Desain Penelitian Tempat dan Waktu Populasi Besar Sampel Identifikasi Variabel Penelitian Definisi Operasional

commit to user 33

BAB III METODE PENELITIAN

A. Desain Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian randomised contolled trial untuk mengetahui pengaruh probiotik terhadap hitung eosinofil total pada anak-anak dengan risiko tinggi alergi.

B. Tempat dan Waktu

Penelitian dilakukan di Poliklinik Rawat Jalan Bagian SMF Ilmu Kesehatan Anak UNS – RSUD dr. Moewardi antara bulan Agustus 2010 – November 2011.

C. Populasi

Populasi target pada penelitian ini adalah anak-anak dengan risiko tinggi alergi yang berusia lebih dari satu tahun dan kurang dari 18 tahun yang berobat jalan di poliklinik. Populasi terjangkau pada penelitian ini adalah anak-anak dengan risiko tinggi alergi yang berusia lebih dari satu tahun dan kurang dari 18 tahun yang berobat jalan di Poliklinik Anak RSUD dr. Moewardi Surakarta antara Agustus 2010 – November 2011. commit to user 34

D. Sampel dan Cara Pemilihan Sampel

Pengambilan sampel dilakukan secara konsekutif.

1. Kriteria Inklusi

a. Semua anak-anak dengan nilai risiko alergi lebih dari tiga pada

pemeriksaan penapisan dengan kartu deteksi dini risiko alergi yang berusia lebih dari satu tahun dan kurang dari 18 tahun yang berobat jalan di poliklinik anak

b. Tidak sedang dalam pengobatan kortikosteroid dalam jangka waktu

minimal seminggu saat penelitian dilaksanakan

c. Orang tua wali anak yang bersangkutan menandatangani informed

consent penelitian

2. Kriteria eksklusi

Penderita mengalami infestasi parasit

E. Besar Sampel

Besar sampel pada penelitian randomised contolled trial ini dihitung berdasarkan rumus rule of thumb, yaitu jumlah subjek penelitian berkisar antara 10 sampai 50 kali jumlah variabel bebas. Banyaknya variabel bebas pada penelitian ini adalah satu yaitu probiotik. Jumlah subjek penelitian yang dibutuhkan minimal 1 x 10 sampai 1 x 50 subjek sehingga diperlukan 10 sampai dengan 50 subjek penelitian. Pada penelitian ini jumlah sampel adalah 30 orang. commit to user 35

F. Identifikasi Variabel Penelitian

Variabel bebas dalam penelitian ini adalah probiotik. Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah hitung eosinofil total skala numerik. Variabel perancu pada penelitian ini adalah adanya infestasi parasit skala nominal.

G. Definisi Operasional

1. Probiotik adalah mikroorganisme yang bila dikonsumsi per oral dalam jumlah tertentu 10 7 - 10 9 cfu mL akan memberikan dampak positif bagi kesehatan manusia. Pada penelitian ini probiotik diberikan tiga kali sehari selama 7 hari sesuai jumlah tertentu yang akan memberikan dampak positif bagi kesehatan manusia. Pada penelitian-penelitian sebelumnya mengenai efek pemberian probiotik terhadap alergi, probiotik yang digunakan pada umumnya adalah dari genus Lactobacillus dan Bifidobacterium, karena kolonisasi yang berkurang dari kedua genus probiotik ini pada saluran pencernaan anak merupakan salah satu penyebab timbulnya reaksi alergi sehingga pada penelitian ini juga menggunakan probiotik dari genus yang sama dengan penelitian- penelitian sebelumnya. 2. Hitung eosinofil total adalah jumlah total eosinofil pada darah tepi yang dihitung dengan kamar hitung, dinyatakan dalam jumlah per mikroliter µL. Cara penghitungan eosinofil total yang dipakai adalah sebagai berikut : dibuat larutan eosin dengan memasukkan 75 ml air suling, 1 ml commit to user 36 formalin 30-40 gas formalin, 10 ml eosin 1 kemudian air suling hingga 100 ml dalam botol gelap tahan sampai 3 minggu ke dalam bejana 100ml. Dengan pipet leukosit berskala 1-11 sampel darah dihisap sampai angka 1, kemudian larutan eosin dihisap sampai angka 11. Setelah dibiarkan selama 10 menit kemudian dikocok selama 3 menit tidak boleh lebih. Tetesan pertama dibersihkan dari mulut pipet lalu diisikan ke dalam kamar hitung. Penghitungan dilakukan dengan kamar Hisel van Burker di bawah mikroskop cahaya menggunakan objektif 16x. Sel eosinofil dihitung pada seluruh kamar hitung termasuk sel yang berada pada sel pembatas, misalnya hasilnya E. Bila volume seluruh kamar hitung adalah 3 x 3 : 110 = 910 dan pengenceran darah 10x, maka jumlah eosinofil total adalah : E x 10 x 109 = E x 11 selµL Munasir, 2007b.

H. Cara Kerja