Pembuatan Media Agar Miring dan Stok Kultur Bakteri Pembuatan Media Mueller Hinton agar MHA Penyiapan Inokulum Bakteri Pembuatan Variasi Konsentrasi Minyak Atsiri Bunga Tembelekan Lantana camara L

Waktu Kesetimbangan : 1.0 min GCMS-QP2010 Suhu sumber Ion : 250 °C Suhu Interface : 305 °C Waktu Pemecah Pelarut : 2.80 min Detektor Gain Mode : Relative Detektor Gain : 0,00 kV MS Waktu Mulai : 3.00 min Waktu Berhenti : 80 min ACQ Mode : Scan Event Time : 0.50 sec Kecepatan Scan : 1250 Mulai mz : 28 Berhenti mz : 600 3.3.4 Pengujian Sifat Antibakteri Minyak Atsiri Bunga Tembelekan 3.3.4.1 Pembuatan Media Nutrient Agar NA Sebanyak 7 gram nutrient agar dimasukkan dalam Erlenmeyer lalu dilarutkan dengan 250 mL dan dipanaskan hingga semua larut. Kemudian disterilkan disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121 °C selama 15 menit.

3.3.4.2 Pembuatan Media Agar Miring dan Stok Kultur Bakteri

Kedalam tabung reaksi yang steril dimasukkan 3 mL media nutrient agar steril, didiamkan pada temperatur kamar sampai memadat pada posisi miring membentuk sudut 30-45 °. Biakan bakteri Basilus subtilis dari strain utama diambil dengan jarum ose steril lalu diinokulasikan pada permukaan media nutrient agar miring dengan cara menggores, kemudian diinkubasi pada suhu 35 ± 2 °C selama 18-24 jam. Hal yang sama juga dilakukan pada biakan bakteri Propionibacterium acnes, Escherchia coli dan Pseudomonas aeruginosa. Universitas Sumatera Utara

3.3.4.3 Pembuatan Media Mueller Hinton agar MHA

Dimasukan 9.5 g serbuk Mueller Hinton Agar diamsukkan dalam Erlenmeyer lalu dilarutkan dalam 250 mL aquades dan dipanaskan hingga semua larut dan mendidih. Kemudian disterilkan di autoklaf pada suhu 121 °C selama 15 menit.

3.3.4.4 Penyiapan Inokulum Bakteri

Sebanyak 3.25 g nutrient broth dilarutkan dengan 250 mL aquades dalam Erlenmeyer dan dipanaskan hingga semua larut, kemudian disterilkan di autoklaf 121 °C selama 15 menit dan didinginkan. Lalu koloni bakteri Basillus subtilis diambil dari stok kultur menggunakan jarum ose steril kemudian disuspensikan ke dalam 10 mL media nutrient broth steril dalam tabung reaksi dan diinkubasikan pada suhu 35±2 °C selama ± 3 jam, lalu dibandingkan kekeruhannya dengan kekeruhan standar Mcfarland. Hal yang sama juga dilakukan untuk koloni bakteri Propionibacterium acnes, Escherchia coli dan Pseudomonas aeruginosa.

3.3.4.5 Pembuatan Variasi Konsentrasi Minyak Atsiri Bunga Tembelekan Lantana camara L

Minyak atsiri bunga tembelekan dibuat dalam konsentrasi 10 dan 20 vv, dengan memipet 0.5 mL dan 1 mL minyak atsiri dengan menggunakan mat pipet dan dimasukkan kedalam labu ukur 5 mL, kemudian ditambahkan Dimetil Sulfoksida DMSO pada masing-masing minyak atsiri hingga garis batas dan dihomogenkan.

3.3.4.6 Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Bunga Tembelekan