20
3.4.2 Pembuatan larutan asetilkolin
Dalam penelitian ini, agonis kolinergik yaitu asetilkolin klorida digunakan sebagai penginduksi. Senyawa ini dapat menyebabkan kontraksi otot polos pada
ileum. Dibuat larutan induk dengan cara melarutkan asetilkolin kedalam akuades sehingga didapat konsentrasi 2x10
-1
M. Kemudian dibuat larutan yang lebih encer sampai kadar 2x10
-6
M dengan faktor pengenceran 5 kali. a.
Pembuatan larutan baku asetilkolin klorida Timbangan seksama asetilkolin klorida BM 181,60 gmol seberat 181,60 mg
kemudian dilarutkan dalam 5,0 ml akuades. Diperoleh larutan asetilkolin klorida 2x10
-1
M. b.
Pembuatan seri konsentrasi asetilkolin klorida i.
Asetilkolin klorida 2x10
-2
M Dipipet 500 µl larutan baku asetilkolin 2x10
-1
M. Masukkan ke dalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µl akuades. Vortex selama 3 menit.
ii. Asetilkolin klorida 2x10
-3
M Dipipet 500 µl larutan baku asetilkolin 2x10
-2
M. Masukkan ke dalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µl akuades. Vortex selama 3 menit.
iii. Asetilkolin klorida 2x10
-4
M Dipipet 500 µl larutan baku asetilkolin 2x10
-3
M. Masukkan ke dalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µl akuades. Vortex selama 3 menit.
iv. Asetilkolin klorida 2x10
-5
M Dipipet 500 µl larutan baku asetilkolin 2x10
-4
M. Masukkan ke dalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µl akuades. Vortex selama 3 menit.
21
v. Asetilkolin klorida 2 x 10
-6
M Dipipet 500 µl larutan baku asetilkolin 2x10
-5
M. Masukkan ke dalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µl akuades. Vortex selama 3 menit.
3.4.3 Pembuatan larutan ekstrak etanol daun belimbing wuluh
Sejumlah 800 mg ekstrak etanol daun belimbing wuluh EEDBW dilarutkan dengan 1 ml DMSO Dimethil sulfoxida, kemudian dicukupkan
dengan larutan tirode hingga 5 ml. Diperoleh konsentrasi ekstrak 160 mgml larutan stock. DMSO merupakan pelarut yang inert, non-toksik, dan dapat
melarutkan hampir seluruh senyawa dan merupakan pelarut yang semipolar, namun masih dapat bercampur dengan media tirode Velasco, et al., 2003;
Bertoluzza, et al,. 1979; Brown, et al., 1963. Batas penggunaan pelarut DMSO yang ditambahkan kedalam organ bath 40ml adalah sebesar 400 µl atau 1 vv
Husori, 2011.
3.4.4 Pembuatan larutan atropin sulfat
Kategori