2. Penimbangan fraksi air ekstrak etanolik beras hitam untuk asam galat
Replikasi 1 g
Replikasi 2 g
Replikasi 3 g
Bobot cawan 12,5746
12,8754 12, 7795
Bobot cawan + fraksi
12,5998 12,9007
12,8050
Bobot cawan + sisa
12,5748 12,9006
12,7797
Bobot fraksi 0,0250
0,0251 0,0253
Lampiran 5. Scanning kontrol asam galat
Lampiran 6. Optimasi penentuan kandungan fenolik total 1. Penentuan OT asam galat
Replikasi 1
OT yang didapat 10 menit
Waktu menit
Absorbansi konsentrasi replikasi 1 pada λ 750 nm 40 μ gml
80 μ gml 120 μ gml
5 0,271
0,509 0,766
10 0,276
0,519 0,778
15 0,276
0,519 0,788
20 0,276
0,519 0,779
25 0,276
0,519 0,778
30 0,276
0,520 0,80
Replikasi 2
Waktu menit
Absorbansi konsentrasi replikasi 2 pada λ 750 nm 40 μ gml
80 μ gml 120 μ gml
5 0,262
0,490 0,762
10 0,266
0,495 0,772
15 0,266
0,495 0,772
20 0,266
0,495 0,773
25 0,267
0,496 0,773
30 0,267
0,495 0,774
OT yang didapat 10 menit
Replikasi 3
Waktu menit
Absorbansi konsentrasi replikasi 3 pada λ 750 nm
40 μ gml 80 μ gml
120 μ gml 5
0,251 0,476
0,742 10
0,258 0,485
0,749 15
0,258 0,486
0,749 20
0,258 0,486
0,750 25
0,258 0,486
0,750 30
0,259 0,487
0,750
OT yang didapat 10 menit 2. Penentuan λ maksimum
a. Spektra asam galat 40 μ gml
b. Spektra asam galat 80 μ gml
c. Spektra asam galat 120 μ gml
Lampiran 7. Penentuan kandungan fenolik total 1. Konsentrasi asam galat
Konsentrasi seri replikasi 1
Konsentrasi stok
,
= 502 μ gml
Seri 1 V1.C1 = V2.C2
2 ml . 502 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 40,16 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
3 ml . 502 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 60,24 μ gml
Seri 3 V1.C1 = V2.C2
4 ml . 502 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 80,32 μ gml
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
5 ml . 502 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 100,4 μ gml
Seri 5 V1.C1 = V2.C2
6 ml . 502 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 120,48 μ gml
Konsentrasi seri replikasi 2
Konsentrasi stok = 500 gml
Seri 1 V1.C1 = V2.C2
2 ml . 500 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 40 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
3 ml . 500 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 60 μ gml
Seri 3 V1.C1 = V2.C2
4 ml . 500 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 80 μ gml
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
5 ml . 500 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 100
μ gml Seri 5
V1.C1 = V2.C2 5 ml . 500 μ gml = 25 ml . C2
C2 = 120 μ gml
Konsentrasi seri replikasi 3
Konsentrasi stok
,
= 506 gml
Seri 1 V1.C1 = V2.C2
2 ml . 506 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 40,48 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
3 ml . 506 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 60,72 μ gml
Seri 3 V1.C1 = V2.C2
4 ml . 506 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 80,96 μ gml
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
5 ml . 506 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 101,2 μ gml
Seri 5 V1.C1 = V2.C2
6 ml . 506 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 121,44 μ gml
Kurva baku asam galat replikasi 1
Konsentrasi μ gml
Absorbansi Persamaan
40,16 0,288
y = 0,006x + 0,055 r = 0,9994
60,24 0,399
80,32 0,511
100,4 0,619
120,48 0,751
Kurva baku asam galat replikasi 2
Konsentrasi μ gml Absorbansi
Persamaan 40
0,268 y = 0,006x + 0,013
r = 0,9997 60
0,393 80
0,506 100
0,626 120
0,758
Kurva baku asam galat replikasi 3
Konsentrasi Absorbansi
Persamaan 40,48
0,257 y = 0,006x + 0,003
r = 0,9996 60,72
0,394 80,96
0,517 101,2
0,655 121,44
0,771 Persamaan yang digunakan adalah y = 0,006x + 0,013
Sampel 1
Bobot sampel = 9,5 mg
=
,
= 950 gml
Absorbansi sampel = 0,581 0,581 = 0,006x + 0,013
x = 94,67 gml
Kandungan fenolik total = x.
= 0,09467 mgml .
, ,
= 4,9826 mg ekuivalen asam galat per gram fraksi
Sampel 2
Bobot sampel = 9,51 mg
=
,
= 951 gml
Absorbansi sampel = 0,609 0,609 = 0,006x + 0,013
x = 99,34 gml
Kandungan fenolik total = x.
0,09934 mgml .
, ,
= 5,2229 mg ekuivalen asam galat per gram fraksi
Sampel 3
Bobot sampel = 9,5 mg
=
,
= 950 gml
Absorbansi sampel = 0,594 0,594 = 0,006x + 0,013
x = 96,83 gml
kandungan fenolik total = x.
0,09683 mgml .
, ,
= 5,0965 mg ekuivalen asam galat per gram fraksi
Absorbansi Kandungan
fenolik μ gml Kandungan
fenolik total mg
Xrata-rata ± SD
Replikasi 1 0,581
94,67 4,9826
5,1007 ± 0,1202 Replikasi 2
0,609 99,34
5,2229
Replikasi 3 0,594
96,83 5,0965
Lampiran 8. Data penimbangan untuk pengujian aktivitas antioksidan DPPH a. Penimbangan DPPH
Replikasi 1 g Replikasi 2 g
Replikasi 3 g Bobot kertas
0,2126 0,2130
0,2129 Bobot kertas + DPPH
0.2283 0.2286
0.2289 Bobot kertas + sisa
0.2126 0.2130
0.2129 Bobot DPPH
0.0157 0.0156
0.016
b. Penimbangan rutin
Replikasi 1 g Replikasi 2 g
Replikasi 3 g Bobot kertas
0,2340 0,2323
0,2434 Bobot kertas + rutin
0.2366 0.2349
0.2461 Bobot kertas + sisa
0.2341 0.2324
0.2435 Bobot zat
0.0025 0.0025
0.0026
c. Penimbangan fraksi air ekstrak etanolik beras hitam
Replikasi 1 g Replikasi 2 g
Replikasi 3 g Bobot cawan
12,4325 12,6273
12,5268 Bobot cawan + fraksi
12,4579 12,6525
12,5524 Bobot cawan + sisa
12,4327 12,6274
12,5270 Bobot fraksi
0,0252 0,0251
0,0254
Lampiran 9. Data konsentrasi bahan untuk pengujian aktivitas antioksidan a. Konsentrasi DPPH
Replikasi 1
BM = 394,33 Mol =
=
, ,
= 0,0398 mmol M =
=
, ,
= 0,398 mM
Replikasi 2
BM = 394,33 Mol =
=
, ,
= 0,0395 mmol M =
=
, ,
= 0,395 mM
Replikasi 3
BM = 394,33 Mol =
=
,
= 0,0405 mmol M =
=
, ,
= 0,405 mM
b. Konsentrasi rutin
Konsentrasi larutan induk
,
= 250 µgmL
Konsentrasi seri replikasi 1 Seri1
V1.C1 = V2.C2 0,5 ml .
250 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 5 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
1 ml . 250 μ gml = 25 ml . C2
C2 = 10 μ gml Seri 3
V1.C1 = V2.C2 1,5 ml .
250 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 15 μ gml
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
2 ml . 250 μ gml = 25 ml . C2
C2 = 20 μ gml
Seri 5 V1.C1 = V2.C2
2,5 ml . 250 μ gml = 25 ml . C2
C2 = 25 μ gml
Konsentrasi larutan induk
,
= 250 µgmL
Konsentrasi seri replikasi 2 Seri 1
V1.C1 = V2.C2 0,5 ml .
250 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 5 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
1 ml . 250 μ gml = 25 ml . C2
C2 = 10 μ gml Seri 3
V1.C1 = V2.C2 1,5 ml.250 μ gml = 25 ml . C2
C2 = 15 μ gml Seri 4
V1.C1 = V2.C2 2 ml .
250 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 20
μ gml Seri 5
V1.C1 = V2.C2 2,5 ml .
250 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 25 μ gml
Konsentrasi larutan induk
,
= 260 µgmL
Konsentrasi seri replikasi 3 Seri1
V1.C1 = V2.C2 0,5 ml .
260 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 5,2 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
1 ml . 250 μ gml = 25 ml . C2
C2 = 10,4 μ gml Seri 3
V1.C1 = V2.C2 1,5 ml .
250 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 15,6 μ gml
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
2 ml . 250 μ gml = 25 ml . C2
C2 = 20,8 μ gml Seri 5
V1.C1 = V2.C2 2,5 ml .
250 μ gml = 25 ml . C2 C2 = 26 μ gml
c. Konsentrasi fraksi air ekstrak etanolik beras hitam
Konsentrasi larutan induk
,
= 1008 μ gml
Konsentrasi seri replikasi 1 Seri1
V1.C1 = V2.C2 0,5 ml .
1008 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 50,4 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
1 ml . 1008 μ gml = 10 ml . C2
C2 = 100,8 μ gml Seri 3
V1.C1 = V2.C2 1,5 ml .
1008 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 151,2 μ gml
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
2 ml . 1008 μ gml = 10 ml . C2
C2 = 201,6 μ gml Seri 5
V1.C1 = V2.C2 2,5 ml .
1008 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 252 μ gml
Konsentrasi larutan induk
,
= 1004 μ gml
Konsentrasi seri replikasi 2 Seri 1
V1.C1 = V2.C2 0,5 ml .
1004 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 50,2 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
1 ml . 1004 μ gml = 10 ml . C2
C2 = 100,4 μ gml Seri 3
V1.C1 = V2.C2 1,5 ml .
1004 μ gml = 10 ml . C2 C2 =
150,6 μ gml Seri 4
V1.C1=V2.C2 2 ml .
1004 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 200,8
μ gml Seri 5
V1.C1 = V2.C2 2,5 ml .
1004 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 251
μ gml
Konsentrasi larutan induk
,
= 1016 μ gml
Konsentrasi seri replikasi 3 Seri 1
V1.C1 = V2.C2 0,5 ml .
1016 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 50,8 μ gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
1 ml . 1016 μ gml = 10 ml . C2
C2 = 101,6 μ gml Seri 3
V1.C1 = V2.C2 1,5 ml .
1016 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 152,4
μ gml Seri 4
V1.C1=V2.C2 2 ml .
1016 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 203,2
μ gml Seri 5
V1.C1 = V2.C2 2,5 ml .
1016 μ gml = 10 ml . C2 C2 = 254 μ gml
Lampiran 10. Scanning larutan a. Scanning pelarut metanol
b. Scanning metanol air 1:1
c. Scanning pelarut etil asetat
d. Scanning pelarut petroleum eter
e. Scanning rutin
f. Scanning asam galat
g. Scanning fraksi air ekstrak etanolik beras hitam 400-600 nm
h. Scanning fraksi air ekstrak etanolik beras hitam 600-800 nm
Lampiran 11. Penentuan λ maksimum dan operating time OT 1. Penentuan λ maksimum
a. Spektra DPPH 0,016 mM
b. Spektra DPPH 0,048 mM
c. Spektra DPPH 0,080 mM
2. Operating time rutin λ = 515 nm Replikasi 1
Kategori