BAB 3 BAHAN DAN METODE
3.1 Waktu dan tempat
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan April sampai September 2015 di Laboratorium Fisiologi Hewan Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara Medan, dan di Balai Laboratorium Kesehatan Medan Sumatera Utara.
3.2 Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah mikroskop, masker, sarung tangan, jarum gavage
, gelas beaker, jarum pentul, bak bedah, alat penghitung, gelas penutup, gelas ukur, blender, pisau, rotary evaporator, kertas saring, haemositometer, pipet
eritrosit, spatula, spit 1 ml, pipet tetes, spektrofotometer microlab 300, tabung reaksi, mikropipet 100 µL dan 1000 µL, sentrifuge, rak tabung, water bath,
beaker glass , timbangan digital, spatula dan kamera digital.
Bahan yang digunakan adalah tikus jantan Rattus norvegicus. strain Wistar, Kulit Manggis Garcia mangostana L., tabung Na-EDTA, pakan, sekam,
minyak kelapa, akuades, larutan Hayem, CCl
4
, HCL 0,1, darah, Serum, larutan drabkins, DMSO, reagent 1 SGPT Tris, pH 7,5, L-alanin, LDH, reagen 2 2-
oxaglutarate, NADH, reagen 2 SGOT Tris, pH 7,8, L-Aspartate, MDH, LDH dan reagen 2 2-Oxoglutarate, NADH, FeCl
3
, Ethyl Acetate.
3.3 Rancangan penelitian
Penelitian ini merupakan menggunakan Rancangan Acak Lengkap RAL dengan 5 kontrol dan 3 perlakuan, dengan masing-masing 4 ulangan. Kontrol
yang digunakan adalah kontrol CCl
4
kontrol karbon tetraklorida, kontrol pelarut minyak kelapa, kontrol blank pemberian aquades, sedangkan perlakuan yang
diberikan adalah dengan pemberian ekstrak kulit manggis dengan konsentrasi yang berbeda yaitu 60 mg100 BB, 80 mg100 BB, 100 mg100 BB. Jumlah tikus
Universitas Sumatera Utara
setiap perlakuan adalah 4 ekor sehingga jumlah tikus yang digunakan adalah 32 ekor.
Tabel 3.3 Taraf Pembagian Perlakuan
Kelompok Pembagian Perlakuan
a. CCl
4
KC10: CCl
4
0,7 mL200 g BB ; 10 hari KC24: CCl
4
0,7 mL200 g BB ;10 hari dibedah hari ke 24
Kontrol
b. Pelarut Minyak
kelapa KP10: Minyak kelapa 0,7 mL200 g BB ; 10 hari
KP24: Minyak kelapa 0,7 ml200 g BB ;10 hari dibedah hari ke 24
c. Normal KB
Aquades selama 10 hari, DMSO 14 hari Perlakuan
P1: CCl
4
+ ekstrak kulit manggis 60 mg100 g BB 14 hari P2: CCl
4
+ ekstrak kulit manggis 80 mg100 g BB 14 hari P3:CCl
4
+ ekstrak kulit manggis100 mg100 g BB 14 hari
3.4 Prosedur penelitian 3.4.1 Tahap Persiapan Hewan Coba