Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Buah Adas Manis (Foeniculum vulgare Mill.) Pada Mencit

Ekstrak kental etanol

buah adas manis

Ekstrak kering buah adas manis

Skrining fitokimia untuk pemeriksaan : a. Alkaloida

b. Flavanoida c. Glikosida

d. Antrakinon glikosida e. Saponin

f. Tanin

g. Steroida / triterpenoida

Uji toksisitas akut

Dikeringkan dengan freeze dryer pada suhu -40oC

500g buah adas manis

Dibersihkan

Dimaserasi dengan pelarut etanol 80%

Maserat

Diuapkan dengan alat rotary evaporator pada temperatur 400C

Lampiran 5. Bagan penelitian uji toksisitas ekstrak etanol buah adas manis 40 ekor mencit jantan

Aklimatisasi (7 hari) Randomisasi

Kontrol P1

+ CMC

Na 1 %

Gejala klinis, konsumsi makanan dan minuman, berat badan, kematian, makropatologi organ hewan coba (14 hari)

+ EEBA M 5 mg/kg bb P2 P3 + EEBAM 50 mg/kg bb + EEBAM 300 mg/kg bb + EEBAM 1000 mg/kg bb + EEBAM 2000 mg/kg bb + EEBAM 4000 mg/kg bb + EEBAM 8000 mg/kg bb

Berat badan mencit 25 kg dengan dosis EEBAM 1000 mg/kg bb Dosis = 1000 mg/kg bb

= (25 : 1000 kg) x 1000 mg/kg = 25 mg

Konsentrasi ekstrak yang dibuat 8 % = 8 g/ 100 ml = 8000 mg/100 ml = 80 mg/ml

Jumlah obat yang disuntik = 25 mg : 80 mg/ml = 0,31 ml

Lampiran 7. Hasil pengukuran berat badan 1. Berat badan pada minggu pertama

Perlakuan Berat badan hari ke- (g)

0 3 7

kontrol I _{25,78 28,08 28,02}

kontrol II _{27,09 29,48 28,37}

kontrol III _{29,98 29,89 29,17}

kontrol IV _{30,16 30,79 29,93}

kontrol V _{30,84 30,81 30,66}

Dosis 5 mg/kg bb _{27,86 28,05 28,28}

Dosis 5 mg/kg bb _{28,19 28,16 29,25}

Dosis 5 mg/kg bb _{28,55 29,48 30,56}

Dosis 5 mg/kg bb _{29,68 29,99 31,39}

Dosis 5 mg/kg bb _{30,52 31,57 31,77}

Dosis 50 mg/kg bb _{27,25 27,55 28,78}

Dosis 50 mg/kg bb _{27,68 28,87 29,69}

Dosis 50 mg/kg bb _{28,46 29,61 29,84}

Dosis 50 mg/kg bb _{30,28 29,67 30,56}

Dosis 50 mg/kg bb _{31,98 31,55 31,03}

Dosis 300 mg/kg bb _{30,72 32,14 33,18}

Dosis 300 mg/kg bb _{28,69 29,09 29,24}

Dosis 300 mg/kg bb _{29,55 29,73 29,83}

Dosis 300 mg/kg bb _{29,5 31,01 31,13}

Dosis 300 mg/kg bb _{29,96 30,17 30,59}

Dosis 1000 mg/kg bb 31,02 31,19 33,11

Dosis 1000 mg/kg bb 28,97 28,63 28,77

Dosis 1000 mg/kg bb 29,28 31,27 28,15

Dosis 1000 mg/kg bb 25,94 27,42 29,55

Dosis 1000 mg/kg bb 29,03 30,43 29,03

Dosis 2000 mg/kg bb 30,97 32,84 31.69

Dosis 2000 mg/kg bb 28,93 29,01 29,29

1. Berat badan pada minggu pertama

Perlakuan Berat badan hari ke- (g)

0 3 7

Dosis 2000 mg/kg bb 29,05 29,65 30,41

Dosis 2000 mg/kg bb 29,09 30,95 30,59

Dosis 4000 mg/kg bb 32,65 31,33 33,98

Dosis 4000 mg/kg bb 28,95 29,45 28,65

Dosis 4000 mg/kg bb 31,09 31,66 31,93

Dosis 4000 mg/kg bb 31,02 30,16 31,13

Dosis 4000 mg/kg bb 30,96 30,86 32,39

Dosis 8000 mg/kg bb 31,26 31,93 33,19

Dosis 8000 mg/kg bb 29,21 30,68 29,26

Dosis 8000 mg/kg bb 30,47 30,54 31,38

Dosis 8000 mg/kg bb 30,81 30,89 31,37

Lampiran 7. (lanjutan)

2. Berat badan pada minggu kedua

Perlakuan Berat badan hari ke- (g)

0 10 14

kontrol I _{25,78 28,89 29,07}

kontrol II _{27,09 29,02 29,13}

kontrol III _{29,98 29,16 29,98}

kontrol IV _{30,16 30,38 31,13}

kontrol V _{30,84 31,45 31,24}

Dosis 5 mg/kg bb _{27,86 29,17 29,97}

Dosis 5 mg/kg bb _{28,19 29,43 30,66}

Dosis 5 mg/kg bb _{28,55 30,98 30,74}

Dosis 5 mg/kg bb _{29,68 31,08 32,64}

Dosis 5 mg/kg bb _{30,52 32,14 32,69}

Dosis 50 mg/kg bb _{27,25 29,29 29,86}

Dosis 50 mg/kg bb _{27,68 29,42 30,19}

Dosis 50 mg/kg bb _{28,46 29,68 30,99}

Dosis 50 mg/kg bb _{30,28 31,65 31,18}

Dosis 50 mg/kg bb _{31,98 31,66 31,68}

Dosis 300 mg/kg bb _{30,72 33,16 34,16}

Dosis 300 mg/kg bb _{28,69 29,33 30,93}

Dosis 300 mg/kg bb _{29,55 31,09 32,21}

Dosis 300 mg/kg bb _{29,5 31,98 33,14}

Dosis 300 mg/kg bb _{29,96 31,58 32,64}

Dosis 1000 mg/kg bb 31,02 32,24 33,72

Dosis 1000 mg/kg bb 28,97 29,19 30,49

Dosis 1000 mg/kg bb 29,28 30,99 32,37

Dosis 1000 mg/kg bb 25,94 30,91 32,43

Dosis 1000 mg/kg bb 29,03 30,88 32,54

Dosis 2000 mg/kg bb 30,97 33,25 33,48

Dosis 2000 mg/kg bb 28,93 29,86 30,44

2. Berat badan pada minggu kedua

Perlakuan Berat badan hari ke- (g)

0 10 14

Dosis 2000 mg/kg bb 29,05 30,63 31,61

Dosis 2000 mg/kg bb 29,09 31,75 32,11

Dosis 4000 mg/kg bb 32,65 34,12 34,17

Dosis 4000 mg/kg bb 28,95 30,91 31,75

Dosis 4000 mg/kg bb 31,09 32,06 33,15

Dosis 4000 mg/kg bb 31,02 31,82 32,98

Dosis 4000 mg/kg bb 30,96 32,66 34,68

Dosis 8000 mg/kg bb 31,26 33,18 33,68

Dosis 8000 mg/kg bb 29,21 32,19 32,78

Dosis 8000 mg/kg bb 30,47 31,54 31,82

Dosis 8000 mg/kg bb 30,81 32,19 32,61

Lampiran 8. Perhitungan karakterisasi simplisia buah adas manis a. Penetapan kadar air

% 100 sampel berat air volume air kadar %  

1. Berat sampel = 5,0000 g

Volume air = 0,3500 ml

Kadar air = 100% 7,0000%

0000 , 5

3500 ,

0 _{ }

2. Berat sampel = 5,1550 g

Volume air = 0,4500 ml

Kadar air = 100% 8,7294%

1550 , 5 4500 , 0  

3. Berat sampel = 5,0880 g

Volume air = 0,4500 ml

Kadar air = 100% 8,1912%

0880 , 5 4500 , 0  

Rata-rata kadar air: 7,9735%

3 1912 , 8 7294 , 8 0000 , 7   

No. Berat sampel (g)

Volume air awal

Volume air akhir Volume air sebenarnya

1 5,0000 1,4000 1,7500 0,3500

2 5,1550 2,0000 2,4500 0,4500

b. Penetapan kadar sari larut etanol % 100 20 100 sampel berat etanol larut sari berat etanol larut sari kadar %   

1. Berat sampel = 5,0180 g Berat sari = 0,1560 g

Kadar sari = 100% 15,5440%

20 100 0180 , 5 1560 , 0   

2. Berat sampel = 5,0270 g Berast sari = 0,1624 g

Kadar sari = 100% 16,1528%

20 100 0270 , 5 1624 , 0   

3. Berat sampel = 5,0195 g Berast sari = 0,1417 g

Kadar sari = 0,1417100100%15,1111%

No. Berat

sampel (g)

Berat cawan Berat cawan + sari larut etanol

Berat sari larut etanol

1 5,0180 29,6493 29,8053 0,1560

2 5,0270 25,0725 25,2349 0,1624

Lampiran 8. (Lanjutan)

c. Penetapan kadar sari larut air

% 100 20 100 sampel berat air larut sari berat air larut sari kadar %   

1. Berat sampel = 5,0235 g Berast sari = 0,3011 g

Kadar sari = 100% 29,9691%b/v

20 100 0235 , 5 3011 ,

0 _{  }

2. Berat sampel = 5,0310 g Berast sari = 0,2545 g

Kadar sari = 100% 25,2932%b/v

20 100 0310 , 5 2545 ,

0 _{  }

3. Berat sampel = 5,0229 g Berast sari = 0,3177 g

Kadar sari = 100% 31,6252%b/v

20 100 0229 , 5 3177 , 0   

Rata-rata kadar sari larut air: 28,9625%b/v

3 6252 , 31 2932 , 25 9691 , 29   

No. Berat cawan Berat sampel (g) Berat cawan + sari larut air

Berat sari larut air

1 49,7330 5,0235 50,0341 0,3011

2 49,4780 5,0310 49,7325 0,2545

d. Penetapan kadar abu total

% 100 sampel berat

abu berat abu total

kadar

%  

1. Berat sampel = 2,0700 g Berat abu = 0,1570 g

Kadar abu = 100% 7,5845%

0700 , 2

1570 ,

0 _{ }

2. Berat sampel = 2,1530 g Berat abu = 0,1730 g

Kadar abu = 100% 8,0350%

1530 , 2

1730 , 0

 

3. Berat sampel = 2,0520 g Berat abu = 0,1490 g

Kadar abu = 100% 7,2612%

0520 , 2

1490 , 0

 

NO. Berat krus Berat sampel (g) Berat krus + abu Berat abu

1 53,6220 2,0700 53,7790 0,1570

2 50,1090 2,1530 50,2820 0,1730

Lampiran 8. (Lanjutan)

e. Penetapan kadar abu tidak larut asam

% 100 sampel berat asam larut abu tidak berat asam larut abu tidak kadar %  

1. Berat sampel = 2, 0520 g Berat abu = 0,0300 g

Kadar abu = 100% 1,4493%

0520 , 2

0300 ,

0 _{ }

2. Berat sampel = 2,0520 g Berat abu = 0,0210 g

Kadar abu = 100% 1,0234%

0520 , 2 0210 , 0  

3. Berat sampel = 2,0520 g Berat abu = 0,0230 g

Kadar abu = 100% 1,1209%

0520 , 2 0230 , 0  

Rata-rata kadar abu tidak larut asam = 1,1979%

3 1209 , 1 0234 , 1 4493 , 1   

No. Berat sampel (g) Berat krus Berat krus + abu tidak larut asam

Berat abu tidak larut asam

1 2,0700 53,6220 53,6520 0,0300

2 2,0520 50,1090 50,1300 0,0210

a. Penetapan kadar air

% 100 sampel berat

air volume air

kadar  

No. Beratsampel (g) Volume air 1 Volume air 2 Volume air

1 5,0253 2,1 2,5 0,4000

2 5,1725 2,5 2,9 0,4000

3 5,0623 2,9 3,4 0,4000

1. Berat sampel = 5,0253 g

Volume air = 0,4000 ml

Kadar air = 100% 7,9597%

0253 , 5

4000 ,

0 _{ }

2. Berat sampel = 5,1725 g

Volume air = 0,4000 ml

Kadar air = 100% 7,7332%

1725 , 5

4000 , 0

 

3. Berat sampel = 5,0623 g

Volume air = 0,4000 ml

Kadar air = 100% 7,9015%

0623 , 5

4000 , 0

 

Lampiran 9. (Lanjutan) b. Penetapan kadar abu total

1. Berat sampel = 2,0938 g Berat abu = 0,0224 g

Kadar abu = 100% 1,0698%

0938 , 2 0224 , 0  

2. Berat sampel = 2,0082 g Berat abu = 0,0146 g

Kadar abu = 100% 0,7270%

0082 , 2 0146 , 0  

3. Berat sampel = 2,0179 g Berat abu = 0,0177 g

Kadar abu = 100% 0,8771%

0179 , 2 0177 , 0  

Rata-rata kadar abu total: 0,8913%

3 8771 , 0 7270 , 0 0698 ,

1   _

No Berat sampel (g)

Berat krus Berat krus + abu Berat abu total

1 2,0938 63,5387 63,5611 0,0224

2 2,0082 58,2095 58,2241 0,0146

3 2,0179 57,2289 57,2466 0,0177

% 100 sampel berat abu berat abu total

c. Penetapan kadar abu tidak larut asam

% 100 sampel

berat

asam larut abu tidak berat

asam larut abu tidak kadar

%  

1. Berat sampel = 2,0938 g Berat abu = 0,0092 g

Kadar abu = 100% 0,4394%

0938 , 2

0092 , 0

 

2. Berat sampel = 2,0082 g Berat abu = 0,0098 g

Kadar abu = 100% 0,4880%

0082 , 2

0098 ,

0 _{ }

3. Berat sampel = 2,0179 g Berat abu = 0,0096 g

Kadar abu = 0,0096100%0,4757% No. Berat sampel

(g)

Berat krus Berat krus + abu Berat abu tidak larut asam

1 2,0938 63,5387 63,5479 0,0092

2 2,0082 58,2095 58,2193 0,0098

Lampiran 10. Hasil analisis data SPSS berat badan mencit a. Berat badan mula-mula

Descriptives

N Mean

Std. Deviatio n Std. Error 95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

Kontrol 5 28.7700 2.20474 .98599 26.0324 31.5076 5 28.7700 5 mg/ kg bb 5 28.9600 1.10939 .49614 27.5825 30.3375 5 28.9600 50 mg/ kg bb 5 29.1300 1.97046 .88122 26.6834 31.5766 5 29.1300 300 mg/ kg bb 5 29.6840 .73982 .33086 28.7654 30.6026 5 29.6840 1000 mg/ kg bb 5 28.8480 1.83089 .81880 26.5746 31.1214 5 28.8480 2000 mg/ kg bb 5 29.4140 .87183 .38989 28.3315 30.4965 5 29.4140 4000 mg/ kg bb 5 30.9340 1.31466 .58793 29.3016 32.5664 5 30.9340 8000 mg/ kg bb 5 30.5800 .82601 .36940 29.5544 31.6056 5 30.5800 Total 40 29.5400 1.53060 .24201 29.0505 30.0295 40 29.5400

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.

2.098 7 32 .073

Tukey

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound kontrol

dosis 5 mg/ kg bb -.19000 .92316 1.000 -3.1804 2.8004 dosis 50 mg/ kg bb -.36000 .92316 1.000 -3.3504 2.6304 dosis 300 mg/ kg bb -.91400 .92316 .973 -3.9044 2.0764 dosis 1000 mg/ kg bb -.07800 .92316 1.000 -3.0684 2.9124 dosis 2000 mg/ kg bb -.64400 .92316 .996 -3.6344 2.3464 dosis 4000 mg/ kg bb -2.16400 .92316 .302 -5.1544 .8264 dosis 8000 mg/ kg bb -1.81000 .92316 .522 -4.8004 1.1804

dosis 5 mg/ kg bb

kontrol .19000 .92316 1.000 -2.8004 3.1804 dosis 50 mg/ kg bb -.17000 .92316 1.000 -3.1604 2.8204 dosis 300 mg/ kg bb -.72400 .92316 .993 -3.7144 2.2664 dosis 1000 mg/ kg bb .11200 .92316 1.000 -2.8784 3.1024 dosis 2000 mg/ kg bb -.45400 .92316 1.000 -3.4444 2.5364 dosis 4000 mg/ kg bb -1.97400 .92316 .414 -4.9644 1.0164 dosis 8000 mg/ kg bb -1.62000 .92316 .653 -4.6104 1.3704

dosis 50 mg/ kg bb

kontrol .36000 .92316 1.000 -2.6304 3.3504 dosis 5 mg/ kg bb .17000 .92316 1.000 -2.8204 3.1604 dosis 300 mg/ kg bb -.55400 .92316 .999 -3.5444 2.4364 dosis 1000 mg/ kg bb .28200 .92316 1.000 -2.7084 3.2724 dosis 2000 mg/ kg bb -.28400 .92316 1.000 -3.2744 2.7064 dosis 4000 mg/ kg bb -1.80400 .92316 .526 -4.7944 1.1864 dosis 8000 mg/ kg bb -1.45000 .92316 .763 -4.4404 1.5404 dosis 300

mg/ kg bb

kontrol .91400 .92316 .973 -2.0764 3.9044 dosis 5 mg/ kg bb .72400 .92316 .993 -2.2664 3.7144 dosis 50 mg/ kg bb .55400 .92316 .999 -2.4364 3.5444 dosis 1000 mg/ kg bb .83600 .92316 .983 -2.1544 3.8264 dosis 2000 mg/ kg bb .27000 .92316 1.000 -2.7204 3.2604 dosis 4000 mg/ kg bb -1.25000 .92316 .871 -4.2404 1.7404

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound dosis 8000 mg/ kg bb -.89600 .92316 .975 -3.8864 2.0944

dosis 1000 mg/ kg bb

kontrol .07800 .92316 1.000 -2.9124 3.0684 dosis 5 mg/ kg bb -.11200 .92316 1.000 -3.1024 2.8784 dosis 50 mg/ kg bb -.28200 .92316 1.000 -3.2724 2.7084 dosis 300 mg/ kg bb -.83600 .92316 .983 -3.8264 2.1544 dosis 2000 mg/ kg bb -.56600 .92316 .998 -3.5564 2.4244 dosis 4000 mg/ kg bb -2.08600 .92316 .346 -5.0764 .9044 dosis 8000 mg/ kg bb -1.73200 .92316 .576 -4.7224 1.2584

dosis 2000 mg/ kg bb

kontrol .64400 .92316 .996 -2.3464 3.6344 dosis 5 mg/ kg bb .45400 .92316 1.000 -2.5364 3.4444 dosis 50 mg/ kg bb .28400 .92316 1.000 -2.7064 3.2744 dosis 300 mg/ kg bb -.27000 .92316 1.000 -3.2604 2.7204 dosis 1000 mg/ kg bb .56600 .92316 .998 -2.4244 3.5564 dosis 4000 mg/ kg bb -1.52000 .92316 .720 -4.5104 1.4704 dosis 8000 mg/ kg bb -1.16600 .92316 .906 -4.1564 1.8244

dosis 4000 mg/ kg bb

kontrol 2.16400 .92316 .302 -.8264 5.1544 dosis 5 mg/ kg bb 1.97400 .92316 .414 -1.0164 4.9644 dosis 50 mg/ kg BB 1.80400 .92316 .526 -1.1864 4.7944 dosis 300 mg/ kg BB 1.25000 .92316 .871 -1.7404 4.2404 dosis 1000 mg/ kg bb 2.08600 .92316 .346 -.9044 5.0764 dosis 2000 mg/ kg bb 1.52000 .92316 .720 -1.4704 4.5104 dosis 8000 mg/ kg bb .35400 .92316 1.000 -2.6364 3.3444

dosis 8000 mg/ kg bb

Kontrol 1.81000 .92316 .522 -1.1804 4.8004 dosis 5 mg/ kg bb 1.62000 .92316 .653 -1.3704 4.6104 dosis 50 mg/ kg bb 1.45000 .92316 .763 -1.5404 4.4404 dosis 300 mg/ kg bb .89600 .92316 .975 -2.0944 3.8864 dosis 1000 mg/ kg bb 1.73200 .92316 .576 -1.2584 4.7224 dosis 2000 mg/ kg bb 1.16600 .92316 .906 -1.8244 4.1564 dosis 4000 mg/ kg bb -.35400 .92316 1.000 -3.3444 2.6364

Lampiran 10. (Lanjutan) b. Berat badan minggu I

Descriptives

N Mean Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

Kontrol 5 29.5200 1.08361 .48461 28.1745 30.8655 28.05 30.74 5 mg/ kg bb 5 29.8500 1.43153 .64020 28.0725 31.6275 28.17 31.67 50 mg/ kg bb 5 29.7150 1.14373 .51149 28.2949 31.1351 28.17 31.29 300 mg/ kg bb 5 30.6110 1.34573 .60183 28.9401 32.2819 29.17 32.66 1000 mg/ kg bb 5 29.7550 1.45470 .65056 27.9488 31.5612 28.49 32.15 2000 mg/ kg bb 5 30.5970 1.14645 .51271 29.1735 32.0205 29.15 32.27 4000 mg/ kg bb 5 31.1540 1.37583 .61529 29.4457 32.8623 29.05 32.66 8000 mg/ kg bb 5 31.2650 .95641 .42772 30.0775 32.4525 29.97 32.56 Total 40 30.3084 1.30873 .20693 29.8898 30.7269 28.05 32.66

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.

.215 7 32 .979

Tukey

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound kontrol

dosis 5 mg/ kg bb -.33000 .79312 1.000 -2.8991 2.2391 dosis 50 mg/ kg bb -.19500 .79312 1.000 -2.7641 2.3741 dosis 300 mg/ kg bb -1.09100 .79312 .861 -3.6601 1.4781 dosis 1000 mg/ kg bb -.23500 .79312 1.000 -2.8041 2.3341 dosis 2000 mg/ kg bb -1.07700 .79312 .869 -3.6461 1.4921 dosis 4000 mg/ kg bb -1.63400 .79312 .460 -4.2031 .9351 dosis 8000 mg/ kg bb -1.74500 .79312 .378 -4.3141 .8241

dosis 5 mg/ kg bb

kontrol .33000 .79312 1.000 -2.2391 2.8991 dosis 50 mg/ kg bb .13500 .79312 1.000 -2.4341 2.7041 dosis 300 mg/ kg bb -.76100 .79312 .977 -3.3301 1.8081 dosis 1000 mg/ kg bb .09500 .79312 1.000 -2.4741 2.6641 dosis 2000 mg/ kg bb -.74700 .79312 .979 -3.3161 1.8221 dosis 4000 mg/ kg bb -1.30400 .79312 .721 -3.8731 1.2651 dosis 8000 mg/ kg bb -1.41500 .79312 .635 -3.9841 1.1541

dosis 50 mg/ kg bb

kontrol .19500 .79312 1.000 -2.3741 2.7641 dosis 5 mg/ kg bb -.13500 .79312 1.000 -2.7041 2.4341 dosis 300 mg/ kg bb -.89600 .79312 .945 -3.4651 1.6731 dosis 1000 mg/ kg bb -.04000 .79312 1.000 -2.6091 2.5291 dosis 2000 mg/ kg bb -.88200 .79312 .949 -3.4511 1.6871 dosis 4000 mg/ kg bb -1.43900 .79312 .615 -4.0081 1.1301 dosis 8000 mg/ kg bb -1.55000 .79312 .526 -4.1191 1.0191 dosis 300

mg/ kg bb

kontrol 1.09100 .79312 .861 -1.4781 3.6601 dosis 5 mg/ kg bb .76100 .79312 .977 -1.8081 3.3301 dosis 50 mg/ kg bb .89600 .79312 .945 -1.6731 3.4651 dosis 1000 mg/ kg bb .85600 .79312 .957 -1.7131 3.4251 dosis 2000 mg/ kg bb .01400 .79312 1.000 -2.5551 2.5831 dosis 4000 mg/ kg bb -.54300 .79312 .997 -3.1121 2.0261

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound dosis 8000 mg/ kg bb -.65400 .79312 .990 -3.2231 1.9151

dosis 1000 mg/ kg bb

kontrol .23500 .79312 1.000 -2.3341 2.8041 dosis 5 mg/ kg bb -.09500 .79312 1.000 -2.6641 2.4741 dosis 50 mg/ kg bb .04000 .79312 1.000 -2.5291 2.6091 dosis 300 mg/ kg bb -.85600 .79312 .957 -3.4251 1.7131 dosis 2000 mg/ kg bb -.84200 .79312 .960 -3.4111 1.7271 dosis 4000 mg/ kg bb -1.39900 .79312 .647 -3.9681 1.1701 dosis 8000 mg/ kg bb -1.51000 .79312 .558 -4.0791 1.0591

dosis 2000 mg/ kg bb

kontrol 1.07700 .79312 .869 -1.4921 3.6461 dosis 5 mg/ kg bb .74700 .79312 .979 -1.8221 3.3161 dosis 50 mg/ kg bb .88200 .79312 .949 -1.6871 3.4511 dosis 300 mg/ kg bb -.01400 .79312 1.000 -2.5831 2.5551 dosis 1000 mg/ kg bb .84200 .79312 .960 -1.7271 3.4111 dosis 4000 mg/ kg bb -.55700 .79312 .996 -3.1261 2.0121 dosis 8000 mg/ kg bb -.66800 .79312 .989 -3.2371 1.9011

dosis 4000 mg/ kg bb

kontrol 1.63400 .79312 .460 -.9351 4.2031 dosis 5 mg/ kg bb 1.30400 .79312 .721 -1.2651 3.8731 dosis 50 mg/ kg BB 1.43900 .79312 .615 -1.1301 4.0081 dosis 300 mg/ kg BB .54300 .79312 .997 -2.0261 3.1121 dosis 1000 mg/ kg bb 1.39900 .79312 .647 -1.1701 3.9681 dosis 2000 mg/ kg bb .55700 .79312 .996 -2.0121 3.1261 dosis 8000 mg/ kg bb -.11100 .79312 1.000 -2.6801 2.4581

dosis 8000 mg/ kg bb

Kontrol 1.74500 .79312 .378 -.8241 4.3141 dosis 5 mg/ kg bb 1.41500 .79312 .635 -1.1541 3.9841 dosis 50 mg/ kg bb 1.55000 .79312 .526 -1.0191 4.1191 dosis 300 mg/ kg bb .65400 .79312 .990 -1.9151 3.2231 dosis 1000 mg/ kg bb 1.51000 .79312 .558 -1.0591 4.0791 dosis 2000 mg/ kg bb .66800 .79312 .989 -1.9011 3.2371 dosis 4000 mg/ kg bb .11100 .79312 1.000 -2.4581 2.6801

Lampiran 10. (Lanjutan) c. Berat badan minggu 2

Descriptives

N Mean Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

Kontrol 5 29.9450 1.05414 .47143 .47143 28.6361 31.2539 28.98 5 mg/ kg bb 5 30.9500 1.19435 .53413 .53413 29.4670 32.4330 29.57 50 mg/ kg bb 5 30.5600 .94260 .42154 .42154 29.3896 31.7304 29.58 300 mg/ kg bb 5 32.0220 1.29405 .57872 .57872 30.4152 33.6288 30.13 1000 mg/ kg bb 5 31.5760 1.12055 .50112 .50112 30.1847 32.9673 29.84 2000 mg/ kg bb 5 31.5610 1.19153 .53287 .53287 30.0815 33.0405 30.15 4000 mg/ kg bb 5 32.8300 1.10909 .49600 .49600 31.4529 34.2071 31.33 8000 mg/ kg bb 5 32.4900 .62230 .27830 .27830 31.7173 33.2627 31.68 Total 40 31.4918 1.34686 .21296 .21296 31.0610 31.9225 28.98

Tukey

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound kontrol

dosis 5 mg/ kg bb -1.00500 .68533 .819 -3.2250 1.2150 dosis 50 mg/ kg bb -.61500 .68533 .984 -2.8350 1.6050 dosis 300 mg/ kg bb -2.07700 .68533 .080 -4.2970 .1430 dosis 1000 mg/ kg bb -1.63100 .68533 .285 -3.8510 .5890 dosis 2000 mg/ kg bb -1.61600 .68533 .295 -3.8360 .6040 dosis 4000 mg/ kg bb -2.88500 .68533 .360 -5.1050 -.6650 dosis 8000 mg/ kg bb -2.54500 .68533 .320 -4.7650 -.3250

dosis 5 mg/ kg bb

kontrol 1.00500 .68533 .819 -1.2150 3.2250 dosis 50 mg/ kg bb .39000 .68533 .999 -1.8300 2.6100 dosis 300 mg/ kg bb -1.07200 .68533 .767 -3.2920 1.1480 dosis 1000 mg/ kg bb -.62600 .68533 .983 -2.8460 1.5940 dosis 2000 mg/ kg bb -.61100 .68533 .985 -2.8310 1.6090 dosis 4000 mg/ kg bb -1.88000 .68533 .146 -4.1000 .3400 dosis 8000 mg/ kg bb -1.54000 .68533 .352 -3.7600 .6800

dosis 50 mg/ kg bb

kontrol .61500 .68533 .984 -1.6050 2.8350 dosis 5 mg/ kg bb -.39000 .68533 .999 -2.6100 1.8300 dosis 300 mg/ kg bb -1.46200 .68533 .417 -3.6820 .7580 dosis 1000 mg/ kg bb -1.01600 .68533 .811 -3.2360 1.2040 dosis 2000 mg/ kg bb -1.00100 .68533 .822 -3.2210 1.2190 dosis 4000 mg/ kg bb -2.27000* _{.68533 .042 -4.4900 -.0500}

dosis 8000 mg/ kg bb -1.93000 .68533 .126 -4.1500 .2900 dosis 300

mg/ kg bb

kontrol 2.07700 .68533 .080 -.1430 4.2970 dosis 5 mg/ kg bb 1.07200 .68533 .767 -1.1480 3.2920 dosis 50 mg/ kg bb 1.46200 .68533 .417 -.7580 3.6820 dosis 1000 mg/ kg bb .44600 .68533 .998 -1.7740 2.6660 dosis 2000 mg/ kg bb .46100 .68533 .997 -1.7590 2.6810 dosis 4000 mg/ kg bb -.80800 .68533 .932 -3.0280 1.4120

Test of Homogeneity of Variances Levene

Statistic df1 df2 Sig.

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound dosis 8000 mg/ kg bb -.46800 .68533 .997 -2.6880 1.7520

dosis 1000 mg/ kg bb

kontrol 1.63100 .68533 .285 -.5890 3.8510 dosis 5 mg/ kg bb .62600 .68533 .983 -1.5940 2.8460 dosis 50 mg/ kg bb 1.01600 .68533 .811 -1.2040 3.2360 dosis 300 mg/ kg bb -.44600 .68533 .998 -2.6660 1.7740 dosis 2000 mg/ kg bb .01500 .68533 1.000 -2.2050 2.2350 dosis 4000 mg/ kg bb -1.25400 .68533 .606 -3.4740 .9660 dosis 8000 mg/ kg bb -.91400 .68533 .879 -3.1340 1.3060

dosis 2000 mg/ kg bb

kontrol 1.61600 .68533 .295 -.6040 3.8360 dosis 5 mg/ kg bb .61100 .68533 .985 -1.6090 2.8310 dosis 50 mg/ kg bb 1.00100 .68533 .822 -1.2190 3.2210 dosis 300 mg/ kg bb -.46100 .68533 .997 -2.6810 1.7590 dosis 1000 mg/ kg bb -.01500 .68533 1.000 -2.2350 2.2050 dosis 4000 mg/ kg bb -1.26900 .68533 .592 -3.4890 .9510 dosis 8000 mg/ kg bb -.92900 .68533 .870 -3.1490 1.2910

dosis 4000 mg/ kg bb

kontrol -1.88500 .68533 .360 .6650 5.1050 dosis 5 mg/ kg bb 1.88000 .68533 .146 -.3400 4.1000 dosis 50 mg/ kg BB -1.27000 .68533 .420 .0500 4.4900 dosis 300 mg/ kg BB .80800 .68533 .932 -1.4120 3.0280 dosis 1000 mg/ kg bb 1.25400 .68533 .606 -.9660 3.4740 dosis 2000 mg/ kg bb 1.26900 .68533 .592 -.9510 3.4890 dosis 8000 mg/ kg bb .34000 .68533 1.000 -1.8800 2.5600

dosis 8000 mg/ kg bb

Kontrol -1.54500 .68533 .320 .3250 4.7650 dosis 5 mg/ kg bb 1.54000 .68533 .352 -.6800 3.7600 dosis 50 mg/ kg bb 1.93000 .68533 .126 -.2900 4.1500 dosis 300 mg/ kg bb .46800 .68533 .997 -1.7520 2.6880 dosis 1000 mg/ kg bb .91400 .68533 .879 -1.3060 3.1340 dosis 2000 mg/ kg bb .92900 .68533 .870 -1.2910 3.1490 dosis 4000 mg/ kg bb -.34000 .68533 1.000 -2.5600 1.8800

Lampiran 11. Hasil analisis data SPSS konsumsi makanan mencit a. Berat Makanan minggu I

Descriptives

N Mean Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

Kontrol 7 3.5900 .12055 .04557 3.4785 3.7015 3.46 7 5 mg/ kg bb 7 3.6857 .22875 .08646 3.4742 3.8973 3.41 7 50 mg/ kg bb 7 3.7057 .16390 .06195 3.5541 3.8573 3.53 7 300 mg/ kg bb 7 3.7671 .41548 .15704 3.3829 4.1514 3.16 7 1000 mg/ kg bb 7 3.8486 .52863 .19980 3.3597 4.3375 3.28 7 2000 mg/ kg bb 7 3.8286 .11127 .04206 3.7257 3.9315 3.70 7 4000 mg/ kg bb 7 3.9857 .18274 .06907 3.8167 4.1547 3.70 7 8000 mg/ kg bb 7 4.0414 .20828 .07872 3.8488 4.2341 3.79 7 Total 56 3.8066 .29997 .04008 3.7263 3.8869 3.16 56

Tukey

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound kontrol

dosis 5 mg/ kg bb -.09571 .15059 .998 -.5728 .3814 dosis 50 mg/ kg bb -.11571 .15059 .994 -.5928 .3614 dosis 300 mg/ kg bb -.17714 .15059 .935 -.6542 .3000 dosis 1000 mg/ kg bb -.25857 .15059 .676 -.7357 .2185 dosis 2000 mg/ kg bb -.23857 .15059 .757 -.7157 .2385 dosis 4000 mg/ kg bb -.39571 .15059 .171 -.8728 .0814 dosis 8000 mg/ kg bb -.45143 .15059 .076 -.9285 .0257

dosis 5 mg/ kg bb

Kontrol .09571 .15059 .998 -.3814 .5728 dosis 50 mg/ kg bb -.02000 .15059 1.000 -.4971 .4571 dosis 300 mg/ kg bb -.08143 .15059 .999 -.5585 .3957 dosis 1000 mg/ kg bb -.16286 .15059 .958 -.6400 .3142 dosis 2000 mg/ kg bb -.14286 .15059 .979 -.6200 .3342 dosis 4000 mg/ kg bb -.30000 .15059 .498 -.7771 .1771 dosis 8000 mg/ kg bb -.35571 .15059 .283 -.8328 .1214

dosis 50 mg/ kg bb

Kontrol .11571 .15059 .994 -.3614 .5928 dosis 5 mg/ kg bb .02000 .15059 1.000 -.4571 .4971 dosis 300 mg/ kg bb -.06143 .15059 1.000 -.5385 .4157 dosis 1000 mg/ kg bb -.14286 .15059 .979 -.6200 .3342 dosis 2000 mg/ kg bb -.12286 .15059 .991 -.6000 .3542 dosis 4000 mg/ kg bb -.28000 .15059 .584 -.7571 .1971 dosis 8000 mg/ kg bb -.33571 .15059 .353 -.8128 .1414 dosis 300

mg/ kg bb

Kontrol .17714 .15059 .935 -.3000 .6542 dosis 5 mg/ kg bb .08143 .15059 .999 -.3957 .5585

ANOVA

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between

Groups 1.139 7 .163 2.050 .068

Within Groups 3.810 48 .079

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound dosis 50 mg/ kg bb .06143 .15059 1.000 -.4157 .5385 dosis 1000 mg/ kg bb -.08143 .15059 .999 -.5585 .3957 dosis 2000 mg/ kg bb -.06143 .15059 1.000 -.5385 .4157 dosis 4000 mg/ kg bb -.21857 .15059 .828 -.6957 .2585 dosis 8000 mg/ kg bb -.27429 .15059 .609 -.7514 .2028

dosis 1000 mg/ kg bb

kontrol .25857 .15059 .676 -.2185 .7357 dosis 5 mg/ kg bb .16286 .15059 .958 -.3142 .6400 dosis 50 mg/ kg bb .14286 .15059 .979 -.3342 .6200 dosis 300 mg/ kg bb .08143 .15059 .999 -.3957 .5585 dosis 2000 mg/ kg bb .02000 .15059 1.000 -.4571 .4971 dosis 4000 mg/ kg bb -.13714 .15059 .984 -.6142 .3400 dosis 8000 mg/ kg bb -.19286 .15059 .902 -.6700 .2842

dosis 2000 mg/ kg bb

kontrol .23857 .15059 .757 -.2385 .7157 dosis 5 mg/ kg bb .14286 .15059 .979 -.3342 .6200 dosis 50 mg/ kg bb .12286 .15059 .991 -.3542 .6000 dosis 300 mg/ kg bb .06143 .15059 1.000 -.4157 .5385 dosis 1000 mg/ kg bb -.02000 .15059 1.000 -.4971 .4571 dosis 4000 mg/ kg bb -.15714 .15059 .965 -.6342 .3200 dosis 8000 mg/ kg bb -.21286 .15059 .847 -.6900 .2642

dosis 4000 mg/ kg bb

kontrol .39571 .15059 .171 -.0814 .8728 dosis 5 mg/ kg bb .30000 .15059 .498 -.1771 .7771 dosis 50 mg/ kg BB .28000 .15059 .584 -.1971 .7571 dosis 300 mg/ kg BB .21857 .15059 .828 -.2585 .6957 dosis 1000 mg/ kg bb .13714 .15059 .984 -.3400 .6142 dosis 2000 mg/ kg bb .15714 .15059 .965 -.3200 .6342 dosis 8000 mg/ kg bb -.05571 .15059 1.000 -.5328 .4214

dosis 8000 mg/ kg bb

Kontrol .45143 .15059 .076 -.0257 .9285 dosis 5 mg/ kg bb .35571 .15059 .283 -.1214 .8328 dosis 50 mg/ kg bb .33571 .15059 .353 -.1414 .8128 dosis 300 mg/ kg bb .27429 .15059 .609 -.2028 .7514 dosis 1000 mg/ kg bb .19286 .15059 .902 -.2842 .6700 dosis 2000 mg/ kg bb .21286 .15059 .847 -.2642 .6900 dosis 4000 mg/ kg bb .05571 .15059 1.000 -.4214 .5328

Lampiran 11. (Lanjutan) b. Berat makanan minggu II

Descriptives

N Mean Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

Kontrol 7 3.6986 .68943 .26058 3.0610 4.3362 3.08 4.66 5 mg/ kg bb 7 3.7529 .81418 .30773 2.9999 4.5058 3.06 4.89 50 mg/ kg bb 7 3.8900 .52767 .19944 3.4020 4.3780 3.27 4.50 300 mg/ kg bb 7 3.9129 .52175 .19720 3.4303 4.3954 3.31 4.68 1000 mg/ kg bb 7 4.0200 .52249 .19748 3.5368 4.5032 3.23 4.60 2000 mg/ kg bb 7 4.1300 .10456 .03952 4.0333 4.2267 3.93 4.24 4000 mg/ kg bb 7 4.2129 .11116 .04202 4.1100 4.3157 3.99 4.32 8000 mg/ kg bb 7 4.3357 .07569 .02861 4.2657 4.4057 4.23 4.45 Total 56 3.9941 .51118 .06831 3.8572 4.1310 3.06 4.89

Tukey

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound kontrol

dosis 5 mg/ kg bb -1.00500 .68533 .819 -3.2250 1.2150 dosis 50 mg/ kg bb -.61500 .68533 .984 -2.8350 1.6050 dosis 300 mg/ kg bb -2.07700 .68533 .080 -4.2970 .1430 dosis 1000 mg/ kg bb -1.63100 .68533 .285 -3.8510 .5890 dosis 2000 mg/ kg bb -1.61600 .68533 .295 -3.8360 .6040 dosis 4000 mg/ kg bb -2.88500 .68533 .360 -5.1050 -.6650 dosis 8000 mg/ kg bb -2.54500 .68533 .320 -4.7650 -.3250

dosis 5 mg/ kg bb

Kontrol 1.00500 .68533 .819 -1.2150 3.2250 dosis 50 mg/ kg bb .39000 .68533 .999 -1.8300 2.6100 dosis 300 mg/ kg bb -1.07200 .68533 .767 -3.2920 1.1480 dosis 1000 mg/ kg bb -.62600 .68533 .983 -2.8460 1.5940 dosis 2000 mg/ kg bb -.61100 .68533 .985 -2.8310 1.6090 dosis 4000 mg/ kg bb -1.88000 .68533 .146 -4.1000 .3400 dosis 8000 mg/ kg bb -1.54000 .68533 .352 -3.7600 .6800

dosis 50 mg/ kg bb

Kontrol .61500 .68533 .984 -1.6050 2.8350 dosis 5 mg/ kg bb -.39000 .68533 .999 -2.6100 1.8300 dosis 300 mg/ kg bb -1.46200 .68533 .417 -3.6820 .7580 dosis 1000 mg/ kg bb -1.01600 .68533 .811 -3.2360 1.2040 dosis 2000 mg/ kg bb -1.00100 .68533 .822 -3.2210 1.2190 dosis 4000 mg/ kg bb -1.27000 .68533 .420 -4.4900 -.0500 dosis 8000 mg/ kg bb -1.93000 .68533 .126 -4.1500 .2900 dosis 300

mg/ kg bb

Kontrol 2.07700 .68533 .080 -.1430 4.2970 dosis 5 mg/ kg bb 1.07200 .68533 .767 -1.1480 3.2920

ANOVA

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between

Groups 2.427 7 .347 1.393 .230

Within Groups 11.945 48 .249

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound dosis 50 mg/ kg bb 1.46200 .68533 .417 -.7580 3.6820 dosis 1000 mg/ kg bb .44600 .68533 .998 -1.7740 2.6660 dosis 2000 mg/ kg bb .46100 .68533 .997 -1.7590 2.6810 dosis 4000 mg/ kg bb -.80800 .68533 .932 -3.0280 1.4120 dosis 8000 mg/ kg bb -.46800 .68533 .997 -2.6880 1.7520

dosis 1000 mg/ kg bb

kontrol 1.63100 .68533 .285 -.5890 3.8510 dosis 5 mg/ kg bb .62600 .68533 .983 -1.5940 2.8460 dosis 50 mg/ kg bb 1.01600 .68533 .811 -1.2040 3.2360 dosis 300 mg/ kg bb -.44600 .68533 .998 -2.6660 1.7740 dosis 2000 mg/ kg bb .01500 .68533 1.000 -2.2050 2.2350 dosis 4000 mg/ kg bb -1.25400 .68533 .606 -3.4740 .9660 dosis 8000 mg/ kg bb -.91400 .68533 .879 -3.1340 1.3060

dosis 2000 mg/ kg bb

kontrol 1.61600 .68533 .295 -.6040 3.8360 dosis 5 mg/ kg bb .61100 .68533 .985 -1.6090 2.8310 dosis 50 mg/ kg bb 1.00100 .68533 .822 -1.2190 3.2210 dosis 300 mg/ kg bb -.46100 .68533 .997 -2.6810 1.7590 dosis 1000 mg/ kg bb -.01500 .68533 1.000 -2.2350 2.2050 dosis 4000 mg/ kg bb -1.26900 .68533 .592 -3.4890 .9510 dosis 8000 mg/ kg bb -.92900 .68533 .870 -3.1490 1.2910

dosis 4000 mg/ kg bb

kontrol 2.88500 .68533 .360 .6650 5.1050 dosis 5 mg/ kg bb 1.88000 .68533 .146 -.3400 4.1000 dosis 50 mg/ kg BB 2.27000 .68533 .420 .0500 4.4900 dosis 300 mg/ kg BB .80800 .68533 .932 -1.4120 3.0280 dosis 1000 mg/ kg bb 1.25400 .68533 .606 -.9660 3.4740 dosis 2000 mg/ kg bb 1.26900 .68533 .592 -.9510 3.4890 dosis 8000 mg/ kg bb .34000 .68533 1.000 -1.8800 2.5600

dosis 8000 mg/ kg bb

Kontrol 2.54500 .68533 .610 .3250 4.7650 dosis 5 mg/ kg bb 1.54000 .68533 .352 -.6800 3.7600 dosis 50 mg/ kg bb 1.93000 .68533 .126 -.2900 4.1500 dosis 300 mg/ kg bb .46800 .68533 .997 -1.7520 2.6880 dosis 1000 mg/ kg bb .91400 .68533 .879 -1.3060 3.1340 dosis 2000 mg/ kg bb .92900 .68533 .870 -1.2910 3.1490 dosis 4000 mg/ kg bb -.34000 .68533 1.000 -2.5600 1.8800

Lampiran 12. Hasil analisis data SPSS konsumsi minuman mencit a. Volume minuman minggu I

Descriptives

N Mean Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

Kontrol 7 4.5043 .74355 .28103 3.8166 5.1920 3.03 5.20 5 mg/ kg bb 7 4.5400 .90011 .34021 3.7075 5.3725 3.63 5.58 50 mg/ kg bb 7 4.7600 .37488 .14169 4.4133 5.1067 4.40 5.27 300 mg/ kg bb 7 4.9000 .37709 .14253 4.5512 5.2488 4.45 5.32 1000 mg/ kg bb 7 4.9329 .37053 .14005 4.5902 5.2755 4.32 5.33 2000 mg/ kg bb 7 5.0300 .59175 .22366 4.4827 5.5773 4.09 5.61 4000 mg/ kg bb 7 5.0900 .28042 .10599 4.8307 5.3493 4.73 5.41 8000 mg/ kg bb 7 5.1100 .37996 .14361 4.7586 5.4614 4.51 5.62 Total 56 4.8584 .55380 .07400 4.7101 5.0067 3.03 5.62

Tukey

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound kontrol

dosis 5 mg/ kg bb -.03571 .29009 1.000 -.9548 .8834 dosis 50 mg/ kg bb -.25571 .29009 .986 -1.1748 .6634 dosis 300 mg/ kg bb -.39571 .29009 .869 -1.3148 .5234 dosis 1000 mg/ kg bb -.42857 .29009 .815 -1.3477 .4905 dosis 2000 mg/ kg bb -.52571 .29009 .615 -1.4448 .3934 dosis 4000 mg/ kg bb -.58571 .29009 .480 -1.5048 .3334 dosis 8000 mg/ kg bb -.60571 .29009 .437 -1.5248 .3134

dosis 5 mg/ kg bb

Kontrol .03571 .29009 1.000 -.8834 .9548 dosis 50 mg/ kg bb -.22000 .29009 .994 -1.1391 .6991 dosis 300 mg/ kg bb -.36000 .29009 .915 -1.2791 .5591 dosis 1000 mg/ kg bb -.39286 .29009 .873 -1.3119 .5262 dosis 2000 mg/ kg bb -.49000 .29009 .694 -1.4091 .4291 dosis 4000 mg/ kg bb -.55000 .29009 .560 -1.4691 .3691 dosis 8000 mg/ kg bb -.57000 .29009 .515 -1.4891 .3491

dosis 50 mg/ kg bb

kontrol .25571 .29009 .986 -.6634 1.1748 dosis 5 mg/ kg bb .22000 .29009 .994 -.6991 1.1391 dosis 300 mg/ kg bb -.14000 .29009 1.000 -1.0591 .7791 dosis 1000 mg/ kg bb -.17286 .29009 .999 -1.0919 .7462 dosis 2000 mg/ kg bb -.27000 .29009 .981 -1.1891 .6491 dosis 4000 mg/ kg bb -.33000 .29009 .945 -1.2491 .5891 dosis 8000 mg/ kg bb -.35000 .29009 .926 -1.2691 .5691 dosis 300

mg/ kg bb

kontrol .39571 .29009 .869 -.5234 1.3148 dosis 5 mg/ kg bb .36000 .29009 .915 -.5591 1.2791

ANOVA

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between

Groups 2.731 7 .390 1.325 .260

Within Groups 14.138 48 .295

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound dosis 50 mg/ kg bb .14000 .29009 1.000 -.7791 1.0591 dosis 1000 mg/ kg bb -.03286 .29009 1.000 -.9519 .8862 dosis 2000 mg/ kg bb -.13000 .29009 1.000 -1.0491 .7891 dosis 4000 mg/ kg bb -.19000 .29009 .998 -1.1091 .7291 dosis 8000 mg/ kg bb -.21000 .29009 .996 -1.1291 .7091

dosis 1000 mg/ kg bb

kontrol .42857 .29009 .815 -.4905 1.3477 dosis 5 mg/ kg bb .39286 .29009 .873 -.5262 1.3119 dosis 50 mg/ kg bb .17286 .29009 .999 -.7462 1.0919 dosis 300 mg/ kg bb .03286 .29009 1.000 -.8862 .9519 dosis 2000 mg/ kg bb -.09714 .29009 1.000 -1.0162 .8219 dosis 4000 mg/ kg bb -.15714 .29009 .999 -1.0762 .7619 dosis 8000 mg/ kg bb -.17714 .29009 .999 -1.0962 .7419

dosis 2000 mg/ kg bb

kontrol .52571 .29009 .615 -.3934 1.4448 dosis 5 mg/ kg bb .49000 .29009 .694 -.4291 1.4091 dosis 50 mg/ kg bb .27000 .29009 .981 -.6491 1.1891 dosis 300 mg/ kg bb .13000 .29009 1.000 -.7891 1.0491 dosis 1000 mg/ kg bb .09714 .29009 1.000 -.8219 1.0162 dosis 4000 mg/ kg bb -.06000 .29009 1.000 -.9791 .8591 dosis 8000 mg/ kg bb -.08000 .29009 1.000 -.9991 .8391

dosis 4000 mg/ kg bb

kontrol .58571 .29009 .480 -.3334 1.5048 dosis 5 mg/ kg bb .55000 .29009 .560 -.3691 1.4691 dosis 50 mg/ kg BB .33000 .29009 .945 -.5891 1.2491 dosis 300 mg/ kg BB .19000 .29009 .998 -.7291 1.1091 dosis 1000 mg/ kg bb .15714 .29009 .999 -.7619 1.0762 dosis 2000 mg/ kg bb .06000 .29009 1.000 -.8591 .9791 dosis 8000 mg/ kg bb -.02000 .29009 1.000 -.9391 .8991

dosis 8000 mg/ kg bb

Kontrol .60571 .29009 .437 -.3134 1.5248 dosis 5 mg/ kg bb .57000 .29009 .515 -.3491 1.4891 dosis 50 mg/ kg bb .35000 .29009 .926 -.5691 1.2691 dosis 300 mg/ kg bb .21000 .29009 .996 -.7091 1.1291 dosis 1000 mg/ kg bb .17714 .29009 .999 -.7419 1.0962 dosis 2000 mg/ kg bb .08000 .29009 1.000 -.8391 .9991 dosis 4000 mg/ kg bb .02000 .29009 1.000 -.8991 .9391

Lampiran 12. (Lanjutan)

b. Volume minuman minggu II

Descriptives

N Mean Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

Kontrol _{7 4.8986 .42128 .15923 4.5089 7 4.8986 .42128} 5 mg/ kg bb _{7 5.0586 .40523 .15316 4.6838 7 5.0586 .40523} 50 mg/ kg bb _{7 5.1000 .39226 .14826 4.7372 7 5.1000 .39226} 300 mg/ kg bb _{7 5.1343 .36837 .13923 4.7936 7 5.1343 .36837} 1000 mg/ kg bb _{7 5.1657 .23387 .08839 4.9494 7 5.1657 .23387} 2000 mg/ kg bb _{7 5.2357 .28053 .10603 4.9763 7 5.2357 .28053} 4000 mg/ kg bb _{7 5.3643 .13176 .04980 5.2424 7 5.3643 .13176} 8000 mg/ kg bb _{7 5.3586 .16708 .06315 5.2041 7 5.3586 .16708} Total _{56 5.1645 .33159 .04431 5.0757 56 5.1645 .33159}

Tukey

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound kontrol

dosis 5 mg/ kg bb -.16000 .17008 .980 -.6988 -.16000 dosis 50 mg/ kg bb -.20143 .17008 .933 -.7403 -.20143 dosis 300 mg/ kg bb -.23571 .17008 .859 -.7746 -.23571 dosis 1000 mg/ kg bb -.26714 .17008 .765 -.8060 -.26714 dosis 2000 mg/ kg bb -.33714 .17008 .504 -.8760 -.33714 dosis 4000 mg/ kg bb -.46571 .17008 .136 -1.0046 -.46571 dosis 8000 mg/ kg bb -.46000 .17008 .146 -.9988 -.46000

dosis 5 mg/ kg bb

kontrol .16000 .17008 .980 -.3788 .16000 dosis 50 mg/ kg bb -.04143 .17008 1.000 -.5803 -.04143 dosis 300 mg/ kg bb -.07571 .17008 1.000 -.6146 -.07571 dosis 1000 mg/ kg bb -.10714 .17008 .998 -.6460 -.10714 dosis 2000 mg/ kg bb -.17714 .17008 .965 -.7160 -.17714 dosis 4000 mg/ kg bb -.30571 .17008 .625 -.8446 -.30571 dosis 8000 mg/ kg bb -.30000 .17008 .646 -.8388 -.30000

dosis 50 mg/ kg bb

kontrol .20143 .17008 .933 -.3374 .20143 dosis 5 mg/ kg bb .04143 .17008 1.000 -.4974 .04143 dosis 300 mg/ kg bb -.03429 .17008 1.000 -.5731 -.03429 dosis 1000 mg/ kg bb -.06571 .17008 1.000 -.6046 -.06571 dosis 2000 mg/ kg bb -.13571 .17008 .992 -.6746 -.13571

ANOVA

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between

Groups 1.188 7 .170 1.676 .138

Within Groups 4.860 48 .101

(I) perlakuan (J) perlakuan

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound dosis 4000 mg/ kg bb -.26429 .17008 .774 -.8031 -.26429 dosis 8000 mg/ kg bb -.25857 .17008 .793 -.7974 -.25857

dosis 300 mg/ kg bb

kontrol .23571 .17008 .859 -.3031 .23571 dosis 5 mg/ kg bb .07571 .17008 1.000 -.4631 .07571 dosis 50 mg/ kg bb .03429 .17008 1.000 -.5046 .03429 dosis 1000 mg/ kg bb -.03143 .17008 1.000 -.5703 -.03143 dosis 2000 mg/ kg bb -.10143 .17008 .999 -.6403 -.10143 dosis 4000 mg/ kg bb -.23000 .17008 .874 -.7688 -.23000 dosis 8000 mg/ kg bb -.22429 .17008 .887 -.7631 -.22429

dosis 1000 mg/ kg bb

kontrol .26714 .17008 .765 -.2717 .26714 dosis 5 mg/ kg bb .10714 .17008 .998 -.4317 .10714 dosis 50 mg/ kg bb .06571 .17008 1.000 -.4731 .06571 dosis 300 mg/ kg bb .03143 .17008 1.000 -.5074 .03143 dosis 2000 mg/ kg bb -.07000 .17008 1.000 -.6088 -.07000 dosis 4000 mg/ kg bb -.19857 .17008 .937 -.7374 -.19857 dosis 8000 mg/ kg bb -.19286 .17008 .946 -.7317 -.19286

dosis 2000 mg/ kg bb

kontrol .33714 .17008 .504 -.2017 .33714 dosis 5 mg/ kg bb .17714 .17008 .965 -.3617 .17714 dosis 50 mg/ kg bb .13571 .17008 .992 -.4031 .13571 dosis 300 mg/ kg bb .10143 .17008 .999 -.4374 .10143 dosis 1000 mg/ kg bb .07000 .17008 1.000 -.4688 .07000 dosis 4000 mg/ kg bb -.12857 .17008 .995 -.6674 -.12857 dosis 8000 mg/ kg bb -.12286 .17008 .996 -.6617 -.12286

dosis 4000 mg/ kg bb

kontrol .46571 .17008 .136 -.0731 .46571 dosis 5 mg/ kg bb .30571 .17008 .625 -.2331 .30571 dosis 50 mg/ kg BB .26429 .17008 .774 -.2746 .26429 dosis 300 mg/ kg BB .23000 .17008 .874 -.3088 .23000 dosis 1000 mg/ kg bb .19857 .17008 .937 -.3403 .19857 dosis 2000 mg/ kg bb .12857 .17008 .995 -.4103 .12857 dosis 8000 mg/ kg bb .00571 .17008 1.000 -.5331 .00571

dosis 8000 mg/ kg bb

Kontrol .46000 .17008 .146 -.0788 .46000 dosis 5 mg/ kg bb .30000 .17008 .646 -.2388 .30000 dosis 50 mg/ kg bb .25857 .17008 .793 -.2803 .25857 dosis 300 mg/ kg bb .22429 .17008 .887 -.3146 .22429 dosis 1000 mg/ kg bb .19286 .17008 .946 -.3460 .19286 dosis 2000 mg/ kg bb .12286 .17008 .996 -.4160 .12286 dosis 4000 mg/ kg bb -.00571 .17008 1.000 -.5446 -.00571

Lampiran 13. Gambar makropatologi organ hati dan ginjal mencit 1. Organ hati

CMC Na 1% EEBAM 5 mg/kg bb

EEBAM 50 mg/kg bb EEBAM 300 mg/kg bb

EEBAM 1000 mg/kg bb EEBAM 2000 mg/kg bb

2. Organ ginjal

CMC Na 1% EEBAM 5 mg/kg bb

EEBAM 50 mg/kg bb EEBAM 300 mg/kg bb

DAFTAR PUSTAKA

Anggraini, D.R. (2008). Gambaran Makroskopik dan Mikroskopik Hati dan Ginjal Mencit Akibat Pemberian Plumbum Asetat. Tesis. Medan: Sekolah Pascasarjana Universitas Sumatera Utara.

BPOM RI. (2014). Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat Dan Makanan Republik Indonesia Nomor 7 Tahun 2014 Tentang Pedoman Uji Toksisitas Nonklinik Secara In Vivo. Jakarta: Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI. Halaman 3-4, 9, 11-12,28-32.

Chatterjee, S., Goeswami, N., dan Bhatnagar, P. (2012). Estimation of Phenolic Components and in vitro Antioxidant Activity of Fennel (Foeniculum vulgare) and Ajwain (Trachyspermum ammi) seeds. Advances in Bioresearch. 3(2): 109-118.

Cheville, N.F. (1999). Introduction to Veterinary Pathology. Edisi II. Lowa: Low State University Press. Halaman 214.

Covelli, V. (1972). Guide to The Necropsy of The Mouse. Diakses tanggal 26 Desember 2015. http://www.eulep.org/Necropsy-of-the-Mouse.php? file=Chapter-4html.

Dalimartha, setiawan. (1999). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid I. Jakarta: Trubus Agriwidya. Halaman 1-6.

Depkes RI. (1989). Materia Medika Indonesia. Jilid V. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 194-197.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 333-337.

Depkes RI. (2001). Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid I. Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. Halaman 143-144.

Dewoto, H.R. (2007). Pengembangan Obat Tradisional Indonesia Menjadi Fitofarmaka. Jurnal Majalah Kedokteran Indonesia. 57(7): 208.

Ditjen POM RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman. 7, 33, 744, 748.

Ditjen POM RI. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 10-11, 17.

Ditjen POM RI. (2008). Farmakope Herbal Indonesia. Jilid I. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 2.

Elya, B., Amin, J., dan Emiyanah. (2010). Toksisitas Akut Daun Justicia gendarussa Burm. Jurnal Makara Sains. 14(2). Halaman 129-134.

Journal of Pharmaceutical Science. 55(3): 262-263.

Ganiswara, S.G. (1995). Farmakologi Dan Terapi. Edisi IV. Jakarta: Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Halaman 763-764.

Gupta, D., dan Bhardwaj, S. (2012). Study of Acute, Subacute and Chronic Toxicity Test. International Journal of Advanced Research in Pharmaceutical and Bio Sciences (IJARPB). 1(2): 103-129.

Guyton, A.C., dan Hall, J.E. (2008). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi XXII. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.

Hage, L.S. (1982). The Anatomy Workbook. Philadelphia: Printed Lipincott Company. Halaman 83.

Husada, Y. (1996). Fisiologi dan Pemeriksaan Biokimiawi Hati dalam:

Soeparman. Ilmu Penyakit Dalam Jilid 1. Edisi III. Jakarta: Balai Penerbit FKUI. Halaman 244- 37.

Iwuanyanwu K., Amadi, U., Charles, I., dan Ayalogu, E. (2012). Evaluation of Acute and Subchronic Oral Toxicity Studi of Baker Cleanser Bitters A Polyherbal Drug On Experimental Rat. EXCLI Journal 11(1): 632-640. Janwal, N., Kumar, S., dan Rana, A. (2013). Phytochemical and Pharmacological

Review on Foeniculum vulgar. Pharma Science Monitor 4 (3): 324-341. Jenova, R. (2009). Uji Toksisitas Akut yang Diukur dengan Penentuan LD50

Ekstrak Herba Putr I Malu (Mimosa pudicaL.) terhadap Mencit BALB/C.

Skripsi. Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro.

Jones, L.M., Nicholson, H.B., Leslie, E.M., dan Donald. (1997). Veterinary Pharmacology and Therapeutics. Fouth Edition. New Delhi: Oxford and IBH Publishing. Halaman 1223-1232.

Jubb, K.V.F., Kennedy, P.C., dan Peter, C. (1993). Pathology of Domestic Animal. London: Academic Press. Halaman 325-327.

Juhriyyah, S. (2008). Gambaran Histopatologi Organ Hati Dan Ginjal Tikus Pada Intoksikasi Akut Insektisida (Metofluthrin, D-Phenothrin, D-Allethrin) Dengan Dosis Bertingkat. Skripsi. Bogor: Fakultas Kedokteran Hewan

Koeman, J.H. (1987). Pengantar Umum Toksikologi. Terjemahan oleh Yudono R.H. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Halaman 3 - 6, 23 - 34. Kusdarwati, R., Sari, L., dan Mukti, A. (2010). Daya Antibakteri Ekstrak Buah

Adas (Foeniculum vulgare) Terhadap Bakteri Micrococcus luteus Secara In Vitro. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan. 2(1): 31-35.

Lu, F. C. (1995). Toksikologi Dasar: Asas, Organ Sasaran, dan Penilaian Resiko. Edisi II. Jakarta: UIP. Halaman 85-86.

Malole, M.B.M., dan Pramono. C.S.U. (1989). Penggunaan Hewan Percobaan di Laboratorium. Bogor: Institut Pertanian Bogor. Halaman 45.

Nandy, S., dan Datta. (2012). Acute and Subacute Toxicity Studies of Methanolic Leaves Extract of Pterospermum acerifolium (L.) Willd in Rodents. Int. J. of Pharm. And Life Sci 3(3): 1519-1529.

Nassar, I., M., Aboutabl, E., A., Makled, Y., A., dan Osman, A., F. (2010). Secondary Metabolites and Pharmacology of Foeniculum vulgare Mill. Subsp. Piperitum. Rev. Latinoamer. Quim 38(2): 103-112.

Nuris, D. N. (2011) Aneka Manfaat Biji-bijian. Yogyakarta: Penerbit Gava Media. Halaman 3-6.

Oktriana, N.H., dan Nurlela. (2011). Toksisitas Pemberian Berulang Infusa Pegagan (Centella asiatica (L.) Urb) terhadap Tikus Jantan Galur Aprague-Dawley Tinjauan Terhadap Parameter Hematologis. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi ke-2. Halaman 57.

Oulmouden, F., Saile, R., Gnaoui, N., Benomar, H., Lkhider, M., Amrani, S., dan Ghalim, M. (2014). Hypolipidemic and Anti-Atherogenic Effect In An Experimental Model Of Atherosclerosis Induced By Triton WR-1339.

European Journal Of Scientific Research. 3(1): 42-52..

Praptiwi, Wulansari, D., dan Chairul. (2010). Efek Toksisitas Ekstrak Pegagan (Centella asiatica Linn.) pada Organ dan jaringan mencit (Mus musculus).

Majalah Farmasi Indonesia 21 (1). Halaman 45-46.

Price, S.A., dan Wilson L.M. (2006). Patofisiologi: Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit. Edisi VI. Jakarta: ECG. Halaman 867- 875.

Purnomo, B. (2009). Dasar-dasar Urologi. Jakarta: Sagung Seto.

Priyatno. (2009). Toksikologi Mekanisme, Terapi Antidotum, dan Penilaian Resiko. Jakarta: Leskonfi (Lembaga Studi dan Konsultasi Farmakologi). Halaman 9 - 15, 41 - 56, 151 - 167.

Rather, M., Dar, B., Sofi, S., Bhat, B., dan Qurishi, M. (2012). Foeniculum vulgare: A comprehensive review of its traditional use, phytochemistry, pharmacology, and Safety. Arabian Journal of Chemistry.

(Pandanus conoideus Lam.) Secara In Vivo. Bogor: Fakultas Teknologi

Pertanian Institut Pertanian Bogor. Halaman 30-31.

https://core.ac.uk/download/pdf/32348084.pdf.

Robinson, T. (1995). Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi VI Terjemahan Kosasih Padmawinata. Bandung: ITB Press. Halaman 157.

Sihombing, M. (2010). Status Gizi Dan Fungsi Hati Mencit (Galur CBS-Swiss) Dan Tikus Putih (Galur Wistar) Di Laboratorium Hewan Percobaan Puslitbang Biomedis Dan Farmasi. Media Litbang Kesehatan. 20(1):33-40. Singh, G., Maurya, S., Lampasona, M., dan Catalan, C., (2006). Chemical constituents, Antifungal And Antioxidative Potential Of Foeniculum vulgare Volatile Oil And Its acetone Extract. Elsevier. 17: 745-752.

Smith, J., dan Mangkoewidjojo, S. (1988). Pemeliharaan Pembiakan dan Penggunaan Hewan Percobaan Di Daerah Tropis. Jakarta: Universitas Indonesia Press. Halaman 23.

Soemardji, A. A., Endang K., dan Cucu A. (2002). Toksisitas Akut dan Penentuan DL50 Oral Ekstrak Air Daun Gandarusa (Justicia gendarussa Burm. F.)

pada Mencit Swiss Webster. Jurnal Matematika dan Sains. Vol. 7. No.2. Halaman 57-58.

Suharmiati dan Handayani, L. (2005). Cara Benar Meracik Obat Tradisional. Jakarta: Penerbit Agromedia Pustaka. Halaman 1-2.

Sukandar, E.Y. (2011). Trend dan Paradigma Dunia Farmasi, Industri-Klinik Teknologi Kesehatan, Disampaikan Dalam Orasi Ilmiah Dies Natalis ITB.

http://itb.ac.id./focus/focus_file/orasi-ilmiah-dies-45.pdf. Diakses tanggal 05 April 2013.

Suyanti, L. (2008). Gambaran Histopatologi Ginjal Tikus Pada Pemberian Fraksi Asam Amino Non Protein Lantara Nera (Acacia villosa) pada Uji Toksisitas Akut. Skripsi. Bogor: IPB.

Tanira. M., Shah, A., Mohsin, A., Ageel, A., dan Qureshi, S. (1996). Pharmacological and Toxicologica Investigations on Foeniculum vulgare

Dried Fruit Extract in Experimental Animal. Phytotherapy Research 10 (8): 33-36.

Wilson N., Jerry F. H., dan Johnnie R. H. (2001). Short-term, Subchronic and Chronic Toxicology Studies. Dalam:Taylor & Francis, penyunting.

Principles and Methods of Toxicology. Edisi ke-4. Philadelphia: Lippincot Williams and Wilkins. Pages 917-956.

Wirasuta, Gelgel M.A., dan Niruri, R. (2007). Toksikologi Umum (Buku Ajar). Bali: Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana. Halaman 28. World Health Organization. (1992). Quality Control Methods for Medicinal Plant

Material. Switzerland: Geneva. Halaman. 25-28.

Zainul, H. (2010). Penentuan Ketoksikan Akut Phyllanthus niruri. Semarang:

Artikel Ilmiah. Universitas Diponegoro. Halaman 8 - 11.

Zhaoa, N. N, Zhoub, L., Liua, Z. L., Duc, S. S dan Dengd, Z. W. 2012. Evaluation of the toxicity of the essential oils of same common Chinese spices gainst

METODE PENELITIAN

Metode penelitian ini dilakukan secara ekperimental. Penelitian ini meliputi pengambilan dan pengolahan sampel, karakterisasi simplisia dan ekstrak etanol buah adas manis, skrining fitokimia simplisia dan ekstrak etanol buah adas manis, pembuatan ekstrak, pengujian efek toksisitas akut serta analisis data dengan menggunakan metode analysis of variance (ANOVA) dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tukey menggunakan program Statistical Product and Service Solution (SPSS) versi 22.

3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi alat-alat gelas laboratorium, blender (Miyako), desikator, freeze dryer (Edward), rotary evaporator (Buchi), mikroskop (Olimpus), kandang mencit, krus porselin, krus tang, lemari pengering, neraca hewan (presica Geniweigher GW-1500), neraca kasar (Ohaus), neraca listrik (Chyo JP2-600), oral sonde, penangas air (Yenaco), timbangan, dan tanur (Gallenkamp).

3.1.2 Bahan

benzen, besi (III) klorida, bismut (III) nitrat, etanol, isopropanol, kalium iodida, karboksil metil selulosa (CMC), kloralhidrat, kloroform, natrium hidroksida, timbal (II) asetat dan toluena.

3.2 Hewan Percobaan

Hewan percobaan yang akan digunakan adalah mencit putih (Mus musculus) dengan berat badan 25-35 gram, berumur 2-3 bulan sebanyak 40 ekor dibagi dalam 8 kelompok yang masing-masing terdiri 5 ekor mencit. Sebelum pengujian, hewan percobaan diaklimatisasi terlebih dahulu selama 7-14 hari (BPOM, RI., 2014). Hewan percobaan dipuasakan selama 18 jam agar usus yang digunakan dalam keadaan kosong. Hewan uji diberi makanan pelet selama penelitian berlangsung.

3.3 Pengambilan dan Pengolahan Sampel 3.3.1 Pengambilan buah adas manis

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah adas manis (Foeniculum vulgare Mill.) yang dibeli dari Pasar Central Medan. Pengambilan sampel dilakukan secara purposif tanpa membandingkan dengan sampel yang sama dari daerah lain.

3.3.2 Identifikasi buah adas manis

Identifikasi buah adas manis (Foeniculum vulgare Mill.) dilakukan di Pusat Penelitian Biologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Bogor.

3.3.3 Pengolahan buah adas manis

Buah adas manis sebanyak 500g dibersihkan dari pengotor-pengotor tanpa pencucuian. Selanjutnya buah adas manis dikeringkan di lemari pengering sampai

disimpan dalam wadah tertutup rapat.

3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi 3.4.1 Larutan pereaksi Mayer

Sebanyak 1,36 g raksa (II) klorida, kemudian dilarutkan dalam air suling hingga 60 ml. Pada wadah lain ditimbang sebanyak 5 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 20 ml air suling. Kedua larutan dicampurkan dan ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.2 Larutan pereaksi Dragendorff

Sebanyak 0,8 g bismuth (III) nitrat dilarutkan dalam asam nitrat pekat 20 ml kemudian dicampurkan dengan larutan kalium iodida sebanyak 27,2 g dalam 50 ml air suling. Didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan jernih diambil dan diencerkan dengan air suling secukupnya hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.3 Larutan pereaksi Bouchardat

Sebanyak 4 g kalium iodida dilarutkan dalam air suling secukupnya kemudian ditambahkan 2 g iodium sedikit demi sedikit, cukupkan dengan air suling hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.4 Larutan pereaksi Molish

Sebanyak 3 g α-naftol dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N secukupnya hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.6 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1%

Sebanyak 1 g besi (III) klorida dilarutkan dalam air suling hingga 100 ml kemudian disaring (Depkes RI, 1995).

3.4.7 Larutan timbal (II) asetat

Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling hingga 100 ml (Ditjen POM RI, 1979)

3.4.8 Larutan natrium hidroksida 2N

Sebanyak 8 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dalam air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen POM RI, 1979)

3.4.9 Larutan asam klorida 2N

Sebanyak 17 ml asam klorida pekat diencerkan dengan air suling sampai 100 ml (Ditjen POM RI, 1979)

3.4.10 Larutan kloralhidrat

Sebanyak 50 g kristal kloralhidrat ditimbang lalu dilarutkan dalam 20 ml air suling (Ditjen POM RI, 1995).

3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia

Pemeriksaan karakteristik simplisia meliputi makroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar abu total, pemeriksaan kadar abu yang tidak larut dalam asam, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol dan penetapan kadar sari yang larut dalam air-kloroform (Depkes RI, 1995; WHO, 1992).

3.5.1 Pemeriksaan makroskopik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan terhadap simplisia buah adas manis (Foeniculum vulgare Mill.) meliputi bentuk, warna, bau dan rasa.

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode azeotropi (destilasi toluene). Alat terdiri dari labu alas bulat 500 ml, alat penampung, pendingin, tabung penyambung dan tabung penerima 10 ml.

3.5.2.1 Penjenuhan toluena

Toluena sebanyak 200 ml dan air suling sebanyak 2 ml dimasukkan ke dalam labu alas bulat, kemudian di destilasi selama 2 jam. Setelah itu toluena didinginkan selama 30 menit dan dibaca volume air pada tabung penerima dengan ketelitian 0,05 ml (volume I).

3.5.2.2 Penetapan kadar air simplisia

5 gserbuk simplisia buah adas manis yang telah ditimbang seksama di masukkan ke dalam labu alas bulat tersebut, lalu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluena mulai mendidih, destilasi dengan kecepatan 2 tetes tiap detik, hingga sebagian besar air terdestilasi. Kemudian kecepatan destilasi ditingkatkan hingga 4 tetes tiap detik. Setelah 2 jam didestilasi (semua air terdestilasi), bagian dalam pendingin dibilas dengan toluena yang telah dijenuhkan. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin sampai suhu kamar. Setelah air dan toluena memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml (Volume II). Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO, 1992).

pemijaran dilakukan pada suhu 600o_{C selama 3 jam. Kemudian didinginkan dan}

ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan diudara (Depkes RI, 1995).

3.5.4 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam

Abu yang telah diperoleh dalam penetapan abu dididihkan dengan 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring dengan kertas saring bebas abu, cuci dengan air panas, dipijarkan sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bobot yang dikeringkan diudara (Depkes RI, 1995).

3.5.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

Sebanyak 5 g serbuk simplisia yang telah dikeringkan dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok selama 6 jam pertama, dan dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring, 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara dan sisanya dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar sari larut dalam etanol dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).

3.5.6 Penetapan kadar sari yang larut dalam air

Sebanyak 5 g simplisia adas manis yang telah dikeringkan di udara, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling 1000 ml) dalam labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Diuapkan 20 ml filtrat sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105o_{C sampai bobot tetap. Kadar dalam persen}

sari yang larut dalam air – kloroform dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan diudara (Depkes RI, 1995).

Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol buah adas manis meliputi pemeriksaan senyawa gologan alkaloid, flavonoid, glikosid, glikosida antrakinon, saponin, tanin dan steroid/triterpenoid (Depkes RI, 1989; Farnsworth, 1996). Skrining fitokimia ekstrak etanol dilakukan dengan cara yang sama dengan skrining fitokimia serbuk simplisia.

3.6.1 Pemeriksaan alkaloida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g, kemudian ditambah 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit. Dinginkan dan disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut :

a. Filtat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi Mayer, akan terbentuk endapan menggumpal berwarna putih atau kuning bila terdapat alkaloida.

b. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi Bouchardat, akan terbentuk endapan berwarna coklat sampai hitam bila terdapat alkaloida. c. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes pereaksi Dragendorf akan

terbentuk warna merah atau jingga bila terdapat alkaloida.

3.6.2 Pemeriksaan flavonoida

Sebanyak 10 g serbuk simplisia ditambah 100 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan saring dalam keadaan panas. Kedalam 5 ml filtrat ditambahkan serbuk magnesium, 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok kuat

ditambahkan 10 ml air panas, dinginkan kemudian dikocok selama 10 detik. Jika terbentuk busa setinggi 1 sampai 10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin.

3.6.4 Pemeriksaan tanin

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia buah adas manis disari dengan 10 ml air suling lalu disaring, filtratnya diencerkan dengan air sampai tidak berwarna. Larutan diambil sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin.

3.6.5 Pemeriksaan glikosida

Sebanyak 3 g serbuk simplisia buah adas manis disari dengan 30 ml campuran etanol 96% dengan air (7:3) dan 10 ml asam sulfat 2 N, direfluks selama 1 jam, didinginkan dan disaring. Pada 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air dan 25 ml timbal asetat 0,4 M, dikocok, diamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:3), dilakukan sebanyak 3 kali. Kumpulan sari ditambahkan natrium sulfat anhidrat, saring dan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 500C. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa dimasukkan dalam tabung reaksi selanjutnya, diuapkan di atas penangas air, pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molish. Tambahkan hati- hati 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuknya cincin ungu pada batas kedua cairan menunjukkan adanya gula.

3.6.6 Pemeriksaan antrakinon

Sebanyak 0,2 g serbuk simplisia buah adas manis dicampur dengan 5 ml asam sulfat 2 N, dipanaskan sebentar, lalu didinginkan, ditambahkan 10 ml benzena, dikocok, didiamkan. Lapisan benzena dipisahkan dan disaring. Kocok

dan lapisan benzena tidak berwarna menunjukkan adanya glikosida antrakinon.

3.6.7 Pemeriksaan steroida/triterpenoida

Sebanyak 1 g serbuk simplisia buah adas manis dimaserasi dengan 20 ml n -heksan selama 2 jam, disaring, filtrat diuapkan dalam cawan penguap dan pada sisanya ditambahkan 2 tetes Liebermann-Burchard. Apabila terbentuk warna ungu atau merah berubah menjadi ungu atau biru hijau menunjukkan adanya steroida/triterpenoida.

3.7 Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Adas Manis (EEBAM)

Pembuatan EEBAM dilakukan secara maserasi menggunakan pelarut etanol 80% (Ditjen POM RI, 1979). Cara kerjanya yaitu Sebanyak 500 g serbuk simplisia buah adas manis dimasukkan ke dalam wadah kaca berwarna gelap, kemudian dituangi dengan 3500 ml etanol 80%. Ditutup dan dibiarkan selama 5 hari yang terlindung dari cahaya sambil sesekali diaduk, disaring hingga didapat maserat pertama. Ampas yang diperoleh dibilas dengan menambahkan etanol 80% hingga diperoleh 5.000 ml ke dalam wadah tertutup, dibiarkan di tempat sejuk terlindung dari cahaya selama 2 hari, lalu disaring hingga didapat maserat kedua. Maserat pertama dan kedua digabung. Maserat diuapkan dengan menggunakan alat rotary evaporator pada temperatur ± 400C sampai diperoleh ekstrak kental kemudian dikeringkan menggunakan freeze dryer pada suhu –40o_C.

dimasukkan ke dalam lumpang, dan ditambahkan CMC-Na 1 % digerus hingga merata. Sediaan uji EEBAM dimasukkan ke dalam labu ukur, cukupkan dengan CMC-Na 1 % hingga dicapai batas volume.

3.8.2 Uji toksisitas akut

Mencit dikelompokkan ke dalam 8 kelompok, yaitu kelompok kontrol normal (suspensi CMC-Na 1%), kelompok bahan uji (Suspensi ekstrak).

a. kelompok perlakuan 1 (P1): diberi EEBAM dosis 5 mg/kg bb b. kelompok perlakuan 2 (P2): diberi EEBAM dosis 50 mg/kg bb c. kelompok perlakuan 3 (P3): diberi EEBAM dosis 300 mg/kg bb d. kelompok perlakuan 4 (P4): diberi EEBAM dosis 1000 mg/ kg bb e. kelompok perlakuan 5 (P5): diberi EEBAM dosis 2000 mg/ kg bb f. kelompok perlakuan 6 (P6): diberi EEBAM dosis 4000 mg/ kg bb g. kelompok perlakuan 7 (P7): diberi EEBAM dosis 8000 mg/ kg bb

3.8.3 Pengamatan

Pengamatan mencit dilakukan pada 30 menit pertama setelah pemberian sediaan uji, dan secara periodik setiap 4 jam selama 24 jam pertama dan sehari sekali setelah itu selama 14 hari (BPOM, RI., 2014).

3.8.3.1 Gejala toksik

Pengamatan seperti tremor, salivasi, diare, lemas, muntah, gerak-gerik hewan seperti berjalan mundur dan jalan menggunakan perut (BPOM, RI., 2014).

3.8.3.2 Berat badan

Mencit ditimbang dua kali dalam seminggu selama 14 hari. Perubahan berat badan dianalisis seminggu sekali. Pada akhir penelitian hewan yang masih hidup ditimbang dan kemudian dikorbankan (BPOM, RI., 2014).

Jumlah makanan dan minuman yang dikonsumsi ditimbang dan diukur setiap hari (BPOM, RI., 2014).

3.8.3.4 Kematian hewan

Kematian mencit diamati dari hari pertama sampai hari terakhir dan mencit yang mati selama waktu pemberian sediaan uji segera diotopsi (Hendriani, 2007; Klasseen, 2001).

3.8.3.5 Makropatologi

Mencit yang mati segera diotopsi dan dilakukan pengamatan (OECD, 2008). Pengamatan meliputi warna dan permukaan organ hati dan ginjal secara visual (Anggraini, 2008; Pratiwi, 2010).

3.8.4 Analisis data

Data jumlah hewan uji yang mati dianalisa secara statistik menggunakan SPSS dengan metode One Way Analysis of Variance (ANOVA) dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tukey untuk mengetahui perbedaan signifikan berat badan, konsumsi makanan dan minuman antar kelompok uji dengan p < 0,05.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan di Herbarium Bogoriense,

Bidang Botani Pusat, Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor menunjukkan bahwa sampel termasuk suku Apiaceae spesies Foeniculum vulgare Mill. Dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 51.

4.2 Hasil Karakterisasi

4.2.1 Pemeriksaan makroskopik

Pemeriksaan makroskopik diperoleh bahwa simplisia buah adas manis berwarna kuning kecoklatan atau coklat kehijauan. Panjang 5-6 mm dan berdiameter 1-2 mm, memiliki aroma yang khas dan rasa manis dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 52.

4.2.2 Pemeriksaan karakteristik simplisia dan ekstrak

Hasil karaketerisasi serbuk simplisia dan ekstrak adas manis yang diperoleh dan berdasarkan Farmakope Herbal Indonesia (FHI) dapat dilihat pada Tabel 4.1.

Tabel 4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia adas manis

No Karakteristik Hasil

Simplisia

FHI Simplisia

Hasil ekstrak

FHI Ekstrak

1 Kadar air 7,97 <10 7,87 <10

2 Kadar sari larut air 28,96 >20,0 - -

3 Kadar sari larut etanol 15,6 >8,6 - -

4 Kadar abu total 7,63 <13,1 0,89 <1

5 Kadar abu tidak larut asam 1,2 <20 0,47 <0,5

manis sebesar 7,97% dan 7,87% kadar tersebut memenuhi persyaratan Farmakope Herbal Indonesia yaitu lebih kecil dari 10%. Kadar air yang lebih besar dari 10% dapat menjadi media pertumbuhan kapang dan jasad renik lainnya (Depkes RI, 1995).

Penetapan kadar sari yang larut dalam air menyatakan jumlah zat yang tersari dalam pelarut air seperti glikosida, gula, gom, protein, enzim, zat warna dan asam-asam organik, sedangkan penetapan kadar sari yang larut dalam etanol seperti glikosida, antrakinon, steroid, flavonoid, klorofil, saponin, tannin dan yang larut dalam jumlah sedikit yaitu lemak (Depkes RI, 1995).

Penetapan kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam bertujuan untuk memberikan jaminan bahwa simplisia dan ekstrak etanol buah adas manis tidak mengandung logam berat tertentu melebihi nilai yang ditetapkan karena dapat berbahaya (toksik) bagi kesehatan. Penetapan kadar abu total menyatakan jumlah kandungan senyawa anorganik dalam simplisia misalnya Mg, Ca, Na, Zn, dan K. Kadar abu tidak larut dalam asam untuk mengetahui kadar senyawa anorganik yang tidak larut dalam asam, misalnya silikat. Abu total terbagi dua, yaitu abu fisiologis dan abu non fisiologis. Abu fisiologis adalah abu yang berasal dari jaringan tumbuhan itu sendiri, sedangkan abu non fisiologis adalah sisa setelah pembakaran yang berasal dari bahan-bahan luar yang terdapat pada permukaan simplisia (WHO, 1992).

4.3 Hasil Skrining Fitokimia

Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol buah adas manis diperoleh senyawa kimia golongan saponin, glikosida, flavonoida, steroida/triterpenoida dan tannin. Hasilnya dapat dilihat pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan EEBAM

No. Pemeriksaan

Hasil

Serbuk simplisia Ekstrak etanol buah adas manis

1 Alkaloid - -

2 Flavonoida + +

3 Glikosida + +

4 Glkosida antrakuinon - -

5 Saponin + +

6 Tanin + +

7 Steroida/Triterpenoida + +

Keterangan: (+) = mengandung golongan senyawa; (-) = tidak mengandung golongan senyawa

Penambahan serbuk Mg, asam klorida pekat dan amil alkohol memberikan warna merah yang menunjukkan adanya flavanoida (Farnsworth, 1966). Skrining glikosida ditunjukkan dengan terbentuknya cincin ungu dengan penambahan Molish dan asam sulfat pekat (Depkes RI, 1995). Penambahan FeCl3

1% memberikan warna biru kehitaman yang menunjukkan adanya tanin yaitu 3 buah gugus hidroksil (Depkes RI, 1995). Penambahan pereaksi Lieberman-Bourchard memberikan warna merah ungu menunjukkan adanya triterpenoid/steroid.

4.4 Hasil Pengujian Toksisitas Akut

Berdasarkan hasil uji pendahuluan dari EEBAM maka diberikan dosis untuk pengujian toksisitas akut yaitu dosis 5, 50, 300, 1000, 2000, 4000, 8000 mg/kg bb. Pengamatan dilakukan selama 14 hari meliputi gejala toksik, berat

hati dan ginjal.

4.4.1 Hasil pengamatan gejala toksik

Hasil pengamatan yang dilakukan setiap hari selama 14 hari terhadap adanya tremor, diare, salivasi, lemas, muntah dan gerak-gerik hewan seperti berjalan mundur dan berjalan dengan perut dapat dilihat pada Tabel 4.3.

Tabel 4.3 Hasil pengamatan gejala toksik

Perlakuan Tremor Diare Salivasi Lemas Jalan mundur

Jalan dengan

perut

Muntah

Kontrol - - - -

EEBAM

5 mg/kg bb - - - -

EEBAM

50 mg/kg bb - - - -

EEBAM

300 mg/kg bb - - - -

EEBAM

1000 mg/kg bb - - - -

EEBAM

2000 mg/kg bb - - - -

EEBAM

4000 mg/kg bb - - - + - - -

EEBAM

8000 mg/kg bb - - - + - - -

Keterangan: (-) = tidak menunjukkan gejala toksik; (+) = menunjukkan gejala toksik.

Pada Tabel 4.3 terlihat bahwa pemberian EEBAM tidak ditemukan adanya gejala toksik pada kelompok kontrol, dosis 5, 50, 300, 1000 dan 2000 mg/kg bb. Pada dosis 4000 dan 8000 mg/kg bb ditemukan gejala toksik yaitu lemas pada mencit. Sifat toksik dari suatu senyawa sangat ditentukan oleh dosis.

Setiap zat bila diberikan dengan dosis yang cukup besar akan menimbulkan gejala-gejala toksik (Ganiswara, 1995). Makin besar dosis yang diberikan makin besar efek toksik yang timbul (Lu, 1995). Tanda toksik yang muncul pada organ dan sistem antara lain: pada sistem gastrointestinal meliputi melemas, diare, salivasi, keluar air seni, pada perilaku meliputi sedasi, gelisah, depresi berat, sikap agresif atau defensif, ketakutan, bingung , aktivitas yang aneh, dll (Lu, 1995).

4.4.2 Hasil pengamatan berat badan

Penimbangan berat badan dilakukan setiap hari dari hari 0 sampai hari ke 14 dan dianalisis secara statistik dilakukan seminggu sekali. Hasil pengamatan berat badan dapat dilihat pada Tabel 4.4 dan Gambar 4.1 di bawah ini:

Tabel 4.4 Hasil rata-rata berat badan mencit diberi EEBAM

M

Rata-rata berat badan (g) ± SD

Kontrol EEBAM 5 mg/kg bb P EEBAM 50 mg/kg bb P EEBAM 300 mg/kg bb p EEBAM 1000 mg/kg bb P

I 29,52 ± 1,08

29,85

± 1,43 1,00

29,71

± 1,14 1,00

30,61

± 1,35 0,86

29,76

± 1,45 1,00 II 29,95

± 1,05

30,95

± 1,19 0,82

30,56

± 0,94 098

32, 02

± 1,29 0,08

31,58

± 1,12 0,29

M

Rata-rata berat badan (g) ± SD

Kontrol EEBAM 2000 mg/kg bb P EEBAM 4000 mg/kg bb P EEBAM 8000 mg/kg bb p

I 29,52 ± 1,08

30,60

±1,15 0,87

31,15

± 1,38 0,46

31,27

± 0,96 0,38 II 29,95

± 1,05

31,56

± 1,19 0,29

32,83

± 1,11 0,36

32,49

± 0,62 0,32

Keterangan: M = minggu; bb = berat badan; SD = standar deviasi; p = signifikansi; EEBAM = ektrak etanol buah adas manis

Gambar 4.1 Grafik perubahan berat badan mencit selama 14 hari

Berdasarkan hasil pengamatan terjadi perubahan berat badan kelompok kontrol dan perlakuan dengan pemberian ekstrak etanol buah adas manis yaitu pertambahan berat badan sedangkan berdasarkan hasil analisis secara statistik terlihat bahwa tidak terdapat perbedaan berat badan yang signifikan antara kelompok kontrol dan perlakuan dengan pemberian ekstrak etanol buah adas manis dimana p ≥ 0,05. Menurut Sihombing (2010) kenaikkan berat badan mencit sebanding dengan bertambahnya umur, ini memperlihatkkan pertumbuhan mencit berkembang secara normal. Sehingga menunjukkan tidak adanya pengaruh

26 27 28 29 30 31 32 33

0 3 6 10 14

waktu (hari)

b

er

at b

ad

an

kontrol

dosis 5 mg/kg bb dosis 50 mg/kg bb dosis 300 mg/kg bb dosis 1000 mg/kg bb dosis 2000 mg/kg bb dosis 4000 mg/kg bb dosis 8000 mg/kg bb

dan Datta, 2012). Penurunan berat badan yang cepat dan bermakna biasanya merupakan pertanda kesehatan yang buruk. Penurunan berat badan dapat disebabkan oleh kurangnya konsumsi makanan dan minuman, penyakit ataupun tanda toksik spesifik (Wilson, et al., 2001).

4.4.3 Hasil pengamatan konsumsi makanan dan minuman

Hasil pengamatan uji konsumsi makanan dan minuman yang diberikan pada mencit sesudah perlakuan pada Tabel 4.5 di bawah ini.

Tabel 4.5 Rata-rata konsumsi makanan dan minuman sesudah diberi EEBAM

M

Rata-rata konsumsi makanan (g) ± SD Kontrol EEBAM 5 mg/kg bb P EEBAM 50 mg/kg bb P EEBAM 300 mg/kg bb p EEBAM 1000 mg/kg bb P

I 3,59 ± 0,12

3,69

± 0,23 0,99

3,71

± 0,16 0,99

3,77

± 0,42 0,94

3,85

± 0,53 0,68 II 3,70

± 0,70

3,75

± 0,81 0,82

3,89

± 0,53 0,98

3,91

± 0,52 0,08

4,02

± 0,52 0,29 M Kontrol

EEBAM 2000 mg/kg bb P EEBAM 4000 mg/kg bb P EEBAM 8000 mg/kg bb p

I 3,59 ± 0,12

3,83

± 0,11 0,76

3,98

± 0,18 0,17

4,04

± 0,21 0,08 II 3,70

± 0,70

4,13

± 0,10 0,30

4,21

± 0,11 0,36

4,33

± 0,076 0,32

M

Rata-rata konsumsi minuman (ml) ± SD Kontrol EEBAM 5 mg/kg bb P EEBAM 50 mg/kg bb P EEBAM 300 mg/kg bb p EEBAM 1000 mg/kg bb P

I 4,50 ± 0,74

4,54

± 0,90 1,00

4,80

± 0,37 0,99

4,90

± 0,38 0,87

4,93

± 0,37 0,82

II

4,93 ± 0,42

5,06

± 0,41 0,98

5,10

± 0,39 0,93

5,13

± 0,37 0,86

5,17

± 0,23 0,77

M Kontrol

EEBAM 2000 mg/kg bb P EEBAM 4000 mg/kg bb P EEBAM 8000 mg/kg bb p I 4,50 ± 0,74 5,03

± 0,59 0,62

5,09

± 0,59 0,48

5,11

± 0,38 0,44 II

4,93 ± 0,42

5,24

± 0,28 0,50

5,36

± 0,13 0,14

5,36

± 0,33 0,15

Keterangan: M = minggu; bb = berat badan; SD = standar deviasi; p = signifikansi; EEBAM = ektrak etanol buah adas manis

2.1.5 Khasiat ... 7

2.1.7 Kandungan kimia ... 8

2.2 Ekstraksi ... 8

2.3 Biologi Mencit ... 11

2.4 Toksisitas ... 12

2.5 Hati ... 18

2.6 Ginjal ... 21

BAB III METODE PENELITIAN ... 23

3.1 Alat dan Bahan ... 23

3.1.1 Alat ... 23

3.1.2 Bahan ... 23

3.2 Hewan Percobaan ... 24

3.3 Pengambilan dan Pengolahan Sampel ... 24

3.3.1 Pengambilan buah adas manis ... 24

3.3.2 Identifikasi buah adas manis ... 24

3.3.3 Pengolahan buah adas manis ... 24

3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi ... 25

3.4.1 Pereaksi Mayer ... 25

3.4.2 Pereaksi Dragendorff ... 25

3.4.3 Pereaksi Bouchardat ... 25

3.4.4 Pereaksi Molish ... 25

3.4.5 Pereaksi Liebermann-buchard ... 25

3.4.6 Larutan besi (III) klorida 1% ... 26

3.4.7 Larutan timbal (II) asetat ... 26

3.4.9 Larutan asam klorida 2 N ... 26

3.4.10 Larutan kloralhidrat ... 26

3.5 Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia ... 26

3.5.1 Pemeriksaan makroskopik ... 26

3.5.2 Pemeriksaan kadar air ... 27

3.5.3 Penetapan kadar abu total ... 27

3.5.4 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam ... 28

3.5.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol ... 28

3.5.6 Penetapan kadar sari larut dalam air ... 28

3.6 Skrining Fitokimia ... 29

3.6.1 Pemeriksaan alkaloida ... 29

3.6.2 Pemeriksaan flavonoida ... 29

3.6.3 Pemeriksaan saponin ... 29

3.6.4 Pemeriksaan tanin ... 30

3.6.5 Pemeriksaan glikosida ... 30

3.6.6 Pemeriksaan antrakinon ... 30

3.6.7 Pemeriksaan steroida/triterpenoida ... 31

3.7 Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Adas Manis (EEBAM) 31

3.8 Pengujian Efek Toksisitas ... 31

3.8.1 Pembuatan sediaan ekstrak etanol buah adas manis 31

3.8.2 Uji toksisitas akut ... 32

3.8.3 Pengamatan ... 32

3.8.3.4 Kematian hewan ... 33

3.8.3.5 Makropatologi ... 33

3.8.4 Analisis Data ... 33

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 34

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 34

4.2 Hasil Karakterisasi ... 34

4.2.1 Pemeriksaan makroskopik ... 34

4.2.2 Pemeriksaan karakterisasi simplisia dan ekstrak .... 34

4.3 Hasil Skrining Fitokimia ... 36

4.4 Hasil Pengujian Toksisitas Akut ... 36

4.4.1 Hasil pengamatan gejala toksik ... 37

4.4.2 Hasil pengamatan berat badan ... 38

4.4.3 Hasil pengamatan konsumsi makanan dan miuman 40

4.4.4 Hasil pengamatan kematian ... 41

4.4.5 Hasil pengamatan makropatologi organ ... 42

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 45

5.1 Kesimpulan ... 45

5.2 Saran ... 45

DAFTAR PUSTAKA ... 46

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

2.1 Klasifikasi toksisitas sediaan uji ... 13 4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia buah adas manis ... 34 4.2 Hasil skrining simplisia dan ekstrak etanol buah adas manis .... 36 4.3 Hasil pengamatan gejala toksik ... 37 4.4 Hasil rata-rata berat badan mencit diberi EEBAM ... 39 4.5 Rata-rata konsumsi makanan dan minuman sesudah diberi

EEBAM ... 40 4.6 Jumlah mencit yang mati setelah pemberian EEBAM selama

14 hari ... 41 4.7 Hasil pengamatan makropatologi hati ... 42 4.8 Hasil pengamatan makropatologi ginjal ... 42

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1 Diagram kerangka pikir penelitian ... 5 4.1 Grafik perubahan berat badan mencit selama 14 hari ... 38

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Surat hasil identifikasi sampel ... 51

2 Gambar tumbuhan dan buah adas manis ... 52

3 Rekomendasi persetujuan etik penelitian kesehatan ... 53

4 Bagan kerja penelitian ... 54

5 Bagan penelitian uji toksisitas EEBAM ... 55

6 Contoh perhitungan dosis ... 56

7 Hasil pengukuran berat badan ... 57

8 Perhitungan karakterisasi simplisia buah adas manis ... 59

9 Perhitungan karakterisasi EEBAM ... 64

10 Hasil analisis data SPSS berat badan mencit ... 67

11 Hasil analisis data SPSS konsumsi makanan mencit ... 73

12 Hasil analisis data SPSS konsumsi minuman mencit ... 77