Gambar 8.a Penguapan perkolat dengan menggunakan Vaccum Rotary Evaporator;bEkstrak kental kulit buah delima
3.7.2 Pengenceran Bahan Coba
Ekstrak kulit delima ditimbang dengan electronic balance dan massanya disesuaikan dengan konsentrasi yang diinginkan dengan cara dilarutkan dengan
media Tryptic Soy Broth TSB
. Disediakan 6 buah tabung, pada tabung pertama diisi 1,25 gram ekstrak kental kulit buah delima dan dilarutkan dengan 5 ml TSB,
kemudian dicampur dengan menggunakan vorteks sehingga diperoleh ekstrak kulit buah delima dengan konsentrasi 25. Lima buah tabung lainnya kemudian diisi
masing-masing l ml TSB. Selanjutnya dilakukan pengenceran dengan cara mengambil ½ dari esktrak kulit buah delima konsentrasi 25 menggunakan mikropipet dan
diletakkan pada tabung ke-2 untuk mendapatkan ekstrak kulit buah delima 12,5 pengenceran ganda. Demikian seterusnya sampai tabung ke-6 sehingga dihasilkan
konsentrasi 6,25, 3,125, 1,6125 dan 0,8. Tabung-tabung tersebut kemudian diberi label sesuai konsentrasinya.
3.7.3 Pembuatan Media Bakteri
Sebelum spesimen dibiakkan, dibuat media bakteri dengan melarutkan bubuk
Tryptic Soy Agar TSA sebanyak 20 gram ke dalam 500 ml akuades untuk 40
petri 20 mlpetri Gambar 9, kemudian dimasukkan ke dalam autoclave selama 15- 20 menit dengan tekanan udara 2 ATM, suhu 121°C Gambar 10. Selanjutnya,
Universitas Sumatera Utara
media disimpan di dalam lemari pendingin Gambar 11. Jika akan digunakan kembali, media dipanaskan kembali sehingga mendidih, lalu dituangkan ke dalam
masing-masing petri dan dibiarkan hingga dingin.
Gambar 9. Penimbangan TSA dengan electronic balance dan pelarutan dengan akuades
Gambar 10. Media disterilkan dengan autoclave
Gambar 11. Media yang telah siap dibuat
Universitas Sumatera Utara
3.7.4 Pembuatan Suspensi Bakteri
Kegiatan pembuatan suspensi bakteri menggunakan Aa yang telah dibiakkan secara murni pada media
Tryptic Soy Agar TSA dalam suasana anaerob.
Sebanyak 1-2 ose dari biakan murni bakteri uji yang telah dikultur dan tumbuh dengan subur disuspensikan dengan menggunakan larutan NaCL 0,9 sampai
diperoleh kekeruhan sesuai standar Mac Farland atau sebanding dengan jumlah bakteri 1 x 10
8
CFUml.
3.7.5 Pembuatan Kontrol Positif
