commit to user 27
BAB III METODOLOGI
A. WAKTU DAN TEMPAT PENELITIAN 1. Waktu
Penelitian dilaksanakan bulan Desember sampai Mei 2010. Jadwal kegiatan penelitian terlampir Table L. G1, lampiran G.
2. Tempat
Sampel Abu vulkanik gunung Merapi Jawa Tengah diambil dari 2 tempat yaitu; Desa Lencoh Kecamatan Selo Kabupaten Boyolali dan Cangkringan
Sleman Yogyakarta. Abu merupakan lapisan di atas tanah setebal 5 cm. Isolasi bakteri dari sampel abu Selo Boyolali dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi
FKIP Universitas Sebelas Maret Surakarta. Isolasi bakteri dari sampel abu Cangkringan Sleman Yogyakarta dilaksanakan di LPPT Universitas Gajah Mada.
Identifikasi bakteri dilaksanakan di sub laboratorium Mikrobiologi FKIP UNS dan sub Lab. Biologi laboratorium pusat Universitas Sebelas Maret. Karakterisasi
ekstrak kasar enzim fitase dilaksanakan di sub Lab. Biologi dan sub Lab. Kimia laboratorium pusat Universitas Sebelas Maret. Sekuensing DNA dilaksanakan
dengan jasa komersial Laboratorium 1
st
base Singapura.
B. ALAT DAN BAHAN PENELITIAN
Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain:
1. Alat
Bunsen, cawan petri, tabung reaksi, gelas beker, gelas ukur, ose, pinset, pipet, pipet mikro, tip, tabung mikro 1500 ml eppendorf, neraca
timbang, inkubator, vortex, stirer, elektroforesis DNA, laminar air flow, autoklaf, lampu ultraviolet, refrigerator, freezer, sentrifuge, PCR,
microwave, incubator, ice maker, sarung tangan.
commit to user 28
2. Bahan
Aquades, dH
2
O filter, Master mix PCR goTaq green Promega, agarosa, DNA kit Promega, etidium bromide, kristal violet, safranin.
primer forward Bact F1 5-GAGAGTTTGATCCTGGCCAG-3’, primer reverse Uni B1 5‘-CTGTTTGCTCCCCACGCTTTC-3‘. Marka DNA 1 kb
Fermentas. Media Luria Bertani LB, terdiri dari; 1 tripton, 1 NaCl, 0,5 yeast extract, 2 bacto agar untuk media LB padat, 0,4 Na Fitat
Natrium Fitat untuk media screening, Ammonium molibdate, Ammonium metavanadate, HNO
3
asam nitrat, HCL asam klorida.
C. RANCANGAN PENELITIAN
Kategori