III. BAHAN DAN METODE
A. BAHAN DAN ALAT
1. BAHAN
Bahan-bahan utama yang digunakan adalah daun ceremai, daun delima putih, daun jati belanda, bunga kecombrang, dan daun kemuning.
Tanaman yang digunakan adalah tanaman muda. Bahan-bahan utama diperoleh dari Balitro, Bogor. Bahan kimia yang dipakai untuk ekstraksi
adalah aquades, etanol 96, dan kertas saring Whatman No.42. Bahan- bahan yang digunakan untuk isolasi limfosit dan kultur sel adalah darah
dari donor yang sehat, RPMI-1640 Sigma. USA, aquades, etanol 70, antibiotik gentamycin, fycoll-histopaque Sigma, USA, biru tripan,
larutan mitogen Con A dan LPS pada konsentrasi 10µgml, PBS Phospat Buffer Saline, NaHCO
3
anhidrous, EDTA 0.1, aquabides, 3- [4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide MTT
Sigma, USA, dan HCL-isopropanol 0.04 N. Bahan kimia yang dipakai
untuk analisis kimia K
2
SO
4
, HgO, H
2
SO
4
pekat, NaOH-Na
2
S
2
O
3
, asam borat, HCl 0.02 N, indikator metil merah dan metil biru, dan aquades.
Bahan kimia yang digunakan untuk analisis antioksidan adalah larutan DPPH 3 mM segar, metanol, HPO
3
, asam askorbat, dan larutan buffer asetat campuran Na-asetat dan asam asetat. Bahan kimia yang digunakan
untuk analisis total fenol adalah etanol, air deion, pereaksi Folin Cioucalteceau 50,
Na
2
CO
3
5, dan asam tanat. Bahan kimia lain yang digunakan adalah KmnO
4
dan larutan formaldehid.
2. ALAT
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi alat untuk ekstraksi dan persiapan sampel, yaitu blender kering, peralatan gelas,
kompor, panci, kain saring, rotary vacuum evaporator, syringe, membran steril 0.22
μm Sartorius, dan tabung eppendorf. Alat-alat yang digunakan untuk isolasi limfosit dan kultur sel adalah tabung vacutainer steril,
sentrifuse CR412, tabung sentrifuse steril 15 ml disposible Nunc,
mikropipet, mikrotip, vorteks, hemasitometer Bright-line, mikroskop Olympus CH 20, lempeng mikrokultur 96 well, laminar flow hood,
inkubator VWR Scientific CO
2
5 , 37
o
C, dan Spectrophotometer Microplate Reader Bio-rad model 550. Alat-alat yang digunakan untuk
analisis kimia adalah oven kering, oven vakum, gegep, neraca analitik, erlenmeyer 100 ml, cawan alumunium, labu kjedahl, pipet 5 ml, 3 ml, dan
10 ml, alat dekstruksi, alat destilasi, buret, gelas piala, sudip, dan gelas pengaduk. Alat-alat yang digunakan untuk analisis antioksidan dan total
fenol adalah spektrofotometer, kuvet, tabung reaksi, gelas piala, botol gelap, mikropipet, pipet 5 ml, dan vorteks.
B. METODE PENELITIAN
Kategori