Pengaruh larutan disosiasi dan lama masa inkubasi terhadap jumlah sel

Uji lanjut beda nyata faktor lama waktu inkubasi terhadap viabilitas sel Post Hoc test Viabilitas lama inkubasi jam Subset N 1 2 3 Duncan a,,b 5 6 92,9833 4 6 95,6033 95,6033 3 6 97,4183 97,4183 2 6 99,0733 1 6 100,0000 Sig. 0,078 0,213 0,098 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means. The error term is Mean SquareError = 5.981. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000. b. Alpha = 0,05. 119 Lampiran 4 Profil resipien larva ikan nila pada berbagai umur hari pascamenetas hpm. Tanda panah menunjukkan daerah yang disuntik. Skala=1 mm Lampiran 5 Persentase sel testikular dan sel spermatogonia ikan gurami yang terlabel oleh PKH 26 Sigma Lapang Pandang Ikan donor pertama Ikan donor kedua 1 2 3 1 2 3 Sel testikular 20 18 15 28 23 18 Sel terlabel 18 17 14 25 22 16 persentase sel terlabel 90,00 94,44 93,33 89,29 95,65 88,89 Rerata sel terlabel 91,93±2,90 Spermatogonia 3 2 2 2 2 4 Sel terlabel 2 1 2 1 2 2 Persentase sel terlabel 66,67 50,00 100,00 50,00 100,00 50,00 Rerata sel terlabel 69,44±24,53 120 Lampiran 6 Sintasan ikan nila pascatransplantasi Perlakuan hari pascamenetas Ulangan Jumlah ikan ditransplantasi Sintasan pascatransplantasi 24 jam 2 bulan 1 1 20 75,00 20,00 2 40 87,50 77,50 3 35 85,71 65,71 Rerata 82,74±6,76 54,40±30,37 3 1 25 100,00 64,00 2 40 90,00 55,00 3 40 95,00 70,00 Rerata 95,00±5,00 63,00±7,55 5 1 20 95,00 60,00 2 40 92,50 75,00 3 40 97,50 90,00 Rerata 95,00±2,50 82,96±15,00 7 1 30 100,00 83,33 2 40 90,00 80,00 3 40 92,50 82,50 Rerata 94,17±5,20 81,94±1,73 Kontrol 1 20 100,00 75,00 2 40 100,00 80,00 3 35 100,00 80,00 Rerata 100,00±0,00 82,50±2,50 UJI ANOVA UNTUK SINTASAN LARVA PASCATRANSPLANTASI Sum of Squares df Mean Square F Sig. 24 jam Between Groups 488,827 4 122,207 5,873 0,011 Within Groups 208,078 10 20,808 Total 696,905 14 2 bulan Between Groups 1376,710 4 344,178 1,396 0,304 Within Groups 2646,890 10 246,489 Total 3841,601 14 121 24 jam Umur resipien Subset for alpha = 0.05 N 1 2 Duncan a,,b 1 3 82,7381 7 3 94,1667 3 3 95,0000 5 3 95,0000 4 100,0000 Sig. 1,000 0,175 2 bulan Umur resipien Subset for alpha = 0.05 N 1 Duncan a,,b 1 3 54,4048 7 3 63,8889 3 3 75,0000 5 3 78,3333 4 79,1667 Sig. 0,106 122 Lampiran 7 Efisiensi kolonisasi sel spermatogonia ikan gurami pada resipien ikan nila Perlakuan hari pascamenetas Ulangan Jumlah sampel Jumlah sampel yang membawa sel donor Efisiensi kolonisasi Jantan Betina Jantan Betina 1 1 2 2 1 25 2 2 2 1 1 50 3 3 1 2 1 75 rerata 50±25 3 1 2 2 2 50 2 1 2 1 33,33 3 3 2 3 2 100 rerata 61,1±34,71 5 1 2 2 1 1 50 2 3 1 1 25 3 3 1 2 1 75 rerata 50±25 7 1 2 1 1 33,3 2 3 1 1 25 3 3 2 rerata 19,43±17,33 ANOVA EFISIENSI KOLONISASI Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 2887,796 3 962,599 1,398 0,312 Within Groups 5509,352 8 688,669 Total 8397,148 11 Lampiran 8 Hasil pengukuran ekstraksi DNA gonad ikan gurami menggunakan gene quant Sampel Rasio 260280 Kandungan DNA µgµL Keterangan 11 -1,381 tidak digunakan 12 1,659 0,032 pascapurifikasi 13 1,7 0,240 pascapurifikasi 14 1,679 0,048 pascapurifikasi 15 1,778 0,040 pascapurifikasi 16 0,778 tidak digunakan 21 1,815 0,152 22 1,783 0,416 23 1,756 0,056 24 2,291 0,016 25 1,775 0,192 26 1,652 0,072 31 1,685 1,296 32 1,83 3,576 33 1,702 1,020 34 1,761 0,080 35 1,756 3,284 36 1,845 3,112 L1 1,744 0,596 L2 1,761 0,712 L3 1,837 0,688 ST1 1,871 0,288 ST2 1,802 0,168 ST3 1,882 0,128 ST4 1,750 0,088 ST5 1,727 0,068 G 1,745 0,144 N 1,849 0,064 Keterangan 11-16 = Gonad resipien ikan nila 1 bulan pt 21-26 = Gonad resipien ikan nila 2 bulan pt 31-36 = Gonad resipien ikan nila 3 bulan pt L1-L3 = Resipien larva ikan nila 24 jam pt ST1 = Suspensi sel tesikular ikan gurami dan nila rasio 100000:400000 ST2 = Suspensi sel tesikular ikan gurami dan nila rasio 10000:490000 ST3 = Suspensi sel tesikular ikan gurami dan nila rasio 1000:499000 ST4 = Suspensi sel tesikular ikan gurami dan nila rasio 100:499900 ST5 = Suspensi sel tesikular ikan gurami dan nila rasio 10:499990 G = Suspensi sel testikular ikan gurami N = Gonad ikan nila tanpa transplantasi Lampiran 9 Hasil kuantifikasi DNA produk PCR DNA genom gonad ikan nila menggunakan program unscan IT Gel 6.1 1. Elektroforegram DNA produk PCR DNA genom larutan standar SD dan larva 24 jam pascatransplantasi SegmenSampel Pixel Total Concentration Pixel Total Segment Size Segment Size 1.Marker 500 bp 57.198 14,28 6,96 456 7,2 2. Marker 1000 bp 57.386 14,53 6,98 462 7,3 3.24 jam 80.503 45,35466 9,8 660 10,42 5.24 jam 136.743 120,3454 16,64 782 12,35 6.24 jam 69.534 30,72854 8,46 630 9,95 7.G 107.050 80,75256 13,03 552 8,72 8.100.000 162.553 154,7605 19,78 752 11,88 9.10.000 52.548 8,079326 6,4 598 9,44 10.1.000 49.447 3,944437 6,02 720 11,37 11.100 48.718 2,972385 5,93 720 11,37 konsentrasi DNA standar 2. Elektroforegram DNA produk PCR DNA genom gonad ikan nila umur 1 bulan pascatransplantasi. SegmenSampel Pixel Total Concentration Pixel Total Segment Size Segment Size 1.Marker 500 bp 124.215 14,28 20,27 960 14,38 2.Marker 1000 bp 118.440 14,53 19,32 1.280 19,17 3.12 169.799 12,30642 27,7 1.771 26,52 4.13 200.492 10,97756 32,71 2.666 39,93 konsentrasi DNA standar 3. Elektroforegram DNA produk PCR DNA genom gonad ikan nila umur 2 bulan dan 3 bulan pascatransplantasi SegmenSampel Pixel Total Concentration Pixel Total Segment Size Segment Size 1.Marker 1000 bp 290.640 14,28 4,45 2.496 5,42 2.Marker 500 bp 299.723 14,53 4,59 2.604 5,66 3.31 395.818 17,1739 6,07 3.710 8,06 4.32 419.128 17,81525 6,42 4.214 9,15 4.34 274.798 13,84417 4,21 3.456 7,51 5.35 382.579 16,80964 5,86 3.520 7,65 6.36 878.062 30,4423 13,46 4.992 10,85 7.G 513.354 20,40777 7,87 3.094 6,72 8.21 806.373 28,46985 12,36 3.744 8,13 9.22 766.415 27,37046 11,74 3.488 7,58 10.23 613.787 23,17107 9,41 3.952 8,59 11.24 417.854 17,7802 6,4 2.600 5,65 12.25 301.396 14,57598 4,62 2.392 5,2 13.26 165.639 10,84078 2,54 1.768 3,84 konsentrasi DNA standar Lampiran 10 Hasil analisis ragam estimasi konsentrasi dan jumlah sel resipien ikan nila 1 bulan, 2 bulan dan 3 bulan pascatransplantasi Gonad dari resipien pasca transplantasi Konsentrasi DNA ngµ L Jumlah sel 24 jam 25,92 29.583 24 jam 68,77 77.963 24 jam 17,56 20.147 1 bulan 0,00 323 1 bulan 3,52 4.293 1 bulan 3,14 3.864 1 bulan 0,00 323 2 bulan 16,27 18.690 2 bulan 15,64 17.981 2 bulan 13,24 15.272 2 bulan 10,16 11.794 2 bulan 8,33 9.727 2 bulan 6,19 7.317 3 bulan 9,81 11.403 3 bulan 10,18 11.816 3 bulan 0,00 323 3 bulan 7,91 9.254 3 bulan 9,61 11.168 3 bulan 17,40 19.963 ANOVA KONSENTRASI DNA DAN JUMLAH SEL IKAN GURAMI Sum of Squares df Mean Square F Sig. Konsentrasi Between Groups 247,189 2 123,595 6,452 0,011 Within Groups 249,038 13 19,157 Total 496,227 15 Jumlah sel Between Groups 3,152E8 2 1,576E8 6,459 0,011 Within Groups 3,172E8 13 2,440E7 Total 6,325E8 15 Uji beda nyata terhadap konsentrasi DNA Duncan a,,b Perlakuan Subset for alpha = 0,05 N 1 2 1 4 1,6650 3 6 9,1517 2 6 11,6383 Sig. 1,000 0,379 Uji beda nyata terhadap jumlah sel Duncan a,,b Perlakuan Subset for alpha = 0,05 N 1 2 1 4 2200,75 3 6 10654,50 2 6 13463,50 Sig. 1,000 0,378 Lampiran 11 Jumlah dan viabilitas spermatogonia ikan gurami dari testes pascapreservasi serta analisis ragam terhadap viabilitas spermatogonia Lama preservasi jam Ulangan Jumlah spermatogoniamg testes Viabilas spermatogonia 1 27.556 96.77 2 25.333 100.00 3 41.333 93.55 6 1 44.211 84.13 2 40.580 91.43 3 44.667 89.55 12 1 28.406 75.51 2 30.725 81.13 3 32.381 76.47 24 1 10.526 80.00 2 14.902 73.68 3 8.667 69.23 48 1 26.133 44.90 2 5.797 60.00 3 27.333 58.54 ANOVA Sum of Squares df Mean Square F Sig. viabilitas Between Groups 3079,162 4 769,790 29,058 0,000 Within Groups 264,918 10 26,492 Total 3344,080 14 Uji beda nyata Duncan a Periode preservasi jam Subset for alpha = 0,05 N 1 2 3 48 3 54,4800 24 3 74,3033 12 3 77,7033 6 3 88,3700 3 96,7733 Sig. 1,000 0,437 0,073 Lampiran 12 Sintasan resipien ikan nila 24 jam pascatransplantasi dan efisiensi kolonisasi resipien dengan sumber donor sel testikular ikan gurami dari gonad pascapreservasi Periode preservasi jam Ulangan Sintasan 24 jam pt Efisiensi kolonisasi 1 90 83,33 50 50 2 100 3 90 Rata-rata 93,33 ± 5,77 61,11 ± 19,24 24 1 90 85 100 66,67 50 50 2 3 Rata-rata 91,67 ± 7,64 55,56 ± 9,62 48 1 80 90 90 50 50 66,67 2 3 Rata-rata 86,67 ± 5,77 55,56 ± 9,62 ANOVA Sum of Squares df Mean Square Sintasan 24jam pt Between Groups 72,222 2 36,111 Within Groups 250,000 6 41,667 Total 322,222 8 Sintasan 1 bulan pt Between Groups 16,667 2 8,333 Within Groups 883,333 6 147,222 Total 900,000 8 Efisiensi kolonisasi Between Groups 61,679 2 30,840 Within Groups 1111,111 6 185,185 Total 1172,790 8 F Sig. Sintasan 24jam pt Between Groups 0,867 0,467 Sintasan 1 bulan pt Between Groups 0,057 0,945 Efisiensi kolonisasi Between Groups 0,167 0,850 ANOVA SINTASAN DAN EFISIENSI KOLONISASI Sum of Squares df Mean Square F Sig. Sintasan 24jam Between Groups 72,222 2 36,111 0,0867 0,467 Within Groups 250,000 6 41,667 Total 322,222 8 Efisiensi kolonisasi Between Groups 61,679 2 30,840 0,167 0,850 Within Groups 1111,111 6 185,185 Total 1172,790 8 DAFTAR ISTILAH MENURUT KAMUS Derivat : turunan. Diferensiasi : suatu tahap perkembangan embrio dari fase muda ke fase yang definitif. Disosiasi : pemisahan atau penguraian. Donor : pemberi, masuk dan berintegrasi dengan inang Duktus deferens : vas deferens, saluran mani yang menyalurkan mani dari epididimis ke urethra. Epididymis : epididimis, anak testis pelir. Sperma dari vas efferensia mengalami pematangan di epididimis sehingga jadi motil dan bergerak lalu disalurkan ke vas deferens. Filogenetik : proses perkembangan evolusi makhluk hidup Fluoresens : berbinar atau pendar fluor, membuat sediaan jadi berbinar jika dilihat di bawah mikroskop fluorescence. Grid : kisi; garis imajiner membujur dan melintang Immune : imun,kebal Imunokompetensi : mampu berespons imun Imunodefisiensi ; tak mampu menghasilkan imunitas. Larva : suatu tahap perkembangan setelah sel telur menetas, memiliki bagian tubuh khas yang tidak dimiliki oleh tahap dewasa dan aktif bergerak. Mutan : sel atau individu yang terbentuk akibat mutasi . Nutfah : benih Niche : nike, relung yaitu cara hidup pada suatu habitat. Pluripoten : memiliki potensi menumbuhkan atau berkembang menjadi beberapa macam sel.atau jaringan. Preparat : bahan yang disiapkan secara kimiawi, sediaan Preservasi : pengawetan, pemeliharaan. Primordial germ cell PGC : calon atau bakal sel benih. Proliferasi : penggandaan atau perbanyakan gametogonium secara mitosis untuk membentuk gametosit. Resipien : penerima Resiprok : berbalasan, sebaliknya. Perkawinan F1 betina x resesif jantan, resiproknya F1 jantan x resesif betina. Testikular : testis Tubuli seminiferi : Jamak dari tubulus, saluran-saluran halus penghasil semen dalam testis. Xenogeneic : xenogenik, berasal dari berbagai spesies. Xenotransplantasi : Transplantasi xenogenik, transplantasi sel donor ke resipien yang berbeda spesies. iii ABSTRACT IRMA ANDRIANI. Xenotransplantation of Giant Gourami Testicular Germ Cells into Larvae of Nile Tilapia. Under direction of ALIMUDDIN, KOMAR SUMANTADINATA, and ITA DJUWITA. We were attempting to develop testicular germ cell TGC transplantation as a tool to produce surrogate broodstock of commercially valuable fish and long generation time species. Giant gourami testis had been used as a model for donor and Nile tilapia larvae as recipient. The research was conducted to study the competency of giant gourami TGC as donor and Nile tilapia larvae as recipient for xenotransplantation of giant gouramy TGC into larvae of Nile tilapia. We developed TGC xenotransplantation system by some steps as follow : 1 The characterization of spermatogonia to identify optimal donor of giant gourami based on body weight using histological approach, 2 The determination of dissociation method for giant gourami testicular tissue by comparing two different composition of dissociation medium with 5 hours incubation time, 3 Optimizing the timing of intraperitoneal TGC transplantation into peritoneal cavity of 1, 3, 5 and 7 days post hatching dph recipient by investigating the colonization efficiency of donor cell labelled PKH 26 fluorescent membrane dye under fluorescent microscope and of molecular technique using growth hormone of giant gourami specific primer, 4 Analyzing the proliferation of spermatogonia colonized in recipient gonad using molecular approach, and 5 The evaluation of TGC isolated from testis of giant gourami which preserved at 4 o C using NaCl 0.7 for 6, 12, 24 and 48 hours and then transplanted into peritoneal cavity of recipient. The result showed that the donor with abundant spermatogonia stem cell and A type spermatogonia cell diameter = 14.43 –20.53 µm were found in giant gourami with body weight ranged from 500 –1000 g. The dissociation method produced high number of spermatogonia with high viability was one used medium PBS containing trypsin, DNase, CaCl 2 , HEPES, FBS and incubated for 3 hours. The highest colonization efficiency was observed at 3 dph recipient 61.1±34.71 suggesting that 3 dph Nile tilapia larvae was the optimum recipient for transplantation. Intraperitoneally transplanted xenogenic spermatogonia efficiently colonized the ovary as well with sex ratio male out of female was 1:1, and possibly proliferated indicated by cell cluster forming and the increase of DNA concentration of donor in recipient testis during time interval 1 month to 2 or 3 month pt. The successful colonization of spermatogonia isolated from preserved testis were also observed with colonization efficiency not differed significantly as from non preserved testis. In conclusion : the testis of giant gouramy was composed of cells that had competency as donor for xenotransplantation using Nile tilapia larvae as recipient. Key words : xenotransplantation, testicular germ cell, giant gourami, Nile tilapia, colonization efficiency, proliferation, preservation.

I. PENDAHULUAN

LATAR BELAKANG Beberapa tahun terakhir ini, para peneliti mencoba mengatasi masalah- masalah reproduksi pada hewan melalui teknologi transplantasi sel germinal jantan atau disebut juga transplantasi sel testikular. Transplantasi merupakan teknik pemindahan organ, jaringan atau sel tertentu dari donor ke resipien. Jika hewan donor dan resipien merupakan individu yang sama disebut autotransplantasi transplantasi autogenik, sedangkan jika hewan donor dan resipien merupakan individu yang berbeda namun dari spesies yang sama disebut allotransplantasi transplantasi singenik. Transplantasi sel atau jaringan dari hewan donor ke resipien yang berasal dari individu dan spesies yang berbeda disebut xenotransplantasi transplantasi xenogenik Johnston et al. 2000. Transplantasi sel testikular memiliki banyak aplikasi dalam bidang biologi, peternakan dan perikanan di antaranya untuk 1 menjajaki proses-proses perkembangan dan diferensiasi sel germinal gametogenesis, 2 terapi regeneratif penyakit organ reproduksi, 3 memproduksi hewan transgenik melalui sistem transfer gen yang dimediasi sel, dan 4 menciptakan sistem pembenihan dimana spesies target dapat diproduksi dari induk yang lain atau dikenal dengan istilah induk pengganti atau surrogate broodstock Brinster Zimmermann 1994, Okutsu et al. 2006a. Penelitian transplantasi sel germinal telah banyak dilakukan pada vertebrata tingkat tinggi. Transplantasi sel germinal pertama kali diperkenalkan pada ayam oleh Tajima et al. 1993, kemudian pada tikus dengan menggunakan sel punca spermatogonia Brinster Zimmerman 1994 dan selanjutnya pada hewan- hewan lain seperti kambing, babi dan primata Schatt 2002, Dobrinski 2005. Pada bidang perikanan, teknologi transplantasi sel germinal pertama kali dikembangkan pada ikan rainbow trout menggunakan sel germinal bakal gonad yang disebut PGC primordial germ cell sebagai sel donor. Pada awalnya Takeuchi et al. 2003 melakukan transplantasi sel donor PGC dari ikan rainbow trout transgenik ke dalam rongga peritoneal larva ikan rainbow trout dalam rangka pembuatan model sistem transfer gen yang diperantarai oleh sel. Allotransplantasi tersebut menghasilkan sel donor yang mampu bermigrasi, mampu bergabung terkolonisasi dengan sel-sel somatik saluran bakal gonad larva, dan mampu berdiferensiasi hingga menjadi sel gamet yang fungsional. Penelitian ini telah membuktikan bahwa sel donor yang berasal dari individu berbeda tidak mengalami penolakan oleh sistem imun resipien. Keberhasilan transplantasi tersebut menjadi inspirasi bagi Takeuchi dan koleganya untuk menerapkan sistem transplantasi menggunakan sel donor PGC ikan rainbow trout Oncorhynchus mykiss ke resipien yang berbeda spesies ikan salmon masu Oncorhynchus masou yang dikenal dengan istilah xenotransplantasi. Meskipun ikan rainbow trout memiliki masa matang gonad yang lebih lama sekitar 2 tahun dari ikan salmon sekitar 1 tahun namun PGC ikan rainbow trout yang ditransplantasikan pada ikan salmon ternyata dapat melakukan gametogenesis secara normal pada gonad ikan salmon masu bahkan diperoleh sel spermatozoa ikan rainbow yang fungsional dari induk ikan salmon yang berumur 1 tahun pascatransplantasi Takeuchi et al. 2004. Ikan salmon hasil xenotransplantasi tersebut merupakan model surrogate broodstock atau induk pengganti pertama pada ikan. Disebabkan oleh jumlah PGC yang sedikit dan sulit ditemukan, penelitian transplantasi sel germinal pada ikan ini kemudian dikembangkan dengan menggunakan sel testikular sebagai sel donor seperti yang telah dilakukan oleh Okutsu et al. 2006a, Lacerda et al. 2008, Takeuchi et al. 2009. Penggunaan sel testikular sebagai sel donor ini didasari atas kesamaan sifat tipe sel testikular spermatogonia dengan PGC Okutsu et al. 2006a. Spermatogonia pada allotransplantasi sel testikular ikan rainbow trout ternyata tidak hanya mampu berdiferensiasi menjadi sel gamet jantan yang fungsional tetapi juga mampu berdiferensiasi menjadi sel gamet betina yang fungsional Okutsu et al. 2006b. Kemampuan sel spermatogonia berdiferensiasi menjadi spermatosit dan derivatnya serta menjadi oosit dan derivatnya disebut sebagai development plasticity atau sexual plasticity Okutsu et al. 2006a, Yoshizaki et al. 2010. Xenotransplantasi pada hewan ternak yang memiliki kekerabatan jauh dan imunokompetensi yang berbeda sangat memungkinkan berhasil meskipun ada juga kegagalan xenotransplantasi yang diakibatkan oleh hubungan filogeni yang jauh Hill Dobrinsky 2006. Xenotransplantasi sel testikular manusia ke tubuli seminiferi mencit mampu menghasilkan kolonisasi dan produksi spermatozoa manusia pada 25 resipien Sofikitis et al. 1999. Sebaliknya, xenotransplantasi hamster ke tikus Ogawa et al. 1999 dan primata ke tikus Nagano et al. 2001 mengalami proses spermatogenesis tidak sempurna yang diduga karena perbedaan morfologis sel donor dan gonad resipien serta hubungan filogeni yang jauh. Perbedaan hasil xenotransplantasi tersebut menunjukkan bahwa faktor yang menentukan terjadinya inkompatibilitas antara hewan donor dan resipien bersifat spesifik atau dapat berbeda pada spesies tertentu. Pada dekade terakhir xenotransplantasi sel testikular juga telah dilakukan pada beberapa jenis ikan yang berbeda spesies hingga berbeda famili dan menghasilkan sel donor yang mampu bermigrasi ke saluran bakal gonad, terkolonisasi dan berproliferasi pada gonad resipien Yazawa et al. 2010 bahkan ada pula yang dapat menghasilkan sel gamet jantan yang fungsional Majhi et al. 2009. Namun belum terdapat informasi apakah kemampuan development plasticity spermatogonia pada resipien yang berbeda jenis juga masih dapat terjadi. Keberhasilan xenoransplantasi sel testikular pada beberapa jenis ikan telah memberikan peluang dan harapan bagi aplikasi xenotransplantasi ini untuk dijadikan sebagai alternatif metode pembenihan dengan cara pembuatan induk pengganti untuk ikan-ikan yang memiliki nilai ekonomis tinggi dan untuk ikan- ikan langka namun sulit penanganan produksinya. Oleh karena itu aplikasi teknologi transplantasi sel germinal ini perlu diupayakan di Indonesia. Penelitian ini merupakan upaya awal penerapan teknologi xenotransplantasi di bidang perikanan di Indonesia. Sebagai model hewan donor digunakan ikan gurami Osphronemus goramy dan sebagai model resipien digunakan ikan nila Oreochromis niloticus. Ikan gurami digunakan sebagai model hewan donor karena ikan gurami adalah ikan air tawar ekonomis penting yang mencapai umur matang gonad pertama yang lama. Menurut SNI 2000, ikan gurami mencapai matang gonad pertama pada umur 24 –30 bulan untuk jantan dan 30–36 bulan untuk betina. Teknologi xenotransplantasi sel germinal sangat tepat digunakan untuk pembenihan ikan-ikan yang matang gonadnya lama Takeuchi et al. 2004. Jika sel testikular spermatogonia ikan gurami ditransplantasikan ke resipien yang