Pencucian dan Dehidrasi Penjernihan clearing dan infiltrasi Parafin

2.10 Preparasi Jaringan 2.10.1 Fiksasi Fiksasi adalah suatu usaha manusia untuk mempertahankan elemen- elemen sel atau jaringan agar tetap pada tempatnya dan tidak mengalami perubahan bentuk maupun ukuran. Untuk mencapai tujuan tersebut maka para ahli sitologi berusaha mencari suatu media yang terdiri dari unsure-unsur kimia, yang kemudian dibuat suatu larutan. Media ini kemudian disebut fiksatif. Dalam hal ini digunakan formaldehid sebagai fiksatif. Formaldehid diketahui dapat mengeraskan jaringan bahkan dapat mengendapkan protein jaringan, terutama bila yang digunakan formaldehid 40. Oleh karena itu konsentrasi yang biasa digunakan untuk fiksasi adalah 4-10 Jones,1985.

2.10.2 Pencucian dan Dehidrasi

Setelah proses fiksasi maka dilakukan pencucian. Hal ini dimaksudkan untuk menghilangkan larutan fiksatif dari jaringan. Setelah proses pencucian selesai maka dilakukan dehidrasi. Istilah dehidrasi disini berarti penarikan molekul air dari dalam jaringan. Proses ini dimaksudkan untuk menarik air yang terdapat dalam jaringan agar nantinya seluruh ruangan antar sel dalam jaringan dapat diisi oleh molekul-molekul parafin Jones,1985. Dalam proses ini, dehidran yang digunakan adalah alkohol.. Proses ini biasanya dimulai dari alkohol persentase rendah kemudian setingkat demi setingkat menuju ke alkohol persentase tinggialkohol absolute. Proses ini dimaksudkan untuk menjaga agar tidak terjadi perubahan yang tiba-tiba terhadap sel jaringan, sehingga perubahan struktur sel yang terjadi sekecil mungkin Jones,1985. Universitas Sumatera Utara

2.10.3 Penjernihan clearing dan infiltrasi Parafin

Pada proses penjernihan digunakan xilol atau xylene. Proses ini dimaksudkan untuk menarik alkohol atau dehidran yang lain dalam jaringan, agar nantinya dapat digantikan oleh molekul parafin Jones,1985. Setelah proses penjernihan , selanjutnya dimulai proses infiltrasi parafin. Parafin yang digunakan adalah yang titik cairnya berkisar 50-56 ºC. Proses ini seluruhnya dikerjakan di dalam oven. Waktu yang diperlukan oleh suatu jaringan di dalam campuran zat parafin murni tidak terlalu lama cukup berkisar antara 60 menit. Jaringan dipindahkan mulai dari parafin I, parafin II, parafin III, hal ini dimaksudkan agar jaringan mendapatkan suatu lingkungan parafin yang betul- betul murni. Selain itu tingkatan parafin ini dimaksudkan untuk mencegah tertahannya sejumlah besar zat penjernih di dalam jaringan, karena akan melunakkan jaringan dan membuat jaringan sukar diiris. Setelah proses ini maka dibuatlah suatu blok jaringan sehingga diperoleh massa yang keras dan padat sehingga dapat di potong menjadi jaringan yang tipis Jones,1985.

2.10.4 Deparafinasi dan Pewarnaan