Pengambilan sampel dilakukan dengan metode acak dan berat masing–masing sampel yang diambil 25 mg.
3.5 Pembuatan Pereaksi
3.5.1 Pembuatan Pelarut Metanol : Asam Asetat Glasial 1000:1
Diambil 1 ml asam asetat glasial dimasukkan kedalam beaker glass. Ditambahkan metanol sebanyak 1000 ml, kemudian di aduk menggunakan
pengaduk sampai homogen.
3.5.2 Pembuatan Fase Gerak Asetonotril : Aquabidest 6:4
Diambil 600 ml asetonitril dimasukkan kedalam beaker glass. Ditambahkan dengan aquabidest sebanyak 400 ml, kemudian di aduk menggunakan pengaduk
sampai homogen.
3.6 Pembuatan Larutan 3.6.1 Larutan Standar
Ditimbang seksama 25 mg Hidrokortison Asetat BPFI, masukkan kedalam labu tentukur 50 ml. Ditambahkan pelarut metanol : asam asetat glasial 1000:1
sampai 50 ml garis tanda batas, lalu dilarutkan dengan menggunakan alat Ultrasonic digital selama 15 menit. Dipipet 5 ml menggunakan pipet volume,
ditambahkan 10 ml pelarut pelarut metanol : asam asetat glasial 1000:1, masukkan kedalam labu tentukur 25 ml. Disaring, dimasukkan ke dalam vial.
Larutan siap dianalisa di alat HPLC High Performance Liquid Chromatography.
3.6.2 Larutan Sampel
Ditimbang seksama 25 mg Hidrokortison Asetat sampel sebanyak 2 kali, masukkan kedalam labu tentukur 50 ml. Ditambahkan pelarut metanol : asam
asetat glasial 1000:1 sampai 50 ml garis tanda batas, lalu dilarutkan dengan menggunakan alat Ultrasonic digital selama 15 menit. Dipipet 5 ml menggunakan
pipet volume, ditambahkan 10 ml pelarut pelarut metanol : asam asetat glasial 1000:1, masukkan kedalam labu tentukur 25 ml. Disaring, dimasukkan kedalam
vial. Larutan siap dianalisa di alat HPLC High Performance Liquid Chromatography.
3.7 Penetapan Kadar 3.7.1 Larutan Standar
Tahapan kerja penetapan kadar yang dilakukan adalah sebagai berikut: 1.
Hidupkan seperangkat alat HPLC High Performance Liquid Chromatography waters detector 2489, pump 1525.
2. Klik program HPLC High Performance Liquid Chromatography yang
terdapat dikomputer dan diatur: Fase Gerak
: asetonitril : aquabidest 60:40 Fase Diam
: Bondapack C
18
3,9 × 300 mm Panjang Gelombang : 254 nm
Volume Injeksi : 10 µl
Waktu Alir : 1,0 mlmenit
3. Diinjeksikan larutan standar hidrokortison asetat BPFI menggunakan
spuit 1 ml sebanyak 1 ml, dilakukan sebanyak 6 kali pengulangan.
Kategori