Tabel 4.3 Data Pemurnian Ekstrak Kasar Hingga Dialisis
Tahapan V
sampel ml
Tirosin µgml
Proteinml ekstrak
µgml
Protein total
µg Aktivitas
µmolmenit Aktivitas
total Aktivitas
spesifik µmolµg.menit
Yield Purificatio
n Factor
Awal 120
228.5 186.1
22338.8 0.378
45.4 2,032 x 10-3
10 10
169.2 140.7
1407.9 0.280
2.802 1,990 x 10-3
6.173 0.979
20 1.5
173 108.9
163.4 0.286
0.429 2,629 x 10-3
0.946 1.293
30 4
200.2 107.7
431.04 0.331
1.325 3,076 x 10-3
2.920 1.513
40 4
138.4 103.3
413.5 0.229
0.917 2,218 x 10-3
2.020 1.091
50 4
136.6 113.3
453.3 0.226
0.905 1,996 x 10-3
1.993 0.982
60 4
144.2 89.8
359.4 0.238
0.955 2,657 x 10-3
2.103 1.307
70 10
312.8 137.6
1376.06 0.518
5.180 3,764 x 10-3
11.408 1.852
80 5
237.8 121.2
606.4 0.393
1.969 3,246 x 10-3
4.336 1.597
Dialisis 6
292.7 124.07
744.4 0.484
2.907 3,906 x 10-3
6.777 1.759
Keterangan: Data yang ditampilkan merupakan data rata-rata dari ketiga replikasi. Data lengkap disajikan pada Lampiran 5 Tabel 5.
4.1.4 Pemurnian Dengan Ion Exchange Chromatography IEC
Sampel yang dimurnikan pada tahap IEC adalah sampel hasil dialisis presipitasi ammonium sulfat 70. Berikut adalah data IEC replikasi 1-3 .
Tabel 4.4 Hasil Rata-Rata IEC
Fraksi ke -
V Fraksi
ml Tirosinml
µgml Protein
per ml ekstrak
µgml Aktivitas
µmolmenit Protein
total µg
Aktivitas spesifik
µmolµg.menit Yield
Purificatio n
Factor
1 -
- -
1 1
- -
- 2
1 -
- -
3 1
- -
- 4
1 -
- -
5 1
- -
- 6
1 -
- -
7 1
- -
- 8
1 -
- -
9 1
27.458 83.086
0.045 83.086
0.54 x 10
-3
0.1286 0.270
10 1
695.908 100
1.152 100
1.160 x 10
-2
2.537 5.708
11 1
111.906 84.678
0.185 84.678
2.131 x 10
-3
0.1906 1.048
Lanjutan Tabel 4.4
Fraksi ke -
V Fraksi
ml Tirosinml
µgml Protein
per ml ekstrak
µgml Aktivitas
µmolmenit Protein
total µg
Aktivitas spesifik
µmolµg.menit Yield
Purificatio n
Factor
12 1
47.810 65.577
0.079 65.577
1.371574 x 10
-3
0.1435427 0.674
13 1
36.113 57.248
0.0532 57.248
4.01373 x 10
-4
0.1240339 0.197
14 1
- -
- 15
1 -
- -
16 1
- -
- 17
1 -
- -
18 1
- -
- 19
1 -
- -
20 1
- -
- 21
1 -
- -
22 1
- -
- 23
1 94
94 -
- -
… …
… ..
… …
- -
- 40
1 -
- -
Keterangan : “ – “ berarti tidak dapat dihitung karena 0 0 . Yield dan purification factor dihitung terhadap ekstrak kasar enzim. Data yang ditampilkan merupakan data
rata-rata dari ketiga replikasi. Data lengkap disajikan pada Lampiran 5 Tabel 7-9. Fraksi ke-10 dipilih sebagai fraksi yang digunakan untuk SDS PAGE karena memiliki
nilai yield dan purification factor terbaik.
Peningkatan hasil pemurnian pada setiap tahap, disajikan pada Tabel 4.5. Tabel 4.5 Perbandingan Tahap Pemurnian
Tahapan V
sampel ml
Tirosin µgml
Proteinml ekstrak
µgml Protein
total µg Aktivitas
µmolme nit
Aktivita s total
Aktivitas spesifik
µmolµg .menit
Yield Purifica
tion Factor
Awal 120
228.533 186.156
22338.830 0.378
45.404 2,032 x
10-
3
100 1
Presipitasi 70
10 312.876
137.606 1376.066
0.518 5.180
3,764 x 10
-3
11.408 1.852
Dialisis 6
292.735 124.076
744.457 0.484
2.907 3,606 x
10
-3
6.777 1.759
IEC rata- rata
1 695.908
100 100
1.152 1.152
1,1603 x 10
-3
2.537 5.708
Keterangan: Yield dan purification factor dihitung terhadap ekstrak kasar enzim.
4.1.5 Penentuan Berat Molekul Protein Enzim dengan SDS PAGE
