x
i
x
j
: pengaruh linier dua variabel x
i
2
: pengaruh kuadratik variabel utama
2. Prosedur Penelitian
Prosedur percobaan yang dilakukan pada penelitian ini adalah sebagai berikut.
a. Penentuan aktivitas invertase
Larutan invertase 0.003 gl sebanyak 1 ml dan larutan sukrosa 25 gl sebanyak 1 ml disiapkan pada tabung reaksi. Masing-masing
tabung reaksi kemudian diinkubasi di dalam water bath suhu 55°C sehingga suhu tersebut dicapai oleh larutan di dalam tabung reaksi.
Selanjutnya sukrosa dimasukkan ke dalam tabung reaksi berisi invertase dan mulai diukur waktu reaksi t=0. Reaksi dihentikan
pada masing-masing waktu yang diujikan, yaitu 0, 30, 60, 90, 120, 180, 240, dan 300 detik, dengan memasukkan 2 ml pereaksi DNS.
Kemudian tabung tersebut dimasukkan ke dalam water bath pada suhu 95 °C selama 10 menit. Setelah 10 menit, tabung reaksi
dikeluarkan dan didinginkan untuk diukur absorbansinya pada panjang gelombang 540 nm.
b. Karakterisasi akar kawao Millettia sericea
Karakterisasi akar kawao Millettia sericea dilakukan dengan membawa sampel akar kawao Millettia sericea ke tempat
pengujian fitokimia bahan. Uji fitokimia dilakukan di Laboratorium Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat, Balai Penelitian
Tanaman Rempah dan Obat, Bogor.
c. Penentuan pengaruh faktor reaksi
Dibuat larutan sukrosa dengan konsentrasi 25 gl dan larutan enzim konsetrasi 0,003 gl dalam buffer 5; 6,5 dan 8. Larutan
sukrosa 66,5 ml dimasukkan ke dalam erlenmeyer dan diinkubasi dalam waterbath dengan dishaker 120 rpm pada suhu 60, 70 dan
80°C hingga mencapai suhu yang diinginkan. Larutan sukrosa yang telah mencapai suhu yang dibutuhkan kemudian ditambahkan akar
kawao Millettia sericea dan larutan enzim 70 ml dan dimulai waktu reaksi. Reaksi dihentikan pada waktu 40 dan 100 menit untuk nilai
waktu rendah dan tinggi dengan memasukkan DNS 2 ml pada tabung reaksi yang berisi sampel yang telah diambil dari masing-masing
erlenmeyer. Penghentian reaksi untuk nilai tengah pada waktu 70 menit. Kemudian tabung tersebut dimasukkan ke dalam water bath
pada suhu 95 °C selama 10 menit. Setelah 10 menit, tabung reaksi dikeluarkan dan didinginkan untuk diukur absorbansinya pada
panjang gelombang 540 nm.
d. Permukaan respon faktor yang berpengaruh
