1. Rancangan Penelitian 2. Tempat dan Waktu 3. 1. Kerangka 3.1.1 Rankaian Primer 3. 1. 2. Peralatan :

BAB. III METODE PENELITIAN

III. 1. Rancangan Penelitian

Penelitian dilakukan secara deskriptif dengan menggunakan teknik Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction RT-PCR.

III. 2. Tempat dan Waktu

Penelitian dilakukan di SMF. Mikrobiologi klinik R. S. H. Adam Malik Medan, Dinas Kesehatan kota Medan dari September 2008 – Desember 2008. Sept 08 Okt 08 Nov 08 Des 08 Minggu Minggu Minggu Minggu 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 Pengumpulan Serum Ekstrasi PCR Visualisasi Analisa Data Tabel.1. Rencana Kegiatan Penelitian III.3. Bahan dan Cara Kerja Marliana Lubis : Frekuensi Virus Dengue Serotipe 4 Dari Serum Penderita DD BBD Di Rumah Sakit Kota Medan Menggunakan RT-PCR, 2009 USU Repository © 2008 Bahan yang dipakai adalah 100 sampel serum penderita demam Dengue akut dari 5 hari pertama. Diambil 0,5 ml serum penderita demam Dengue Akut di periksa dilaboratorium SMF mikrobiologi klinik R. S. H. Adam Malik Medan. Jumlah sampel minimal yang dibutuhkan : n ≥ 2 2 2 5 . e q x p x Z α − jika = 0,05 Z 0,5 - 2 = 1,96 nilai baku normal tabel Z ket e = nilai ketepatan yang diinginkan 10 p = proporsi penderita 0,32 diambil dari angka insiden rate Depkes tahun 2003 q = 1 – p = 1 – 0,32 = 0,68 n = 2 2 100 10 68 , 32 , 96 , 1 x x n = 85 orang Pengumpulan sampel ditentukan, 100 Hasil penelitian diperoleh 85 orang. Berarti telah memenuhi target sampel minimal. Marliana Lubis : Frekuensi Virus Dengue Serotipe 4 Dari Serum Penderita DD BBD Di Rumah Sakit Kota Medan Menggunakan RT-PCR, 2009 USU Repository © 2008

III. 3. 1. Kerangka

Kerangka Operasional Pasien Penderita akut DDDBD - Data who - Serum 0,5 cc - Ekstraksi - RT-PCR - Elektroforesis - Gel Imaging Virus Dengue Serotipe 4 Gambar 2. Kerangka Operasional Pasien

III. 3.1.1 Rankaian Primer

D1. 5’ to 3’ = TCA ATA TGC TGA AAC GCG CGA GAA ACC G. D4. 5’ to 3’ = TGT TGT CTT AAA CAA GAG AGG TC

III. 3. 1. 2. Peralatan :

1. TIP 25 µl kuning 2. TIP 200 µl biru Marliana Lubis : Frekuensi Virus Dengue Serotipe 4 Dari Serum Penderita DD BBD Di Rumah Sakit Kota Medan Menggunakan RT-PCR, 2009 USU Repository © 2008 3. Vertex 4. Oven – 50 C 5. Eppendof 1,5 ml 6. Freezer – 70 C 7. Inkubatur 8. Collection tube 9. Screw cap 10. Hood Api Bunsen 11. Microcentrifuge 12. PCR 13. Elektroforesa 14. Kamera Polaroid BIO RED 15. Illuminator UV 16. Biosafetycase klas II 17. Miropipet

III. 3. 2. Bahan :