Alat Dan Bahan .1 Alat–alat

24

BAB III METODE PENELITIAN

Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode ekperimental, yaitu untuk meneliti pengaruh konsentrasi VCO hasil hidrolisis 70 dalam bentuk sediaan gel, terhadap efek penyembuhan luka bakar yang diamati dari perubahan diameter rata-rata luka bakar setiap hari. 3.1 Alat Dan Bahan 3.1.1 Alat–alat Alat–alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah neraca analitis Boeco, pH meter HANNA instrument, penangas air, timbangan hewan, hotplate, pendingin tegak, buret, statif, pemanas air, klem, bola karet, oven, termometer, lempeng logam berdiameter 2 cm, lumpang dan stemper, cawan penguap, jangka sorong, kertas perkamen, gunting, pisau cukur,spatula, sudip, dan alat–alat gelas sesuai kebutuhan. 3.1.2Bahan Sampel yang digunakan adalah VCO yang diproduksi oleh Noery Vico Lhokseumawe-NAD. Bahan–bahan yang digunakan dalam penelitian ini jika tidak dinyatakan lain berkualitas pro-analis keluaran E.Merck yaitu natrium hidroksida, kalium hidroksida, metanol, asam klorida, n-heksan, natrium sulfat, metil red, fenolftalein, alkohol, carbomer 941, gliserin, TEA, nipagin dan akuades. 3.1.3Hewan Percobaan 25 Hewan yang akan digunakan adalah kelinci jantan yang sehatOryctolagus cuniculusdengan berat badan 1,5-2 kg umur ± 1,5 tahun, ditempatkan dalam kandang selama 7 hari sebelum penelitian yang bertujuan agar hewan uji terbiasa dengan lingkungan dan perlakuan yang baru. 3.2Prosedur Kerja

3.2.1 Penyiapan Larutan Pereaksi

Pereaksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah larutan asam klorida 0,5 N, larutan natrium hidroksida metanol 0,5 N, larutan kalium hidroksida 0,1 N, larutan merah metil, dan larutan fenolftalein. Larutan asam klorida 0,5 N dibuat dengan mengencerkan 41,4 ml asam klorida pekat dengan akuades hingga 1000 ml. Larutan natrium hidroksida metanol 0,5 N dibuat dengan melarutkan 20 g natrium hidroksida dalam metanol,kemudian dicukupkan sampai 1000 ml. Larutan kalium hidroksida 0,1 N dibuat dengan melarutkan 5,61 g pelet kalium hidroksida dalam akuades hingga 1000 ml. Larutan merah metil dibuat dengan cara melarutkan 100 mg merah metil dalam 100 ml etanol. Larutan fenolftalein dibuat dengan cara melarutkan 1 g fenolftalein dalam 100 ml etanol Ditjen POM, 1995.

3.2.2 Pembakuan Larutan Asam Klorida 0,5 N

Ditimbang seksama 0,25 g natrium karbonat Na 2 CO 3 yang sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 270 C selama 1 jam, dilarutkan dalam 100 ml akuades dan ditambahkan 2 tetes merah metil. Dititrasi hingga larutan berwarna merah muda pucat, kemudian dipanaskan larutan hingga mendidih, dinginkan dan dititrasi kembali bila perlu hingga warna merah muda pucat tidak hilang dengan pendidihan lebih lanjut Ditjen POM, 1995. 26

3.2.3 Pembakuan Larutan NaOH Metanol 0,5 N

Dipipet NaOH metanol 10 ml, dimasukkan ke dalam erlenmayer 250 ml. Kemudian ditambahkan 3 tetes fenolftalein dan titrasi dengan larutan asam klorida hingga terjadi warna merah muda hilang. 3.2.4 Pembakuan Larutan Kalium Hidroksida 0,1 N Ditimbang 0,30 g kalium biftalat yang telah dikeringkan pada suhu 120° C selama 2 jam dan dilarutkan dalam 75 ml air bebas karbondioksida. Tambahkan 2 tetes fenolftalein dan titrasi dengan larutan kalium hidroksida hingga terjadi warna merah muda mantap Ditjen POM, 1995.

3.2.5 Pembuatan Minyak Kelapa Murni Hasil Hidrolisis

Untuk penentuan bilangan penyabunan dilakukan prosedur sebagai berikut, yaitu sejumlah 5 gram minyak ditimbang dalam labu alas bulat 250 ml. Ditambahkan 50 ml NaOH metanol 0,5 N kemudian labu alas bulat dihubungkan dengan pendingin tegak, dididihkan lalu ditambahkan 1 ml larutan indikator fenolftalein kemudian dititrasi dengan HCl 0,5 N sampai warna merah jambu menghilang. Untuk hidrolisis parsial dari minyak dilakukan dengan memodifikasi prosedur bilangan penyabunan diatas, yaitu dengan mengurangi jumlah NaOH yang digunakan sesuai dengan tingkat hidrolisis. Sejumlah 100 gram minyak ditimbang kemudian ditambahkan NaOH metanol sesuai tingkat hidrolisis 70 kemudian labu alas bulat dihubungkan dengan pendingin tegak dan dipanaskan selama 3 jam. Setelah penyabunan selesai 27 maka campuran ditambahkan HCl encer. Selanjutnya diekstraksi dengan 50 ml n- heksana dan terbentuk dua lapisan atas fraksi n-heksan dipisahkan sebagai filtrat I. Lapisan bawah dikocok dengan 50 ml n-heksan, setelah didiamkan beberapa saat diambil lapisan atas filtrat II. Filtrat I dan II digabung kemudian ditambahkan Na 2 SO 4 anhidrat secukupnya dan dibiarkan selama semalam. Selanjutnya diuapkan di atas penangas air dalam cawan penguap untuk menghilangkan n-heksan. Diperoleh minyak kelapa murni hasil hidrolisis parsial Hasibuan, 2012.

3.2.6 Penentuan Bilangan Asam Minyak Kelapa Murni dan Hasil Hidrolisis

Penentuan asam lemak bebas dari VCO yang mengalami hidrolisis dilakukan dengan cara menimbang sebanyak 5 gram hasil hidrolisis di dalam erlenmeyer 250 ml ditambahkan 25 ml alkohol netral 95, kemudian dipanaskan di penangas air, diaduk dengan magnetic stirrer selama 10 menit. Larutan ini kemudian ditambahkan indikator larutan fenolftalein, dititrasi dengan KOH 0,1N sampai tepat terlihat warna merah jambu.Dihitung bilangan asam dari minyak Ketaren, 2005. Bilangan asam = �� ��� � � ��� � �� ��� ���� ������

3.2.7 Pembuatan sediaan Gel

Sediaan gel yang akan dibuat adalah sebanyak 100 g, denganmenggunakan formula standar Agoes, 2008 sebagai berikut: RCarbomer 941 0,5 Gliserin 10,0 TEA 0,5 Air 89,0 Nipagin q.s 28 Formula dasar gel yang digunakan dimodifikasi dengan penambahan VCO hasil hidrolisis dengan berbagai konsentrasi, formula gel yang digunakan dapat dilihat pada Tabel 2.1. Tabel 2.1 Formula gel dengan variasi konsentrasi minyak kelapa murni hasil hidrolisis Bahan Formula gel g A B C D Minyak kelapa murni hasil hidrolisis - 5 10 15 Carbomer 941 0,5 0,5 0,5 0,5 Gliserin 10 10 10 10 TEA 0,5 0,5 0,5 0,5 Nipagin q.s q.s q.s q.s Air suling 89 84 79 74 Keterangan: A= dasar gel tanpa minyak kelapa murni hasil hidrolisis B = gel dengan kadarMinyak Kelapa Murni Hasil Hidrolisis 5 C = gel dengan kadarMinyak Kelapa Murni Hasil Hidrolisis 10 D = gel dengan kadarMinyak Kelapa Murni Hasil Hidrolisis 15 Pembuatan: Air, gilserin, minyak kelapa murni hasil hidrolisis dan pengawet dicampur. Carbomer kemudian ditaburkan pada permukaan, dan digerus dengan kecepatan tinggi. Kemudian ditambahkan TEA sambil digerus perlahan-lahan hingga terbentuk larutan jernih kental berebntuk gel.

3.3 Evaluasi Sediaan