Rancangan Percobaan, Pengamatan dan Analisis Data
✞
Media MS dibuat dengan cara memasukkan larutan stok makro, mikro A, mikro B, CaCl, Fe, Vitamin MS, dan Mio Inositol. Kemudian ditambahkan sukrosa
gula sebanyak 20 grl, dan air kelapa sesuai dengan konsentrasi yang digunakan 0, 100, 200, dan 300 mll. Untuk media perlakuan yang menggunakan pepton,
diberian pepton sebanyak 2 gl, lalu ditera hingga satu liter. Setelah larutan selesai dibuat, langkah selanjutnya adalah mengukur pH menggunakan pH meter.
pH yang diinginkan adalah 5,8 jika kurang dari standar maka dilakukan penambahan KOH dan jika lebih dari standar maka dilakukan penambahan Hcl.
Pada saat akan dimasak ditambahkan agar-agar sebanyak 7 gl kemudian dimasak sampai mendidih. Setelah itu dimasukkan ke dalam botol kultur yang sudah
disterilisasi sebanyak 30 mlbotol, lalu ditutup menggunakan plastik dan diikat menggunakan karet gelang. Botol – botol yang sudah beriisi media kemudian di
autoclaf menggunakan autoclaf tommy selama 7 menit pada tekanan 1,2 kgcm dan suhu 121 C. Berikut ini Tabel 3 adalah komposisi yang terkandung dalam
media MS.
Tabel 3. Komposisi media MS Senyawa dalam Larutan Stok
Konsentrasi Media MS mgl
NH
4
NO
3
1.650 KNO
3
1.900 KH
2
PO
4
170 MgSO
4.
7H
2
O 370
CaCl
2.
2H
2
O 440
MnSO
4.
H
2
O 16,9
ZnSO. 7H
2
O 8,6
H
3
BO
3
6,2 KI
0,83 CuSO
4.
5H
2
O 0,025
CoCl
2.
6H
2
O 0,025
Na
2.
MoO
4. 7
H
2
O 0,25
FeSO
4.
7H
2
O 27,8
Na
2
EDTA 37,3
Tiamin-HCL 0,1
Piridoksin-HCL 0,5
Asam nikotinat 0,5
Glisin 2,0
Mio-inosital 100
Sukrosa 20.000
Agar-agar 7.000
Air Kelapa 150 mll
Sumber Yusnita, 2003.
3.4.4 Eksplan dan Penanaman
Eksplan yang digunakan adalah protocorm anggrek Dendrobium hibrida yang berasal dari perkecambahan antara anggrek berbunga merah besar dan anggrek
D2278. Setelah polong siap dipanen, polong disebar ke dalam beberapa media, kemudian setelah 3 bulan dilakukan subkultur dengan cara mengambil protocorm
yang terdapat pada media sebelumnya kemudian ditanam ke dalam media perlakuan di dalam laminar air flow cabinet LAFC. Dalam satu botol kultur
diisi 5 cluster yang setiap cluster jumlahnya beragam-ragam. Botol yang telah berisi eksplan ditutup dengan plastik, dikat dengan karet gelang, dan diberi label