Pewarnaan Sediaan Metode Ziehl-Nielsen Pembacaan Sediaan Slide BTA

2.5. Pemeriksaan Bakteriologis

Pemeriksaan bakteriologis untuk menemukan kuman tuberkulosis mempunyai arti yang sangat penting dalam menegakkan diagnosis. Bahan untuk pemeriksaan bakteriologik ini dapat berasal dari dahak, cairan pleura, liquor cerebrospinal, bilasan bronkus, bilasan lambung, kurasan bronkhoalveolar bronchoalveolar lavageBAL, urin, faeces, dan jaringan biopsi termasuk biopsi jarum halusBJH. 14

2.5.1 Pewarnaan Sediaan Metode Ziehl-Nielsen

Bahan yang diperlukan : botol gelas berwarna coklat berisi cairan Carbol Fuchsin 0,3; botol gelas berwarna coklat berisi alkohol HCl-alcohol 3; botol coklat berisi Methylen Blue 0,3; rak untuk pengecatan slide; baskom ditempatkan dibawah rak; corong dengan kertas filter; pipet; pinset; pengukur waktu; api spiritus; air yang mengalir berupa air ledeng atau botol pipet berisi cairan; dan beberapa rak cadangan. 37 Pewarnaan sediaan yang telah difiksasi, maksimum 12 slide, harus ada jarak diantara sediaan untuk mencegah kontaminasi. Cara pewarnaan : sediaan dahak yang telah difiksasi diletakkan pada rak dengan hapusan menghadap ke atas, kemudian diteteskan larutan carbol fuchsin 0,3 pada hapusa dahak sampai menutupi seluruh permukaan sediaan dahak. Panaskan dengan nyala api spiritus sampai keluar uap selama 3-5 menit. Zat warna tidak boleh mendidih atau kering. Apabila mendidih atau kering maka carbol fuchsin akan terbentuk kristal partikel kecil yang dapat terlihat seperti kuman TB. Api spiritus disongkirkan, kemudian sediaan didiamkan selama 5 menit. Lalu sediaan dibilas dengan air mengalir pelan sampai zat warna yang bebas terbuang. Sediaan diteteskan dengan asam alkohol HCl-alcohol sampai warna merah Universitas Sumatera Utara fuchsinhilang. Kemudian dibilas dengan air mengalir pelan. Larutan Methylen blue 0,3 diteteskan pada sediaan sampai menutupi seluruh permukaan. Sediaan didiamkan 10-20 detik. Sediaan dibilas dengan air mengalir pelan. Sediaan dikeringkan diatas rak pengering di udara terbuka jangan dibawah sinar matahari langsung. 38,39

2.5.2. Pembacaan Sediaan Slide BTA

Hasil pemeriksaan mikroskopis dibacakan dengan skala IUATLD International Union Against Tuberculosis and Lung Disease, yaitu : 4,14 1. Tidak ditemukan BTA dalam 100 lapangan pandang : negatif 2. Ditemukan 1-9 BTA dalam 100 lapangan pandang : ditulis jumlah kuman yang ditemukan, scanty. 3. Ditemukan 10-99 BTA dalam 100 lapangan pandang : + 1+. 4. Ditemukan 1-10 BTA dalam 1 lapangan pandang : ++ 2+. 5. Ditemukan 10 BTA dalam 1 lapangan pandang : +++3+.

2.5.3. Kultur M.Tuberculosis