27
3.4.2. Cara Kerja 3.4.2.1. Persiapan Penelitian
Alat
Alat-alat yang digunakan adalah satu unit
spektrofotometer UV-Visible Hitachi U2910, seperangkat computer Hp, Windows Xp, tabung reaksi, pipet Nichipet
Ex, stamper, alu, gelas beker, rak tabung reaksi, vortex SRS710HA Advantex, dan mesin sentrifuge Hettich EBA
21.
Bahan
Bahan uji yang digunakan adalah amoksisilin standar, 73 sampel tablet amoksisilin yang dijual dari Pasar
Pramuka, aquades.
3.4.2.2. Pembuatan larutan Amoksisilin Standar
Pembuatan larutan
amoksisilin standar
ini menggunakan metode sesuai yang telah ditetapkan
Farmakope
14
dengan sedikit modifikasi, yaitu amoksisilin standar sebanyak 50 mg dimasukkan ke dalam tabung reaksi.
Tambahkan aquades sebanyak 10 ml ke dalam tabung. Kemudian lakukan homogenisasi dengan vortex. Langkah
selanjutnya, lakukan sentrifugasi dengan kecepatan 2000 rpm selama 3 menit
.
Sentrifugasi dimaksudkan agar partikel yang tidak larut bisa mengendap dan tidak menjadi pengganggu
pada saat pembacaan panjang gelombang serapan maksimum pada spektrofotometer Uv-Vis.
3.4.2.3. Pembuatan Larutan Amoksisilin Sampel
Pembuatan larutan
amoksisilin sampel
ini menggunakan metode sesuai yang telah ditetapkan
Farmakope
14
dengan sedikit modifikasi, yaitu tablet amoksisilin digerus dengan stamper sampai halus. Lalu
ambil sekitar 50 mg dari serbuk amoksisilin tersebut. Masukkan ke dalam tabung reaksi. Tambahkan aquades
28
sampai 10 ml lalu homogenisasi dengan vortex. Langkah selanjutnya, lakukan sentrifugasi dengan kecepatan 2000 rpm
selama 3 menit
.
Sentrifugasi dimaksudkan agar partikel yang tidak larut bisa mengendap dan tidak menjadi pengganggu
pada saat pembacaan panjang gelombang serapan maksimum pada spektrofotometer Uv-Vis.
3.4.2.4. Persiapan alat Spektrofotometer UV-Visibel
Penggunaan spektrofotometer UV-Vis ini berdasarkan metode yang telah ditetapkan oleh Clarke.
23
Secara singkat
penggunan spektrofotometer uv-vis sebagai berikut:
Nyalakan mesin spektrofotometer uv-vis yang telah terhubung dengan komputer. Spektrofotometer uv-vis ini
memerlukan waktu 30 menit setelah dinyalakan sebelum digunakan untuk mengukur panjang gelombang larutan.
Setelah 30 menit mesin menyala, lakukan pengaturan metoda yang akan dipilih, dibuat kurva serapannya pada panjang
gelombang 200-300 nm. Sebelum melakukan pengukuran, dilakukan penetapan base line. Penetapan base line dilakukan
menggunakan blanko, dalam hal ini blanko yang digunakan peneliti adalah aquades.
3.4.2.5. Pembacaan Panjang Gelombang Amoksisilin standar