commit to user
31
7. Pengukuran Produksi Gas, VFA, Konsentrasi N-NH
3
, dan pH serta Penghitungan Jumlah Protozoa
Produksi gas dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut :
V
48
– V – Gb
B
Keterangan : PG
= produksi gas V
48
= volume gas ml 48 jam
V = volume gas ml awal inkubasi
Gb = produksi gas rata-rata blanko pada inkubasi 48 jam
B = berat sampel uji dalam mg bahan kering pada suhu 39 C.
BK = bahan kering dalam standar 200 mg Setelah inkubasi 48 jam, 10 ml sub sampel cairan rumen diambil dari
masing-masing tabung dan diukur pH-nya menggunakan pH meter digital Hanna Hi 8520, untuk diketahui pH setelah proses fermentasi.
Sebanyak 0,4 ml sub sampel cairan rumen ditambahkan 2 ml larutan asam metafosforat 25, kemudian disentrifugasi pada 9000 g selama 10 menit
kemudian diambil supernatannya dan dimasukkan ke dalam freezer –20°C sampai dengan analisis volatile fatty acids VFA yang meliputi asam asetat, asam
propionat dan asam butirat menggunakan kromatografi gas. Nilai konsentrasi asam asetat A, asam propionat P dan asam butirat B digunakan untuk
menghitung Nisbah AP dan NGR dengan Rumus : Nisbah AP = AP NGR = A+2B+V P+V
Orskov, 1975
PG ml mg BK 48 jam =
commit to user
32
Penghitungan Nisbah AP dan NGR disini digunakan untuk menggambarkan produksi gas metana. Nisbah AP rendah menyebabkan NGR
juga rendah. NGR adalah perbandingan antara asam lemak terbang yang bersifat non-glukogenik dan glukogenik. Nilai NGR berhubungan erat dengan produksi
gas metana. NGR dan metana mempunyai korelasi positif, yang berarti semakin rendah nilai NGR semakin rendah pula produksi metana.
Sebanyak 2 ml sub sampel dipreparasi disentrifugasi pada 15000 g selama 15 menit dan dianalisis konsentrasi NH
3
menggunakan metode Chaney dan Marbach 1962.
Untuk keperluan penghitungan protozoa, 1 ml sub sampel cairan rumen lainnya ditambahkan 0,8 ml larutan formaldehid salina yang terdiri atas 37 vv
formalin dan 0,9 wv NaCl dengan perbandingan 1 : 9 Ogimoto dan Imai, 1981, kemudian ditambahkan metylen green sebagai pewarna protozoa.
Selanjutnya populasi protozoa dihitung menggunakan hemositometer di bawah mikroskop.
D. Analisis Data
Kategori