3.4 Skema Penelitian
3.4.1 Skema Penentuan Kurva Standard Larutan Bovine Serum Albumin
3.4.2 Skema Penentuan Kadar Protein Enzim Lipase Candida rugosa
Larutan BSA konsentrasi 50,100,150,200,250,300,350,400 µgmL
Diukur masing-masing sebanyak 1 mL Dimasukkan ke dalam tabung reaksi
Ditambahkan 6 mL pereaksi Lowry Dikocok dan dibiarkan selama 10 menit pada
suhu kamar Ditambahkan 0,5 mL larutan Folin-
Ciocalteu Dikocok dan dibiarkan selama 30 menit
Diukur absorbansi pada panjang gelombang 700 nm
Hasil
Larutan Enzim Lipase Candida rugosa Diukur sebanyak 1 mL
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi Ditambahkan 6 mL pereaksi Lowry
Dikocok dan dibiarkan selama 10 menit pada suhu kamar
Ditambahkan 0,5 mL larutan Folin- Ciocalteu
Dikocok dan dibiarkan selama 30 menit Diukur absorbansi pada panjang gelombang
700 nm
Hasil Dihitung kadar protein dengan
menggunakan kurva standard
Universitas Sumatera Utara
3.4.3 Penentuan Kadar Asam Lemak Bebas dari PKO sebelum dihidrolisis
3.4.4 Penentuan Kadar Asam Lemak Bebas dari Minyak Jagung sebelum
dihidrolisis
PKO Ditimbang 2 g PKO
Dimasukkan ke dalam gelas erlenmeyer Ditambahkan 10 mL alkohol 96
Ditutup dengan plastik dan diikat dengan karet Dipanaskan pada suhu 50
C selama 10 menit
Ditambahkan 3 tetes indikator fenolftalein Dititrasi dengan KOH 0,1 N hingga
berwarna merah muda
Hasil Dicatat volume KOH 0,1 N yang
terpakai
Minyak Jagung Ditimbang 2 g minyak jagung
Dimasukkan ke dalam gelas erlenmeyer Ditambahkan 10 mL alkohol 96
Ditutup dengan plastik dan diikat dengan karet Dipanaskan pada suhu 50
C selama 10 menit
Ditambahkan 3 tetes indikator fenolftalein Dititrasi dengan KOH 0,1 N hingga
berwarna merah muda
Hasil Dicatat volume KOH 0,1 N yang
terpakai
Universitas Sumatera Utara
3.4.5 Penentuan Suhu Optimum aktivitas Enzim Lipase Candida rugosa dalam
Hidrolisis PKO dan Minyak Jagung
PKO
Hasil Diukur sebanyak 3 mL
Dimasukkan ke dalam gelas erlenmeyer Ditambahkan 0,5 mL buffer fosfat 0,05 M pH 7
Ditambahkan 0,5 mL CaCl
2
1 M Ditambahkan 1 mL larutan lipase
Candida rugosa Diinkubasi pada suhu 30,35,40,45,50
C selama 1 jam jamjam
Ditambahkan 30 mL etanol-aseton 1:1 vv Ditambahkan 3 tetes indikator fenolftalein
Dititrasi dengan NaOH 0,5 N hingga berwarna merah muda
Dicatat volume NaOH 0,5 N yang terpakai Dihitung aktivitas lipase
Dilakukan hal yang sama untuk minyak jagung
Universitas Sumatera Utara
3.4.6 Penentuan pH Optimum aktivitas Enzim Lipase Candida rugosa dalam