4.3 Penentuan Panjang Gelombang Analisis Hidrokortison Asetat dan
Kloramfenikol
Gambar 4.6 Lima titik panjang gelombang yang akan digunakan
Berdasarkan Gambar 4.6 maka diperoleh lima panjang gelombang analisis yang digunakan. Lima panjang gelombang analisis yang digunakan adalah 220,6
nm pada panjang gelombang ini hidrokortison asetat dan kloramfenikol sudah memberikan serapan dan merupakan titik potong kedua kurva serapan
hidrokortison asetat dan kloramfenikol. Pada panjang gelombang 241,8 nm kloramfenikol sudah memberikan serapan dan merupakan serapan maksimum
hidrokortison asetat. Pada panjang gelombang 250,6 nm serapan hidrokortison asetat sudah menurun dan serapan kloramfenikol mulai meningkat. Pada panjang
gelombang 259,2 nm hidrokortison asetat dan kloramfenikol masih sama-sama memberikan serapan dan merupakan titik potong kedua kurva serapan
hidrokortison asetat dan kloramfenikol. Pada panjang gelombang 266,6 nm serapan hidrokortison asetat sudah menurun dan serapan kloramfenikol masih meningkat.
nm. 200.00
250.00 300.00
350.00 400.00
A b
s.
0.464 0.400
0.200
0.000 -0.043
266.6 259,2
250,6 241.8
220.6
Hidrokortison Asetat 10 µgmL Kloramfenikol 8 µgmL
Universitas Sumatera Utara
4.4 Hasil Penentuan Serapan a
Setelah dilakukan pengukuran serapan masing-masing larutan pada panjang gelombang analisis 220,6; 241,8; 250,6; 259,2 dan 266,6 nm dengan pengulangan
sebanyak enam kali. Data perhitungan serapan hidrkortison asetat dan kloramfenikol dapat dilihat pada Tabel 4.1-4.12.
Tabel 4.1 Data Perhitungan Serapan Hidrokortison Asetat Pengulangan I
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm
241.8 nm 250.6 nm
259.2 nm 266.6 nm
5 0.123
0.274 0.216
0.105 0.031
7.5 0.166
0.378 0.299
0.144 0.042
10 0.218
0.483 0.382
0.185 0.056
12.5 0.269
0.588 0.465
0.227 0.071
15 0.313
0.682 0.54
0.264 0.082
a=0.02073 a=0.04507 a=0.03569 a=0.01745 a=0.00547 b=0.0088
b=0.0252 b=0.0196
b=0.0088 b=0.0014
r=0.9981 r=0.9969
r=0.9971 r=0.9975
r=0.9988 Tabel 4.2 Data Perhitungan Serapan Hidrokortison Asetat Pengulangan II
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm 241.8 nm 250.6 nm 259.2 nm 266.6 nm
5 0.135
0.287 0.228
0.112 0.036
7.5 0.167
0.38 0.301
0.146 0.044
10 0.215
0.485 0.384
0.186 0.056
12.5 0.268
0.591 0.467
0.227 0.07
15 0.313
0.688 0.545
0.265 0.082
a=0.02038 a=0.04515 a=0.03571 a=0.01733 a=0.00531 b=0.0131 b=0.0289 b=0.0232 b=0.0116 b=0.0037
r=0.9950 r=0.9960
r=0.9959 r=0.9956
r=0.9941
Universitas Sumatera Utara
Tabel 4.3 Data Perhitungan Serapan Hidrokortison Asetat Pengulangan III
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm 241.8 nm 250.6 nm 259.2 nm 266.6 nm
5 0.131
0.285 0.225
0.108 0.032
7.5 0.173
0.382 0.302
0.146 0.044
10 0.223
0.489 0.386
0.187 0.057
12.5 0.271
0.592 0.468
0.227 0.069
15 0.318
0.692 0.548
0.267 0.082
a=0.02085 a=0.04544 a=0.03597 a=0.01753 a=0.00539 b=0.0123 b=0.0280 b=0.0218 b=0.0098 b=0.0024
r=0.9966 r=0.9963
r=0.9965 r=0.9970
r=0.9980 Tabel 4.4 Data Perhitungan Serapan Hidrokortison Asetat Pengulangan IV
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm 241.8 nm 250.6 nm 259.2 nm 266.6 nm
5 0.14
0.283 0.222
0.108 0.032
7.5 0.182
0.385 0.304
0.148 0.045
10 0.242
0.491 0.388
0.19 0.059
12.5 0.276
0.591 0.467
0.227 0.069
15 0.325
0.689 0.545
0.265 0.083
a=0.02127 a=0.04533 a=0.03588 a=0.01746 a=0.00545 b=0.0169 b=0.0288 b=0.0220 b=0.0109 b=0.0026
r=0.9931 r=0.9961
r=0.9964 r=0.9962
r=0.9975
Tabel 4.5 Data Perhitungan Serapan Hidrokortison Asetat Pengulangan V
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm 241.8 nm 250.6 nm 259.2 nm 266.6 nm
5 0.123
0.196 0.156
0.075 0.031
7.5 0.166
0.291 0.23
0.108 0.042
10 0.218
0.398 0.314
0.149 0.056
12.5 0.269
0.5 0.394
0.187 0.071
15 0.313
0.603 0.479
0.235 0.082
a=0.02073 a=0.04026 a=0.03186 a=0.01546 a=0.00547 b=0.0088 b=-0.0041 b=-0.0034 b=-0.0031 b=0.0014
r=0.9981 r=0.9998
r=0.9998 r=0.9987
r=0.9988
Universitas Sumatera Utara
Tabel 4.6 Data Perhitungan Serapan Hidrokortison Asetat Pengulangan VI
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm 241.8 nm 250.6 nm 259.2 nm 266.6 nm
5 0.138
0.28 0.221
0.107 0.032
7.5 0.179
0.385 0.305
0.148 0.045
10 0.239
0.49 0.386
0.188 0.058
12.5 0.274
0.59 0.466
0.226 0.069
15 0.323
0.686 0.543
0.264 0.081
a=0.02115 a=0.04522 a=0.03575 a=0.01738 a=0.00535 b=0.0159 b=0.0284 b=0.0222 b=0.0106 b=0.0029
r=0.9938 r=0.9962
r=0.9963 r=0.9964
r=0.9969
Tabel 4.7 Data Perhitungan Serapan Kloramfenikol Pengulangan I
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm
241.8 nm 250.6 nm
259.2 nm 266.6 nm
10 0.266
0.102 0.149
0.222 0.281
12 0.31
0.122 0.179
0.267 0.337
14 0.363
0.144 0.209
0.31 0.39
16 0.431
0.171 0.25
0.374 0.472
18 0.495
0.197 0.286
0.425 0.532
a=0.02710 a=0.01080 a=0.01571 a=0.02338 a=0.02935 b=-0.0053 b=-0.0033 b=-0.0044 b=-0.0065 b=-0.0071
r=0.9986 r=0.9981
r=0.9983 r=0.9982
r=0.9985 Tabel 4.8 Data Perhitungan Serapan Kloramfenikol Pengulangan II
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm
241.8 nm 250.6 nm
259.2 nm 266.6 nm
10 0.353
0.127 0.187
0.275 0.344
12 0.398
0.157 0.227
0.331 0.412
14 0.433
0.165 0.246
0.363 0.455
16 0.489
0.188 0.279
0.413 0.518
18 0.556
0.217 0.315
0.463 0.579
a=0.03047 a=0.01188 a=0.01742 a=0.02568 a=0.03215 b=0.0160
b=0.0038 b=0.0058
b=0.0079 b=0.0096
r=0.9949 r=0.9964
r=0.9976 r=0.9982
r=0.9984
Universitas Sumatera Utara
Tabel 4.9 Data Perhitungan Serapan Kloramfenikol Pengulangan III
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm
241.8 nm 250.6 nm
259.2 nm 266.6 nm
10 0.361
0.139 0.201
0.297 0.371
12 0.406
0.156 0.226
0.332 0.414
14 0.472
0.186 0.262
0.377 0.468
16 0.504
0.195 0.286
0.421 0.527
18 0.577
0.223 0.321
0.467 0.582
a=0.03184 a=0.01235 a=0.01782 a=0.02595 a=0.03237 b=0.0152
b=0.0057 b=0.0081
b=0.0129 b=0.0160
r=0.9958 r=0.9955
r=0.9967 r=0.9962
r=0.9961
Tabel 4.10 Data Perhitungan Serapan Kloramfenikol Pengulangan IV
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm
241.8 nm 250.6 nm
259.2 nm 266.6 nm
10 0.265
0.095 0.138
0.205 0.261
12 0.321
0.12 0.175
0.26 0.33
14 0.375
0.141 0.206
0.303 0.384
16 0.431
0.163 0.237
0.35 0.443
18 0.487
0.184 0.268
0.394 0.498
a=0.02701 a=0.01024 a=0.01492 a=0.02195 a=0.02776 b=-0.0020 b=-0.0023 b=-0.0034 b=-0.0041 b=-0.0045
r=0.9999 r=0.9991
r=0.9991 r=0.9993
r=0.9994
Tabel 4.11 Data Perhitungan Serapan Kloramfenikol Pengulangan V
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm
241.8 nm 250.6 nm
259.2 nm 266.6 nm
10 0.265
0.103 0.149
0.219 0.278
12 0.321
0.125 0.181
0.266 0.336
14 0.375
0.142 0.206
0.304 0.385
16 0.431
0.163 0.237
0.35 0.443
18 0.487
0.184 0.268
0.394 0.498
a=0.02701 a=0.01020 a=0.01484 a=0.02186 a=0.02764 b=-0.0020 b=0.0006
b=0.0004 b=0.0005
b=0.0008 r=0.9999
r=0.9998 r=0.9999
r=0.9999 r=0.9999
Universitas Sumatera Utara
Tabel 4.12 Data Perhitungan Serapan Kloramfenikol Pengulangan VI
Konsentrasi µgmL
1 2
3 4
5 220.6 nm
241.8 nm 250.6 nm
259.2 nm 266.6 nm
10 0.342
0.132 0.192
0.281 0.349
12 0.388
0.151 0.222
0.327 0.408
14 0.431
0.166 0.246
0.364 0.456
16 0.498
0.191 0.281
0.415 0.519
18 0.547
0.212 0.312
0.46 0.577
a=0.03043 a=0.01174 a=0.01732 a=0.02558 a=0.03207 b=0.0127
b=0.0050 b=0.0068
b=0.0094 b=0.0106
r=0.9970 r=0.9969
r=0.9975 r=0.9979
r=0.9982 Pemilihan nilai serapan a dapat ditentukan berdasarkan harga r hitungnya.
Nilai r ≥ 0,97 dapat diterima dan memenuhi kriteria validasi Ermer dan McB Miller, 2005.
Nilai serapan a yang dipakai adalah nilai serapan dari hidrokortison asetat dan kloramfenikol adalah pada pengulangan V. Data serapan jenis yang diperoleh
ini kemudian digunakan untuk menetapkan kadar hidrokortison asetat dan kloramfenikol dalam campuran dengan perhitungan matriks.
4.5 Hasil Kadar Teoritis Campuran Baku Hidrokortison Asetat dan
Kategori