1. Penyetingan alat yaitu dengan menyesuaikan panjang gelombangnya dan slit width.
2. Pengukuran absorbansi blanko, larutan standart, dan reagent 3. Jika hasil yang diperoleh memiliki koefisisen determinasi 99 maka
larutan standart itu dapat digunakan sebagai acuan untuk menghitung konsentrasi aktual
4. Pengukuran konsentrasi aktual yang diurutkan dari konsentrasi rendah ke konsentrasi yang tinggi.
3.3.8 Analisis Data
Hasil eksperimen yang didapat selama observasi dianalisis dengan cara sebagai berikut. Persentase penghambatan Inhibition atau perangsangan
Stimulation perkembangan jumlah sel jika dibandingkan dengan kontrol dihitung dengan rumus:
100 x
C T
C I
………...3
100 x
C C
T S
.................4 Keterangan:
I : Persentase penghambatan pertumbuhan
S : Persentase rangsangan pertumbuhan
C : Rata-rata jumlah sel dalam larutan kontrol
T : Rata-rata jumlah sel dalam kadmium atau timbal
Untuk menganalisis data yang diperoleh digunakan dua macam program yaitu TOXSTAT untuk menganalisis NOEC dan LOEC dan ICPIN Inhibition
Concentration Program untuk menghitung IC
50
. Dalam menghitung nilai IC
50
menggunakan metode interpolasi linier dengan persamaan matematis sebagai berikut:
100 1
1 1
j j
j j
j j
p
M M
C C
x M
p Mi
C IC
.............5
Dimana: C
j
: Konsentrasi dimana rata-rata respon yang diamatai lebih besar daripada Mi1-p100
C
j+1
: Konsentrasi dimana rata-rata respon yang diamatai lebih kecil daripada Mi1-p100
M
i
: Rata-rata respon kontrol M
j
: Rata-rata respon konsentrasi j M
j+1
: Rata-rata respon konsentrasi j+1 p : persentase penghambatan respon perlakuan terhadap respon kontrol
IC
p
: Konsentrasi dimana pertumbuhan terhambat sebesar p dibanding dengan rata-rata respon kontrol
Untuk menggunakan program TOXSTAT maka data harus diubah dalam bentuk log
10
, kemudian sebelum menganalisis NOEC dan LOEC data harus diuji normalitasnya dengan menggunakan uji Shapirowilks dan keseragaman dengan
menggunakan uji Bartlet’s. Jika uji tersebut telah dilakukan dan data menyebar normal serta seragam, kemudian dilakukan Analisis Ragam Rancangan Acak
Lengkap dengan persamaan matematis sebagai berikut:
ij ij
i Y
.................6 dimana:
Y
ij
: Jumlah sel C. gracillis akibat perlakuan logam berat kadmium atau timbal
μ : rataan umum
τ
i
: Pengaruh kadmium atau timbal ke-i ε
ij
: galat akibat pengaruh perlakuan kadmium atau timbal ke-i dan ulangan ke-j
Jika perlakuan memberikan pengaruh nyata terhadap respon maka dapat dilakukan uji t- dunet untuk perolehan nilai NOEC dan LOEC.
4. HASIL DAN PEMBAHASAN
