2. 2. 3 Enzim Lipase dan Inhibitornya
Lipase Triasilgliserol asilhidolase, EC 3.2.1.20 adalah enzim yang dapat larut dalam air dan bekerja dengan mengkatalisis hidrolisis ikatan ester dalam
substrat lipid yang tidak larut dalam air seperti trigliserida berantai panjangWinarno. 1995. Lipase berfungsi mengkatalisis trigliserida menjadi
gliserol dan asam lemak seperti pada Gambar. 4 Kerja enzim lipase dapat dihambat oleh ekstrak: monarda punctata,
blueberry, lingonberry, cloudberry, strawberry dan raspberry, actinidia arguta, flavangenol McDougall et al. 2008; Jang et al. 2008; Shimada et al. 2009;
Yamada et al. 2010. McDougall et al 2008 menyatakan komponen bioaktif pada tanaman berri yang mampu menghambat kerja enzim lipase diduga tanin
beserta turunannya seperti ellagitannin, proantosianidin. Ikatan hidrogen antara grup karbon dari ikatan peptida protein dan grup hidroksil dari golongan fenol
yang termasuk dalam tanin, yang diketahui sebagai interaksi hidrofobik, merupakan mekanisme utama dalam interaksi kompleks tanin-protein Haslan.
1974
Gambar 4. Reaksi hidrolisis asam lemak Sumber : http:www. biologypedia.wordpress.com
2.3 Kinetika Inhibisi Enzim
Kinetika enzim adalah salah satu cabang enzimologi yang membahas faktor- faktor yang mempengaruhi kecepatan reaksi enzimatis. Faktor-faktor utama yang
mempengaruhi aktivitas enzim adalah konsentrasi enzim, substrat, produk, senyawa inhibitor dan aktivator, pH dan jenis pelarut yang terdapat pada
lingkungan, kekuatan ion dan suhu. Pembentukan komplek enzim substrat ES membatasi kecepatan reaksi enzimatis. Artinya kecepatan maksimum reaksi
enzim dicapai pada tingkat konsentrasi substrat yang sudah mampu mengubah seluruh enzim menjadi kompleks ES. Pada konsentrasi substrat dibawah
konsentrasi tersebut reaksi enzim bergantung pada konsentrasi substrat yang ditambahkan, sedangkan pada konsentrasi substrat diatas konsentrasi tersebut,
kecepatan reaksi tidak tergantung pada konsentrasi substrat. Dengan kata lain, reaksinya menjadi bersifat ordo ke nol. Pada Tabel 2, dapat dilihat beberapa faktor
yang mempengaruhi kecepatan reaksi dan informasi yang dapat diperoleh dengan mengubah-ubah faktor tersebut.
Tabel 2. Berbagai faktor yang mempengaruhi kecepatan reaksi enzim Faktor yang mempengaruhi
Keterangan yang dapat Diperoleh Jenis
Faktor Konsentrasi
Konsentrasi enzim,
Substrat, Produk
inhibitor, Aktivator Mekanisme reaksi, Parameter kinetika
Km, V, Ki
Faktor luar Suhu
pH
Konstanta dielektrik
dan kekuatan ion Parameter
termodinamika dan
perubahannya yang penting dalam pengikatan substrat
Jenis ikatan dan muatan protein enzim
Faktor dalam Struktur substrat dan produk
Struktur enzim Sifat-sifat interaksi dengan enzim
Golongan fungsional pada lokasi enzim Sifat biologis enzim, asam amino yang
berperan pada lokasi aktif Sumber: Suhartono. 1989
Beberapa senyawa bioaktif dari tumbuhan ketika ditambahkan ke dalam reaksi enzimatis dapat berperan sebagai aktivator dan juga inhibitor. Secara
kimiawi, suatu inhibitor tidak dapat dibedakan dari aktivator. Setelah mereka berinteraksi dengan enzim, barulah dapat dibedakan antara aktivator dan inhibitor.
Aktivator, berikatan dengan enzim dan menyebabkan kenaikan kecepatan reaksi
enzim, sedangkan inhibitor berikatan dengan enzim dan menyebabkan penurunan kecepatan reaksi enzim. Umumnya inhibitor menghambat kerja enzim dengan tiga
jenis penghambatan, yakni penghambatan kompetitif, non kompetitif dan unkompetitif Suhartono. 1989.
2. 3.1 Penghambatan Kompetitif
