b. Diencerkan dengan aquades yang telah dipanaskan sebelumnya sebanyak 200
ml c.
Aduk media sampai larut d.
Sterilkan media di dalam newclave
3.2.3 Sterilisasi Alat dan Bahan
a. Siapkan newclave, isi dengan air ± 2 liter
b. Masukkan bahan-bahan yang akan disterilkan, seperti: Botol Schott Duran
yang telah diisi dengan aquades, media, tabung reaksi dan petridish. c.
Tutup cover newclave dan pastikan air exhaust tubet pada posisi yang tepat. d.
Kunci cover dengan Bakelite wing nut. e.
Arahkan Switch pada posisi ON. f.
Diatur heat control knob pada posisi maksimum 10, pilot light akan hidup dan berwarna merah mengidentifikasi bahwa alat sedang beroperasi.
g. Tunggu sampai tekanan di pressure gauge hingga 1,2 bar dan temperature
121
o
C. h.
Setelah tekanan tercapai, set control knob pada posisi 5. i.
Setelah 10 menit turunkan control knob pada posisi minimum 0. j.
Biarkan hingga tekanan di pressure gauge pada posisi 0 psi. k.
Kemudian buka kunci cover. l.
Bahan-bahan tersebut telah steril dan siap digunakan.
3.2.4 Pembuatan Alkohol 70
a. Ambil 730 ml Alkohol 96, masukkan ke dalam labu tentukur 1000 ml.
b. Diencerkan dengan aquades sampai garis tanda.
3.2.5 Pengambilan Sampel
a. Sediakan 3 botol Schott Duran 100 ml
b. Kemudian semprot terlebih dahulu bagian luar botol Schott Duran dan bagian
luar dinding petkran pada tangki air treated dengan alkohol 70. c.
Buka petkran pada tangki air treated dan masukkan kedalam masing-masing botol Schott Duran sebanyak 100 ml.
d. Kemudian semprot kembali bagian luar botol Schoot Duran dengan alkohol
70.
3.2.6 Pemeriksaan Cemaran Mikroba Total Count 3.2.6.1 Pengenceran Sampel
a. Masukkan 1 ml sampel kedalam tabung reaksi yang sudah berisi 9 ml
aquadest streril, sebanyak 6 tabung reaksi. b.
Dilarutkan sampel pada tabung pertama, homogenkan sebagai 10
-1
. c.
Dipipet 1 ml dari tabung 10
-1
lalu masukkan kedalam tabung 10
-2
, lakukan sampai pengenceran ke 10
-6
. d.
lakukan proses yang sama pada setiap sampel air Treated Water carbon 1, carbon 2 dan carbon 3.
3.2.6.2 Media Plate Count Agar PCA
a. Masukkan hasil pengenceran 10
-6
kedalam cawan petri, masing-masing sampel dilakukan 2 kali.
b. Kemudian masukkan media PCA sampai ± 3 ml , homogenkan.
c. Lakukan proses yang sama pada setiap sampel air Treated Water carbon 1,
carbon 2 dan carbon 3.
