ekstraksi menggunakan air panas selama 5 jam. Total waktu yang dibutuhkan pada metode ini kurang lebih 9 jam. Senyawa fukoidan yang diekstraksi dengan
metode ini mempunyai bioaktivitas yang sama dengan metode umum Tiwari dan Troy, 2015.
3. Ekstraksi dengan enzim Enzim yang digunakan untuk ekstraksi senyawa fukoidan adalah 4-
α-D- glukosidase, karbohidrase, alginat liase, dan papain. Enzim akan memecah ikatan
1,4 dan 1,6- α pada polisakarida dinding sel tumbuhan dan dapat mengubah
polimer tidak larut air menjadi materi yang larut dalam air sehingga polisakarida sulfat akan berpindah ke media ekstraksi Tiwari dan Troy, 2015. Ekstraksi
menggunakan enzim menghasilkan senyawa fukoidan dengan bioaktivitas yang lebih tinggi jika dibandingkan dengan senyawa fukoidan yang diekstraksi dengan
menggunakan metode umum. Metode ekstraksi ini dilakukan pada kondisi yang lemah dan tanpa menggunakan senyawa kimia beracun sehingga dapat langsung
digunakan untuk produk makanan atau industri farmasi Kim, 2012. 4. Ekstraksi autohidrolisis
Autohidrolisis adalah teknik ekstraksi baru yang tidak menggunakan asam atau pelarut sehingga ramah lingkungan. Selama autohidrolisis, materi
terhidrolisis karena adanya ion hidronium pada temperatur yang tinggi. Kondisi ekstraksi pada 180ºC selama 20 menit menghasilkan rendemen fukoidan yang
tinggi ˃ 16 Tiwari dan Troy, 2015.
2.3.2 Pemurnian senyawa fukoidan
Krud fukoidan dimurnikan menjadi beberapa fraksi. Senyawa fukoidan yang dimurnikan ini mempunyai berat molekul, sifat kimia dan bioaktivitas yang
berbeda. Berat molekul fukoidan berkisar antara 21 kDa sampai 1600 kDa.
Universitas Sumatera Utara
Ekstraksi menggunakan enzim menghasilkan senyawa fukoidan dengan berat molekul yang tinggi. Ekstraksi menggunakan asam menghasilkan fukoidan
dengan berat molekul yang rendah karena asam dapat menginduksi depolimerisasi. Fraksi ini dapat dipisahkan berdasarkan muatan atau ukuran.
Metode pemurnian yang umum adalah kromatografi penukar ion dan kromatografi permeasi gel Tiwari dan Troy, 2015.
1. Kromatografi penukar ion Senyawa fukoidan mempunyai muatan negatif karena gugus ester sulfat
pada struktur polisakarida sehingga kromatografi penukar ion adalah alat yang sering digunakan untuk isolasi dan fraksinasi senyawa fukoidan. Senyawa
fukoidan bermuatan negatif akan dipisahkan berdasarkan interaksinya denga fase diam yang bermuatan positif. Resin yang umum digunakan untuk fraksinasi
senyawa fukoidan adalah DEAE-Selulosa dan Q-Sephadex. Fukoidan dielusi dengan NaCl dengan konsentrasi bertingkat. Metode ini dapat digunakan untuk
menghasilkan fraksi fukoidan yang mempunyai struktur dan sifat kimia yang berbeda Tiwari dan Troy, 2015.
2. Kromatografi permeasi gel Prinsip kromatografi permeasi gel adalah pemisahan molekul berdasarkan
ukurannya. Ketika molekul sampel berjalan melewati partikel berpori, mereka akan terpisah berdasarkan perbedaan eksklusi pori pada fase diam. Tahap
pemurnian fukoidan dengan menggunakan kromatografi penukar ion selalu diikuti dengan kromatografi permeasi gel sehingga garam yag digunakan pada
kromatografi penukar ion akan hilang. Resin kromatografi yang sering digunakan
Universitas Sumatera Utara
untuk pemurnian fukoidan adalah Sephadex G-100. Kromatografi penukar ion dan permeasi gel mempunyai pengaruh yang kecil terhadap gugus ester sulfat pada
polisakarida sehingga tidak berpengaruh terhadap bioaktivitasnya Tiwari dan Troy, 2015.
2.4 Artemia salina Leach
