15
3. METODOLOGI PENELITIAN
3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian
Sampel spons Petrosia petrosia nigricans yang digunakan untuk penelitian di laboratorium di peroleh di bagian barat daya Pulau Pramuka
Gugusan Kepulauan Seribu DKI Jakarta pada kedalaman 7 meter. Perawatan spons yang telah difragmentasi dilakukan selama 3 bulan September – November
2010 di Laboratorium Pusat Studi Kelautan, Institut Pertanian Bogor, Jakarta Utara. Waktu pengambilan sampel sesuai dengan penanggalan Bulan Qomariyah
selama satu bulan. Pengawetan dan pengamatan sampel spons dilakukan di Laboratorium Histologis Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.
3.2. Bahan dan Alat
Bahan dan alat yang digunakan pada penelitian ini disajikan pada Tabel 1 dan Tabel 2 di bawah.
Tabel 1. Bahan yang digunakan dalam penelitian
Bahan Kegunaan
Spons jenis
Petrosia petrosia nigricans
Jenis yang diteliti Formalin 4 dan 10
Bahan pengawet, desilifikasi Air destilasi
Desilifikasi, bahan pencuci dalam pewarnaan
Air keran Desilifikasi, bahan pencuci dalam
pewarnaan HCl Asam Klorida
Bahan desilifikasi
Parafin bahan embedding dan blocking
Xylol bahan clearing
Etanol 70, 80, 90, 95, dan 100 bahan dehidrasi dan rehidrasi
Enthellan perekat mounting
Pewarna Haematoxylin dan Eosin bahan pewarna jaringan
16
Tabel 2. Alat yang digunakan dalam penelitian
Alat Kegunaan
Underwater camera Canon A640
Dokumentasi Alat selam satu set
Mengambil sampel Cutter
dan pisau stainless steel Memotong jaringan spons
Plastik sample Menyimpan sampel spons
Kolam Pemeliharaan Wadah pemeliharaan
Kapal motor Transportasi pengambilan sample
di alam Cool box
Wadah pengangkutan sampel Jaring sample
Wadah saat pengambilan sampel Botol sample
Tempat sampel air Tali Polyetilen benang kenur
Alat bantu aklimatisasi sampel Termometer lapangan, Refraktometer
Mengukur suhu, salinitas Kertas label
Memberi nama sampel Basket jaringan
Tempat jaringan saat dehidrasi Pinset dan jarum
Alat bantu sectioning Gelas objek dan cover glass
Meletakan preparat awetan Blok kayu
Menempelkan hasil blocking
Korek Api Alat bakar
Mangkok Tempat air
Mikrotom Spencer 820 Alat bantu sectioning
Tutup pagoda Alat bantu blocking
Lemari pendingin Tempat penyimpanan sampel
Lemari asam Membantu pergantian larutan
Alat pemanas air Eyela Water Bath SB-650 Alat bantu sectioning
Embedding Console Tissue-Tek TEC Alat blocking
Inkubator Memmert Menyimpan hasil
sectioning EyelaSoft
Inkubator SLI-450 Menyimpan parafin cair
Mikrometer objektif dan okuler Alat ukur
Mikroskop cahaya dan Stereo Olympus CH20 Mengamati jaringan
pensil dan spidol permanen Alat tulis
Optilab viewer Mikrofotografi
3.3. Prosedur Penelitian 3.3.1. Pengambilan sampel di alam