3.1.2 Bahan - Bahan
1. Bekicot
2. Aseton
p.a.E.Merck 3.
Selulosa p.aE.Merck
4. Ampas tebu
5. Kertas
6. CuSO
4
.5H
2
O p.aE.Merck
7. KNaC
4
H
4
O
6
.4H
2
O p.aE.Merck
8. NaHCO
3
p.aE.Merck 9.
Na
2
SO
4
p.aE.Merck 10.
Na2CO3 p.aE.Merck
11. H
2
SO
4
p p.aE.Merck
12. NH
4
6Mo
7
O
24
.4H
2
O p.aE.Merck
13. Na
2
HA SO
4
.7H
2
O p.aE.Merck
14. NaOH
p.aE.Merck 15.
NaCl p.aE.Merck
16. CH
3
COOH p.aE.Merck
17. C
6
H
12
O
6
p.aE.Merck 18.
Natrium Asetat p.aE.Merck
19. Akuades
3.2 Prosedur Penelitian
3.2.1 Pembuatan Larutan Pereaksi
3.2.1.1 Pembuatan Larutan Buffer Asetat 0,2 M
Dipipet sebanyak 11,55 ml asam asetat p.a lalu diencerkan dalam labu takar 100 ml sehingga konsentrasi larutan asam asetat 0,2 M. Kemudian ditimbang natrium asetat
sebanyak 16,4 gram C
2
H
3
O
2
Na.3H
2
O dilarutkan dalam labu takar 100 ml sehingga konentrasi larutan garam natrium asetat 0,2 M. Kemudian untuk membuat larutan
buffer asetat dengan pH tertentu maka diambil sebanyak x ml larutan 0,2 M asam
Universitas Sumatera Utara
asetat dicampurkan dengan larutan 0,2 M larutan garam natrium asetat sebanyak y ml. Lihat tabel di bawah ini:
Tabel 3.1. Pembuatan Larutan Buffer Asetat 0,2 M
pH 0,2 M Asam Asetat
0,2 M Natium Asetat 3,5
46,3 ml 3,7 ml
4,0 41,0 ml
9,0 ml 4,5
25,5 ml 24,5 ml
5,5 14,8 ml
35,2 ml 5,5
4,8 ml 45,2 ml
3.2.1.2.Pembuatan Larutan NaOH 0,1 N
Dilarutkan 0,4 g NaOH dengan akuades kemudian dimasukkan kedalam labu takar
100 ml dan diencerkan sampai garis tanda.
3.2.1. 3 Pembuatan Larutan NaCl 1
Dimasukkan 1 g NaCl dalam labu takar 100 ml kemudian diencerkan dengan akuades
sampai garis tanda.
3.2.1.4 Pembuatan Larutan Glukosa 0,2mgml
Sebanyak 20 mg glukosa anhidrat dilarutkan dengan akuades dalam labu takar 100 ml
sampai garis tanda dan dikocok sampai homogen.
3.2.1.5 Pembuatan Larutan pereaksi Nelson
Nelson A :
Dilarutkan12,5 g Natrium karbonat anhidrat, 12,5 g garam Rochelle K-Na-Tartrat, 10 g Natrium Bikarbonat dan 100 g Natrium Sulfat anhidrat dalam 300 ml akuades
dan diencerkan sampai 500 ml.
Universitas Sumatera Utara
Nelson B :
Dilarutkan 7,5 g CuSO
4.
5H
2
O dalam 50 ml akuades dan ditambahkan 1 tetes asam sulfat pekat.
Pereaksi Nelson dibuat dengan cara mencampur 25 bagian larutan Nelson A dan I bagian Nelson B. Pencampuran dilakukan setiap kali akan digunakan.
3.2.1.6 Pembuatan Larutan Arsenomolibdat
Dilarutkan 25 g ammonium molibdat dalam 450 ml aquades dan ditambahkan 25 ml H
2
SO
4
p .Dilarutkan pada tempat yang lain 3 g Na
2
HAsO
4.
7H
2
O dalam 25 ml akuades kemudian dituangkan larutan ini kedalam larutan yang pertama.Disimpan
dalam botol, berwarna coklat dan diinkubasi pada suhu 37
o
C selama 24 jam. Larutan
pereaksi ini dapat digunakan setelah masa inkubasi dan berwarna kuning.
3.2.2 Penyediaan Ekstrak Kasar Enzim Selulase
Kategori