Covey et al., 1991. Sedangkan peptida dengan waktu retensi lebih banyak menunjukkan mengandung asam amino Met yang ditandai adanya peak dengan
mz 149.8 [Met+H]
+
, 132.8 [Met+H-NH
3
]
+
dan 103.9 yang merupakan ion immonium dari Met Lampiran 11 dan 12.
Pada ulangan 1, keberadaan Glu hanya terdeteksi pada 2 peptida yaitu peptida dengan BM 444.1 17.1 menit dan 472.1 47.0 menit. Selain Glu, pada
kedua peptida ini juga terdeteksi adanya Asp, sehingga peptida ini diduga mempunyai rasa gurih. Sedangkan pada ulangan 2, terdapat 1 peptida yang
mengandung Glu yaitu peptida dengan berat molekul 375.1 17.2 menit. Pada peptida ini, tidak terdeteksi adanya Asp akan tetapi terdeteksi adanya Gly yang
diketahui berperan penting bersamaan dengan Lys terhadap pembentukan rasa gurih oktapeptida BMP dari kaldu daging sapi Yamasaki dan Maekawa 1980 di
dalam Nishimura dan Kato 1988. Asam amino Lys sulit dibedakan dengan Gln karena merupakan isomernya. Akan tetapi, penelitian dari Petritis et al. 2002
menunjukkan dipeptida yang mengandung Lys dapat dibedakan dengan dipeptida yang mengandung Gln yaitu adanya ion dengan mz 129 yang dihasilkan
dipeptida yang mengandung Lys tetapi tidak oleh peptida yang mengandung Gln. Adapun peptida yang ada pada fraksi ini menghasilkan ion dengan m.z 129
Lampiran 11 dan 12 sehingga diduga asam amino yang ada pada peptida ini adalah Lys. Berdasarkan hal tersebut, diduga peptida ini berpotensi mempunyai
rasa gurih.
c. Fraksi B
Fraksi B mengandung senyawa-senyawa dengan tingkat kepolaran 10 asetonitril dalam air bebas ion. Pada fraksi ini terdapat 25 senyawa pada ulangan
1 dan 21 senyawa pada ulangan 2 Gambar 10 dan 11. Peak-peak yang ada pada kromatogram Fraksi B masih menunjukkan banyaknya senyawa-senyawa yang
belum terisahkan secara optimal. Hal ini menunjukkan bahwa pada Fraksi B banyak terdapat senyawa-senyawa yang polar.
Keberadaan asam amino Glu pada peptida-peptida yang ada pada fraksi ini hanya dapat dideteksi pada 1 peptida dengan BM 465.2 29.6 menit pada ulangan
1. Sedangkan peptida-peptida lainnya banyak yang mengandung asam amino LeuIle, Val, Asp, Gly dan sebagainya seperti yang tertera pada Tabel 7. Terdapat
Gambar 10 Kromatogram Fraksi B hasil fraksinasi Fraksi 1 ulangan 1 ikan asin jambal roti goreng 16.5 mgml menggunakan kolom C8, elusi
gradien 2 ACN yang mengandung 0.1 asam format hingga 50 ACN yang mengandung 0.1 asam format selama 50 menit, flow
rate 0.1 mlmenit.
Gambar 11 Kromatogram Fraksi B hasil fraksinasi Fraksi 1 ulangan 2 ikan asin jambal roti goreng 8 mgml menggunakan kolom C8, elusi gradien
2 ACN yang mengandung 0.1 asam format hingga 50 ACN yang mengandung 0.1 asam format selama 50 menit, flow rate 0.1
mlmenit.
Tabel 7 Berat molekul senyawa dan dugaan kandungan asam amino yang ada pada Fraksi B Fraksi 1 ekstrak ikan asin jambal roti ulangan 1 dan 2
Ulangan 1 Ulangan 2
No. peak
Massa MS1
Waktu Retensi
menit Dugaan
kandungan asam amino
No. peak
Massa MS1
Waktu Retensi
menit Dugaan
kandungan asam amino
1. 356.1
11.7 LysGln
3. 356.1
11.6 LysGln
3. 374.1
13.4 Val
4. 231.9
13.3 Phe
5. 228.0
14.3 -
5. 374.1
13.7 Val
6. 294.5
15.1 -
6. 229.0
14.6 -
7. 215.9
19.4 LeuIle
7. 247.0
16.0 Met
8. 343.0
20.2 LeuIle
8. 354.1
17.2 -
9. 285.0
21.4 LeuIle, Gly,
Pro 9.
271.0 19.0
- 10.
259.9 20.2
LeuIle, LysGln
10. 356.1
22.2 LeuIle, Gly,
LysGln 11.
315.1 21.8
LeuIle 11.
363.1 24.1
LeuIle 12.
356.1 22.5
LeuIle, Ala, Pro
12. 410.1
25.5 LeuIle, Asp,
Pro 13.
309.0 24.8
LeuIle, Pro 13.
415.1 26.5
Val, GlnLys 14.
213.9 25.1
LeuIle, Pro 14.
381.0 27.4
Val 15.
381.0 29.1
Val 15.
465.2 29.6
Glu 16.
228.0 30.3
Val 16.
301.1 31.2
LeuIle, Pro 17.
228.0 31.1
LeuIle 17.
385.1 32.4
LeuIle 18.
488.2 33.0
2 LeuIle, AspPro
18. 473.2
34.2 LeuIle, Gly
19. 398.1
33.5 2 Asp, Pro, Ala 19.
484.5 36.8
Cys, Pro 20.
310.1 40.9
LeuIle, 20.
456.2 37.5
LeuIle, Pro 21.
301.1 44.3
His, LysGln 21.
393.1 38.5
LeuIle, Pro 22.
413.1 46.7
LeuIle, 22.
229.0 41.2
LeuIle 23.
402.0 50.7
LeuIle 23.
370.1 44.2
LeuIle, Pro 24.
439.1 46.4 Phe, Pro, Asp
25. 439.1
47.5 Phe, Val, Pro
26. 402.0
50.6 LeuIle
tiga jenis peptida yang terkandung baik pada ulangan 1 maupun ulangan 2. Peptida-peptida tersebut adalah peptida berberat molekul 356.1 11.7 menit pada
ulangan 1 dan 11.6 menit pada ulangan 2 yang mengandung LysGln, 374.1 13.4 menit pada ulangan 1 dan 13.7 menit pada ulangan 2 yang mengandung Val dan
402.0 50.6 menit pada ulangan 1 dan 50.7 pada ulangan 2 yang mengandung LeuIle. Fragmentasi ion-ionnya dapat dilihat pada Lampiran 13 dan 14.
Pada Fraksi B ulangan 2, identifikasi senyawa dimulai pada peak ketiga dengan waktu retensi 11.6 menit Tabel 7. Hal ini disebabkan peak 1 dan 2
merupakan peak-peak yang ada hampir pada semua fraksi sehingga diduga peak- peak tersebut merupakan pengotor. Peak-peak ini juga mempunyai profil MS
yang sama dengan peak-peak yang keluar pada waktu retensi diatas 50 menit.
d. Fraksi C
