Kimia Farma, kapsul Generik Kloramfenikol PT. Indofarma, kapsul Generik Kloramfenikol PT. Universal, kapsul Kalmicetin PT. Kalbe Farma, kapsul
Colsancetine PT. Sanbe Farma dan serbuk KBr Kyoto Japan. 3.4 Pengambilan sampel
Sampel diambil secara purposif yaitu tanpa membandingkan antara satu tempat dengan tempat yang lain, karena tempat pengambilan sampel dianggap
homogen. Sampel yang digunakan adalah Kloramfenikol dalam sediaan kapsul
dengan nama dagang dan generik. 3.5 Prosedur penelitian
3.5.1 Uji Identifikasi Baku Kloramfenikol
Uji identifikasi baku Kloramfenikol ini dilakukan secara spektrofotometer FTIR, yaitu dengan cara, dicampur 1 mg serbuk Kloramfenikol dengan 100 mg
serbuk KBr dalam lumpang, digerus hingga halus dan homogen, campuran tersebut diletakkan pada sampel pan kemudian dipasangkan pada DRS 8000 dan
dianalisa pada bilangan gelombang 4000-500 cm
-1
.
3.5.2 Pembuatan fase gerak buffer Gifford pH 6
Metanol 500 ml dimasukkan kedalam botol kaca dan disaring dengan menggunakan membran filter PTFE 0,5 µm.
Larutan buffer Gifford pH 6 dengan komposisi terdiri dari asam borat 12,4 gram, kalium klorida 7,4 gram dalam 1000 ml air, larutan basa yaitu natrium
karbonat anhidrat 21,2 gram dalam 1000 ml air, kemudian larutan asam dan basa dicampur dengan perbandingan 30 : 0,05 vv dan dilihat pH 6, kemudian
ditambahkan asam asetat glasial 1,8 ml dicukupkan dengan larutan buffer Gifford pH 6. Dimasukkan kedalam botol kaca dan disaring dengan menggunakan
Universitas Sumatera Utara
celllulosa nitrat membran filter 0,45 µm. Masing-masing diawaudarakan selama 20 menit Debi Meilani, 2000.
3.5.3 Pembuatan pelarut
Dicampurkan larutan buffer Gifford pH 6 - Metanol - Asam asetat glasial
dengan perbandingan 55 : 45 : 0,1 lalu disaring menggunakan membran filter
PTFE 0,5 µm, kemudian diawaudarakan selama 20 menit
3.5.4 Pembuatan Larutan induk baku BPFI
Sejumlah lebih kurang 25 mg Baku Pembanding Kloramfenikol BPFI ditimbang seksama, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml, ditambahkan
sedikit metanol kocok hingga larut, lalu dicukupkan sampai garis tanda dengan pelarut dan dikocok hingga homogen, sehingga diperoleh larutan dengan
konsentrasi 250 mcgml digunakan sebagai LIB FI edisi IV, 1995.
3.5.5 Penyiapan alat KCKT
Masing-masing unit diatur, kolom yang digunakan Shimpac VP-ODS 4,6 mm x 25 cm, detektor UVVis pada panjang gelombang 280 nm, pompa dipilih
mode aliran tetap dengan laju 1,5 mlmenit, sensifitas 1.000 AUFS dengan sistem elusi isokratik.
Setelah alat KCKT dihidupkan, maka pompa dijalankan dan fase gerak dibiarkan mengalir selama 30 menit sampai diperoleh garis alas yang datar,
menandakan sistem tersebut telah stabil.
3.6 Penentuan Kualitatif dan Kuantitatif Kloramfenikol
