3. METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan April 2011 sampai bulan Oktober 2011 di Laboratorium Mikrobiologi dan Kimia SEAFAST CENTER, Pilot Plant
PAU, dan Laboratorium Pengolahan Pangan ITP Institut Pertanian Bogor.
3.2 Isolat
Isolat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Cronobacter spp. DES b7a dan DES b10 yang diisolasi dari makanan bayi, DES c13 yang diisolasi dari
maizena, DES d3 yang diisolasi dari bubuk coklat Dewanti-Hariyadi et al. 2011, YR t2a dan YR c3a yang diisolasi dari susu formula bayi Meutia 2008, dan E6
yang diisolasi dari formula lanjutan bayi Estuningsih et al. 2006. Isolat Cronobacter spp. yang digunakan dalam penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Daftar isolat Cronobacter spp. yang digunakan
No Nama Isolat
Asal Isolat Nomor Akses
Pustaka
1 DES b7a
Makanan Bayi -
Dewanti-Hariyadi et al.2011 2
DES b10 Makanan bayi
JF800179 Dewanti-Hariyadi et al.2011
3 DES c13
Maizena JF800181
Dewanti-Hariyadi et al.2011 4
DES d3 Bubuk Coklat
- Dewanti-Hariyadi et al.2011
5 YR t2a
Susu Formula Bayi JF800182
Meutia 2008 6
YR c3a Susu Formula Bayi
JF800183 Meutia 2008
7 E6
Formula Lanjutan Bayi AY624069
Estuningsih et al. 2006 8
ATCC 51329 Klinis
AY752937 Iversen et al. 2004
3.3 Bahan
Bahan yang digunakan adalah susu skim yang dibeli dari supermarket di wilayah Bogor, akuades steril, dan alkohol 70. Media dan bahan kimia yang
digunakan antara lain Brain Heart Infusion BHI Oxoid CM0225, Buffered Peptone Water BPW Oxoid CM0509, Tryptose Soy Broth TSB Oxoid
CM0129, Druggan Forsythe Iversen DFI Oxoid, CM1055, Tryptose Soy Agar TSA Oxoid CM0131, Yeast Extract Oxoid LP 0021. Untuk pewarnaan Gram
digunakan larutan kristal violet, ammonium oksalat, iodine, etanol 95, safranin, dan minyak emersi, berasal dari laboratorium mikrobiologi SEAFAST Center
IPB. Sedangkan untuk mengatur RH desikator penyimpanan digunakan garam
jenuh teknis K
2
CO
3
RH ±50, NaNO
3 2
RH ± 70 dan BaCl
2
RH±90 yang diperoleh toko kimia Brataco Bogor.
3.4 Alat
Kategori