pemakaian hanya dalam jumlah milligram. Ukuran pelat yang biasa digunakan yaitu 20 x 20 cm atau 20 x 40 cm. Penjerap yang paling umum ialah silika gel
dan dipakai untuk pemisahan senyawa lipofil maupun campuran senyawa hidrofil. Cuplikan sampel dilarutkan dalam sedikit pelarut sebelum ditotolkan
pada pelat KLTP dimana konsentrasinya sekitar 5-10. Penotolan dapat dilakukan dengan tangan pipet ataupun dengan penotol otomatis
Hostettmann, 1995. Pilihan pelarut ditentukan berdasarkan pemeriksaan pendahuluan
memakai KLT analitik. Karena ukuran partikel penjerap kira-kira sama, pelarut yang dipakai pada KLT analitik dapat dipakai langsung pada KLTP.
Kebanyakan penjerap KLTP mengandung indikator fluoresensi yang membantu mendeteksi kedudukan pita yang terpisah sepanjang senyawa yang
dipisahkan menyerap sinar UV. Untuk senyawa yang tidak menyerap sinar UV, ada beberapa pilihan :
a. Menyemprot dengan air misalnya saponin b. Menutup pelat dengan sepotong kaca kemudian menyemprot salah satu sisi
dengan pereaksi semprot c. Menambahkan senyawa pembanding Hostettmann, 1995.
2.5 Spektrofotometri Sinar Ultraviolet
Spektrofotometer UV pada umumnya digunakan untuk:
1. Menentukan jenis kromofor, ikatan rangkap yang terkonjugasi dan auksokrom dari suatu senyawa organik.
Universitas Sumatera Utara
2. Menjelaskan informasi dari struktur berdasarkan panjang gelombang maksimum suatu senyawa.
3. Mampu menganalisis senyawa organic secara kuantitatif dengan menggunakan hokum Lambert-Beer Dachriyanus, 2004.
Serapan molekul di dalam daerah ultraviolet bergantung pada struktur elektronik dari molekul. Apabila suatu molekul menyerap radiasi ultraviolet, di
dalam molekul tersebut terjadi perpindahan tingkat energi elektron-elektron ikatan pada orbital molekul paling luar dari tingkat energi yang lebih rendah ke
tingkat energi yang paling tinggi Noerdin, 1985. Spektrum ultraviolet dari suatu senyawa biasanya diperoleh dengan
melewatkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu cahaya monokromati melalui larutan encer senyawa tersebut. Sistem gugus atom yang
menyebabkan terjadinya absorpsi cahaya disebut kromofor. Kromofor yang menyebabkan terjadinya transisi σ
→σ ialah senyawa yang mempunyai elektron
pada orbital molekul σ, yaitu molekul organik jenuh yang tidak mempunyai atom dengan pasangan elektron sunyi. Senyawa yang mempunyai
transisi σ→σ mengabsorpsi cahaya pada panjang gelombang sekitar 150 nm Creswell, et al., 1982.
Kromofor yang menyebabkan terjadinya transisi n →σ ialah senyawa
yang hanya mempunyai orbital molekul n dan σ, yaitu molekul organik jenuh yang mempunyai satu atau lebih atom dengan pasangan elektron sunyi.
Kromofor yang menyebabkan terjadinya transisi π →π ialah senyawa yang
memp unyai elektron pada orbital molekul π. Senyawa yang mempunyai
Universitas Sumatera Utara
transisi n →σ dan π→π mengabsorpsi cahaya pada panjang gelombang
sekitar 20 nm Creswell, et al., 1982.
Kromofor yang menyebabkan transisi n →π ialah senyawa yang
mempunyai orbital molekul n m aupun π yaitu senyawa yang mengandung atom
yang mempunyai pasangan elektron sunyi dan orbital π. Senyawa yang mempunyai transisi n
→π mengabsorpsi cahaya yang panjang gelombang 200- 400 nm Creswell, et al., 1982.
Istilah-istilah yang sering digunakan di dalam membicarakan spektra elektronik yaitu:
Kromofor : Suatu gugus kovalen tidak jenuh yang bertanggung jawab untuk serapan elektronik.
Auksokrom : Suatu gugus jenuh dengan elektron tidak terikat dimana bila menempel kepada suatu kromofor dapat mengubah panjang gelombang dan
intensitas serapan. Pergeseran batokromik : Pergeseran serapan ke panjang gelombang yang lebih
panjang karena sisipan atau pengaruh pelarut geseran merah. Pergeseran hipsokromik : Pergeseran serapan ke panjang gelombang yang
lebih pendek disebabkan substitusi atau pengaruh pelarut geseran biru. Efek hiperkromik : Kenaikan dalam intensitas serapan.
Efek hipokromik : Penurunan dalam intensitas serapan Silverstein, 1986.
2.6 Spektrofotometri Sinar Inframerah
