II. BAHAN DAN METODE
2.1 Persiapan Prebiotik
Prebiotik yang digunakan berasal dari tepung ubi jalar varietas sukuh. Metode yang dilakukan pada persiapan prebiotik berdasarkan metode yang
dilakukan Marlis 2008. Proses pembuatan tepung ubi jalar yaitu ubi jalar segar dibersihkan dan dikupas, kemudian diiris dengan menggunakan slicer dengan
ketebalan ± 1 mm. Setelah itu, irisan ubi jalar dikeringkan dalam oven pada suhu 55
o
C selama 5 jam dan digiling dengan willey mill. Selanjutnya diayak dengan ukuran ayakan 60 mesh. Tepung ubi jalar selanjutnya dicampur air dengan
perbandingan 1:1 wv dan dikukus selama 30 menit pada suhu 100
o
C. Setelah itu tepung ubi jalar dikeringkan menggunakan oven pada suhu 55
o
C selama 18 jam. Selanjutnya, tepung ubi tersebut digiling dan disaring menggunakan ayakan.
Tahap selanjutnya yaitu ekstraksi oligosakarida. Tepung ubi jalar yang sudah kering tersebut disuspensikan ke dalam etanol 70 dengan perbandingan
1:10. Kemudian dihomogenisasi menggunakan magnetic stirer selama 15 jam dan dilakukan penyaringan dengan menggunakan kertas saring steril dan disentrifuse
selama 15 menit dengan kecepatan 5.000 rpm. Filtrat yang telah diperoleh dipekatkan menggunakan evaporator vakum pada suhu 40
o
C. Sebelum filtrat ubi jalar tersebut digunakan, dilakukan pengukuran total
padatan terlarut TPT terlebih dahulu. Hasil dari pemekatan ekstraksi ubi jalar tersebut diencerkan dengan menggunakan akuades steril hingga mencapai kadar
TPT sebesar 5 Marlis 2008. Cawan porselin dimasukkan ke dalam oven selama 1 jam dengan suhu 100
o
C, kemudian cawan tersebut didinginkan dalam desikator dan ditimbang a gram. Setelah itu, sebanyak 1 mL ekstrak
oligosakarida hasil ekstraksi dari ubi jalar ditempatkan pada cawan porselin tersebut, kemudian ditimbang b gram. Cawan porselin berisi ekstrak
oligosakarida tersebut dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 100
o
C selama 24 jam. Setelah itu cawan didinginkan dalam desikator selama 10 menit, kemudian
cawan tersebut ditimbang c gram. Total padatan terlarut dihitung dengan rumus:
TPT= x 100
4
2.2 Persiapan Probiotik