18
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3.3. Hewan Uji
Untuk penelitian antiinflamasi metode induksi karagenan digunakan hewan uji tikus putih jantan galur Sprague Dawley SD dengan berat badan
berkisar antara 170-230 gram yang berumur 3-4 bulan yang diperoleh dari Animal Facility and Modeling Provider Bogor.
3.4. Prosedur Kerja 3.4.1. Pengujian Karakteristik Ekstrak
1. Organoleptis Ekstrak dideskripsikan dengan menggunakan panca indera untuk
mengetahui bentuk, warna, bau dan rasa. 2. Uji Kadar Air
Penetapan kadar air dilakukan dengan cara destilasi toluena. Toluena yang digunakan dijenuhkan dengan air terlebih dahulu, setelah
dikocok didiamkan, kedua lapisan air dan toluena akan memisah, lapisan air dibuang. Sebanyak 10 g ekstrak yang ditimbang dengan seksama
dimasukkan kedalam labu alas bulat dan ditambahkan toluena yang telah dijenuhkan dengan air. Alat dipasang dan toluena dituangkan kedalam
tabung penerima melalui pendingin. Labu dipanaskan hati-hati selama 100 menit, setelah toluena mulai mendidih, penyulingan diatur 2
tetesdetik, lalu 4 tetesdetik. Setelah semua toluena mendidih, pendingin dicuci dengan toluena sambil dibersihkan dengan sikat kecil dan sulingan
dilanjutkan selama 5 menit. Dibiarkan tabung penerima mendingin sampai temperatur kamar. Setelah lapisan air dan toluena memisah
sempurna, volume air di baca dan dihitung kadar air dalam persen terhadap berat ekstrak semula. Saifudin, Rahayu, Teruna, 2011.
3. Uji Kadar Abu Sebanyak 1,067 gram ekstrak etanol kemangi ditimbang lalu
dimasukkan dalam krus silikat yang sebelumnya telah telah dipijarkan dan ditimbang. Setelah itu ekstrak dipijar perlahan-lahan dengan suhu
dinaikan secara bertahap hingga 600 ± 25 C Depkes RI, 1980 dalam
19
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Arifin et al, 2006 hingga arang habis. Kemudian ditimbang hingga bobot tetap.
Kadar Abu = berat abu
berat ekstrak x 100
3.4.2. Penapisan Fitokimia
1 Uji Triterpenoid Ekstrak 0,5 gram dalam tabung reaksi ditambahkan 2 mL etanol 70
kemudian diaduk, ditambahkan 1 mL kloroform dan 1 mL asetat anhidrida lalu didinginkan. Setelah dingin, ditambahkan H
2
SO
4
. Jika terjadi warna kemerahan, menunjukkan adanya triterpenoid Ghosal dan Mandal, 2012.
2 Uji Flavonoid Ekstrak 0,5 gram dalam cawan ditambahkan 2 mL etanol 70 kemudian
diaduk, ditambahkan serbuk magnesium 0,5 g dan 3 tetes HCl pekat. Terbentuknya warna orange sampai merah menunjukkan adanya flavon,
merah sampai merah padam menunjukkan flavanol, merah padam sampai merah keunguan menunjukkan flavanon Mojab et al, 2003.
3 Uji Saponin Ekstrak 0,5 gram dalam tabung reaksi ditambahkan 2 mL etanol 70
kemudian diaduk, ditambahkan dengan 20 mL aquades dan dikocok kuat kemudian diamati selama 15-20 menit. Jika terbentuk busa, menunjukkan
adanya saponin dengan klasifikasi: lemah jika busa 1cm, kuat jika busa 1,2cm dan sangat kuat jika busa 2cm Mojab et al. 2003., Sarma dan Babu,
2011. 4 Uji Alkaloid
Ekstrak 0,5 gram dalam tabung reaksi ditambahkan 2 mL etanol 70 kemudian diaduk, ditambahkan 5 ml HCl 2 N, dipanaskan pada penangas air.
Setelah dingin, campuran disaring dan filtrat ditambahkan beberapa tetes reagen Mayer. Sampel kemudian diamati hingga keruh atau ada endapan
Mojab et al, 2003.
20
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
5 Uji steroid Ekstrak 0,5 gram dalam tabung reaksi ditambahkan 2 mL etanol 70
kemudian diaduk, ditambahkan 2 ml kloroform, ditambahkan 2 ml H
2
SO
4
pekat dengan cara diteteskan pelan-pelan dari sisi dinding tabung reaksi. Pembentukan cincin warna merah menunjukkan adanya steroid Ghosal dan
Mandal, 2012. 6 Uji Tannin
Ekstrak 0,5 gram dalam cawan ditambahkankan 2 mL etanol 70 kemudian diaduk, ditambahkan FeCl
3
sebanyak 3 tetes, terbentuknya warna biru karakteristik, biru-hitam, hijau atau biru-hijau dan endapan menunjukkan
adanya tannin Mojab et al, 2003.
3.4.3. Penyiapan Sediaan Uji a.
Pembuatan Sediaan Ekstrak Etanol Kemangi
Ekstrak ditimbang sesuai dengan dosis yang telah direncanakan lalu dilarutkan dengan aquades, kemudian diaduk hingga homogen.
b. Pembuatan Larutan Natrium Diklofenak
Untuk dosis 1,028 mg 200 gram. Natrium diklofenak ditimbang sebanyak 51,4 mg, dilarutkan dengan
sebagian aquades, diaduk sampai melarut lalu di tambahkan aquades sampai 50 mL.
c.
Pembuatan Suspensi Karagenan 1
Kategori