BAB III METODOLOGI PERCOBAAN
3.1 Alat
Alat-alat yang digunakan adalah politube, beaker glass, vortex, waterbath, sentrifuge, labu tentukur, pH meter, gelas ukur, neraca analitik Baeco Germany, pipet
volume, sarung tangan, animal box, spuit, pisau cukur, perangkat KCKT Shimadzu, dan alat lain yang dibutuhkan.
3.2 Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah BPFI Na-diklofenak, TCA, heparin PT. Pratapa Nirmala, akuabides PT.Ikapharmindo Putramas.
3.3 Pembuatan Suspensi CMC 1
Air suling dipanaskan hingga mendidih. Sebanyak 1000 mg CMC ditimbang. Setelah mendidih dimasukkan air suling ke dalam cawan porselen sebanyak 13 dari
bagian air. Ditaburkan CMC ke dalam porselen secara perlahan dan diamkan 30 menit. Diaduk hingga membentuk massa yang transparan. Kemudian ditambahkan air suling
yang masih panas sampai 1000 ml dan dihomogenkan kemudian dimasukkan ke dalam wadah.
Universitas Sumatera Utara
3.4 Pembuatan Suspensi Natrium Diklofenak 0,5
Ditimbang 50 mg Natrium Diklofenak, digerus dan dilarutkan dalam suspensi 1. Digerus kembali hingga homogen dan dimasukkan ke dalam labu 100 ml. Dibilas dan ad
kan sampai garis tanda.
3. 5 Pembuatan Larutan Induk Baku Natrium Diklofenak
Timbang seksama sejumlah 25,0 mg diklofenak BPFI, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml. dicukupkan dengan fase gerak hingga garis tanda. Dikocok sampai
homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 500 mcg ml.
3.6 Pembuatan Buffer Asetat
Sebanyak 6,8 g Na asetat ditimbang pada neraca analitik, dimasukkan ke dalam labu 1000 ml lalu ditambahkan sedikit demi sedikit akuabides sampai Na asetat terlalut
sempurna. Lalu dimasukkan ke dalamnya HCl p dan disesuaikan pHnya sampai pH 4,2
dengan menggunakan alat pH meter. Lalu dicukupkan dengan akuabides sampai garis tanda.
3.7 Pembuatan Fase Gerak
Fase gerak yang digunakan adalah campuran antara MeOH dan buffer asetat dengan perbandingan 90:10, disaring dengan menggunakan membran filter PTFE 0,5 µm
dan diawaudarakan selama 20 menit. Zhao,1995.
Universitas Sumatera Utara
3.8 Penyiapan Alat Kromatografi Cair Kinerja Tinggi