29
Keterangan : a = berat sampel sebelum dikeringkan
b = berat sampel setelah dikeringkan c = kadar protein total
3.3.8 Pemisahan Protein dari Non Protein Nitrogen
Pemisahan protein dari NPN dilakukan dengan mengendapkan protein yang terdapat dalam sampel dengan menggunakan larutan ATA 10. Sampel
yang telah ditimbang dimasukkan ke dalam gelas beker 400 ml. Tambahkan 50 ml aquades dan biarkan selama 30 menit. Tambahkan 10 ml larutan ATA 10 bv.
Biarkan selama 30 menit, kemudian disaring. Cuci endapan yang berisi protein murni dengan menggunakan larutan ATA sebanyak dua kali Katoch, 2011.
3.3.9 Penentuan Kadar N-Protein dan Protein Murni
Penentuan kadar protein murni dapat ditentukan kadarnya setelah proses pemisahan dari NPN. Endapan protein yang diperoleh ditentukan kadarnya
berdasarkan jumlah nitrogen yang dimilikinya dengan metode Kjeldahl, seperti yang dilakukan pada penetapan kadar protein total. Endapan protein sebanyak
1 gram dimasukkan kedalam labu Kjeldahl. Tambahkan 1 gram katalisator selenium dan 25 ml H
2
SO
4
pekat. Perlakuan selanjutnya sama dengan penetapan kadar protein total SNI, 1992.
Kadar N-protein dihitung sesuai dengan rumus yang tercantum pada
Sudarmadji, dkk. 1989 yaitu:
N-protein = ml HCl sampel – blanko
berat sampel g x 1000 x N HCl x 14,007 X Fp x 100
Keterangan: N HCl = Normalitas HCl hasil pembakuan
30
14,007 = Massa atom nitrogen Fp
= Faktor pengenceran Kadar protein murni selanjutnya dihitung dengan mengalikan kadar
nitrogen dengan faktor konversi. Kadar Protein Murni = N-protein x faktor konversi
Keterangan: Faktor konversi pada pakkat = 6,25.
Penentuan kadar protein murni ini dilakukan terhadap sampel “wet basis”, kemudian kadar protein murni terhadap sampel “dry basis’ diperoleh secara
matematis dengan mengkonversikan kadar protein murni pada sampel “wet basis” menjadi kadar protein murni pada sampel “ dry basis”. Perhitungan kadar
protein murni terhadap sampel “dry basis” sama seperti perhitungan kadar pada protein total.
3.3.10 Penentuan Kadar Non Protein Nitrogen
Penentuan kadar NPN dilakukan sesuai prosedur yang tercantum pada Katoch 2011. Kadar NPN dihitung dengan mengurangi kadar N-total dengan
kadar N-protein. Kadar NPN yang terdapat dalam bahan yang dihitung dengan rumus sebagai berikut:
NPN = N-total - N-protein Kadar NPN terhadap N-total dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Kadar NPN terhadap N-total = NPN
N-total x 100
3.3.11 Analisis Data Secara Statistik
