4.2. Pembuatan Media NA
Disediakan difco nutrient agar sebanyak 23 gr, letakkan di dalam beaker glass kemudian dicampur dengan aquades sebanyak 1000 ml, diaduk hingga
homogen. Panaskan campuran ini hingga mendidih. Setelah itu tuang kedalam Erlenmeyer 200 gr, Tutup erlenmeyer dengan kapas steril dan aluminium foil lalu
balut dengan cling wrap atau isolasi. Selanjutnya masukkan kedalam autoclave untuk disterilkan selama 30 menit dengan suhu 120-121
C pada tekanan 1,5 atm.
4.3. Pembuatan Media King’s B
Disediakan bahan-bahan berikut : bactopeptone 20 gr, K
2
PO
4
2,5 gr, glycerol 15 ml, MgSO
4
.7H
2
O 6 gr, agarbacto agar 15 gr. Keseluruhan bahan tersebut campurkan dalam beaker glass kemudian ditambahkan aquadest sebanyak
1000 ml, aduk hingga homogen kemudian panaskan dengan oven hingga mendidih. Setelah itu tuang kedalam Erlenmeyer ukuran 200 gr, Tutup erlenmeyer
dengan kapas steril dan aluminium foil lalu balut dengan cling wrap atau isolasi. Selanjutnya masukkan kedalam autoclave untuk disterilkan selama 30 menit
dengan suhu 120-121 C pada tekanan 1,5 atm.
4.4. Isolasi Bakteri Endofit
Isolat bakteri endofit diperoleh dengan cara mengisolasi langsung dari tanaman kedelai yang paling sehat dari suatu pertanaman kedelai, karena diduga
pada tanaman kedelai yang sehat terdapat bakteri yang bersifat antagonis terhadap jamur patogen, itulah yang menyebabkan tanaman kedelai tersebut bebas dari
Universitas Sumatera Utara
penyakit yang disebabkan oleh jamur patogen. Kedelai yang akan dijadikan sampel diambil dari beberapa lokasi di Kabupaten Deli Serdang.
Untuk mengisolasi bakteri endofit, pertama-tama dipotong seluruh daun kedelai sehingga yang tertinggal hanya batang, akar, dan nodul, lalu cuci dengan
air hingga bersih. Setelah bersih, di potong masing-masing bagian tersebut dan tempatkan pada beaker glass steril. Rendam bagian-bagian tersebut dengan
Na
3
OCl 5,25 selama 5 menit, kemudian bilas dengan aquades steril, lakukan pembilasan ini sebanyak 3 kali. Setelah itu gerus masing-masing bagian akar,
batang, nodul dengan menggunakan mortal steril dan tambahkan aquades steril secukupnya.
Hasil gerusan tersebutlah yang akan ditanam kedalam media NA dengan perlakuan : langsung tanam tanpa pengenceran, pengenceran 10
-1
dan pengenceran 10
-2
. Selanjutnya inkubasi pada temperatur kamar selama 2-3 hari.
4.5. Isolasi Jamur Sclerotium rolfsii Sacc
Kategori