm

257 nm Teofilin : 244,2 nm Efedrin HCl : 213,8 nm

270,4 nm; 262,8 nm; 256,8 nm;

251,2 nm.

Kadar

Teofilin (99,47 ± 0,65) % (101,45 ± 1,25) %

G: (99,89 ± 1,67)% I: (99,35 ± 2,74)%

A: (100,58 ± 0,55)% G: (99,93 ± 0,60)% I: (101,01 ± 0,83)%

Kadar Efedrin

HCl

(99,12 ± 0,91) % (101,30 ± 1,49) % G: (98,88± 3,21)% I: (96,59 ± 2,32)%

G: (96,15 ± 0,87)% G: (98,12 ± 0,57)% I: (101,59 ± 0,24)%

(1)

4.8 Spektrum Serapan Campuran Teofilin dan Efedrin HCl

(Sesudah Metode Adisi Standar) ... 33

4.9 Spektrum Serapan Campuran Baku Teofilin dan Efedrin HCl ... 34

4.10 Spektrum Serapan Teofilin dan Efedrin HCl pada Tablet A ... 35

4.11 Spektrum Serapan Teofilin dan Efedrin HCl pada Tablet G ... 35

(2)

xvi

DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN

Gambar Halaman

1 Tablet A ... 46

2 Tablet G ... 46

3 Tablet I ... 47

4 Spektrofotometer UV-Visible (Shimadzu UV 1800) ... 49

5 Neraca Analitik (Ohaus) ... 49

6 Sonikator (Branson 1510) ... 50

7 Pengulangan 1 ... 88

8 Pengulangan 2 ... 88

9 Pengulangan 3 ... 88

10 Pengulangan 4 ... 89

11 Pengulangan 5 ... 89

12 Pengulangan 6 ... 89

13 Pengulangan 1 ... 90

14 Pengulangan 2 ... 90

15 Pengulangan 3 ... 90

16 Pengulangan 4 ... 91

17 Pengulangan 5 ... 91

18 Pengulangan 6 ... 91

19 Pengulangan 1 ... 92

20 Pengulangan 2 ... 92

21 Pengulangan 3 ... 92

(3)

23 Pengulangan 5 ... 93

24 Pengulangan 6 ... 93

25 Pengulangan 1 ... 94

26 Pengulangan 2 ... 94

27 Pengulangan 3 ... 94

28 Pengulangan 4 ... 95

29 Pengulangan 5 ... 95

(4)

xviii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Sampel Tablet A, Tablet G, dan Tablet I ... 46 2 Komposisi Tablet A, Tablet G, dan Tablet I ... 48 3 Gambar Alat-Alat Pengukuran Kadar Campuran Teofilin

dan Efedrin HCl ... 49 4 Perhitungan Pembuatan HCl 0,1 N ... 51 5 Bagan Alir Pembuatan Larutan Induk Baku dan Serapan

Maksimum Teofilin ... 52 6 Bagan Alir Pembuatan Larutan Induk Baku dan Serapan

Maksimum Efedrin HCl ... 53

7 Bagan Alir Penentuan Panjang Gelombang Analisis

Teofilin dan Efedrin HCl ... 54 8 Bagan Alir Pembuatan dan Pengukuran Larutan Standar

Teofilin ... 55 9 Bagan Alir Pembuatan dan Pengukuran Larutan Standar

Efedrin HCl ... 56 10 Bagan Alir Pembuatan Larutan Baku Campuran Teofilin

dan Efedrin HCl ... 57 11 Bagan Alir Penentuan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet A ... 58 12 Bagan Alir Penentuan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet G ... 59 13 Bagan Alir Penentuan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet I ... 60 14 Perhitungan Kadar Teoritis dari Campuran Baku Teofilin

dan Efedrin HCl ... 61 15 Data Penimbangan dan Serapan dalam Tablet ... 64 16 Contoh Perhitungan Kadar Teoritis dari Teofilin dan

(5)

17 Rekapitulasi Kadar Teoritis dari Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet ... 67 18 Perhitungan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet

A dengan Operasi Matriks ... 68 19 Perhitungan Kadar Akurasi dari Hasil Matriks Teofilin

dan Efedrin HCl dalam Tablet A ... 69 20 Perhitungan Statistik Kadar Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet A ... 70 21 Perhitungan %KV (Koefisien Variasi) Teofilin dan

Efedrin HCl dalam Tablet A ... 73 22 Perhitungan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet

G dengan Operasi Matriks ... 74 23 Perhitungan Kadar Akurasi dari Hasil Matriks Teofilin

dan Efedrin HCl dalam Tablet G ... 75 24 Perhitungan Statistik Kadar Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet G ... 76 25 Perhitungan %KV (Koefisien Variasi) Teofilin dan

Efedrin HCl dalam Tablet G ... 79 26 Perhitungan Kadar Teofilin dan Efedrin HCl dalam Tablet

I dengan Operasi Matriks ... 80 27 Perhitungan Kadar Akurasi dari Hasil Matriks Teofilin

dan Efedrin HCl dalam Tablet I ... 81 28 Perhitungan Statistik Kadar Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet I ... 82 29 Perhitungan %KV (Koefisien Variasi) Teofilin dan

Efedrin HCl dalam Tablet I ... 87 30 Spektrum Serapan dari Larutan Baku Campuran Teofilin

dan Efedrin HCl ... 88 31 Spektrum Serapan dari Sampel Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet A ... 90 32 Spektrum Serapan dari Sampel Teofilin dan Efedrin HCl

dalam Tablet G ... 92 33 Spektrum Serapan dari Sampel Teofilin dan Efedrin HCl

(6)

34 Sertifikat Pengujian Teofilin ... 96

35 Sertifikat Pengujian Efedrin HCl ... 97

36 Daftar Nilai Distribusi r ... 98

37 Daftar Nilai Distribusi t ... 99