F. Siklus Sel
Gambar 7. Siklus Sel Best, 2006
Siklus sel dapat dibagi menjadi empat fase yaitu fase M, fase G
B
1
B
, fase S, dan fase G
B
2
B
. Siklus sel dimulai dari fase M yang merupakan fase mitosis dimana sel akan mengalami pembelahan. Fase G
B
1
B
merupakan growth phase yang pertama, pada fase ini terjadi sintesis protein dan pertumbuhan sel untuk memperoleh
ukuran sel yang normal sebelum membelah menjadi dua secara mitosis. Fase S merupakan fase terjadinya sintesis DNA replikasi DNA dalam persiapan
pembelahan sel. Fase G
B
2
B
ditandai dengan perbaikan DNA yang rusak pada saat replikasi DNA, dan terjadi persiapan untuk mitosis selanjutnya. Pada akhir fase
G
B
1
B
, terdapat fase G
B B
yang merupakan fase istirahat dalam siklus sel Best, 2006. Jika sebuah sel menerima sinyal untuk membelah, sel itu biasanya akan
menyelesaikan siklusnya dan membelah. Tetapi jika sel itu tidak menerima sinyal untuk membelah, sel akan keluar dari siklus dan beralih ke keadaan tidak
membelah yang disebut fase G
B B
. PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
G. Toksisitas
Toksisitas merupakan kemampuan suatu zat menyebabkan kerusakan Katzung, 1989. Ketoksikan akut adalah derajat efek toksik sesuatu senyawa
yang terjadi dalam waktu singkat setelah pemberiannya dalam dosis tunggal. Batasan waktu singkat disini adalah rentang waktu selama 24 jam setelah
pemberian senyawa. Tujuan utama uji ketoksikan akut adalah untuk menetapkan potensi ketoksikan akut yang berupa tolok ukur ketoksikan kuantitatif
LD
B
50
B
LC
B
50
B
dan tolok ukur ketoksikan kualitatif gejala klinis, wujud, dan mekanisme efek toksik.
Dalam metode BST, yang ditetapkan adalah tolok ukur ketoksikan kuantitatif yaitu LC
B
50
B
. LC
B
50
B
Lethal Concentration 50 merupakan konsentrasi yang dapat menyebabkan kematian lima puluh persen hewan uji. Menurut Meyer
et al. 1982, apabila harga LC
B
50
B
1000 µgml maka senyawa tersebut dapat dikatakan bersifat toksik.
H. Kromatografi Lapis Tipis KLT
Kromatografi lapis tipis KLT merupakan metode pemisahan suatu senyawa berdasarkan kelarutannya. Lapisan yang dipakai untuk pemisahan terdiri
atas bahan-bahan berbutir fase diam, ditempatkan pada penyanggah berupa pelat gelas, logam, atau lapisan yang cocok. Campuran yang akan dipisahkan berupa
larutan yang ditotolkan sehingga membentuk bercak atau pita. Setelah itu pelat atau lapisan dimasukkan kedalam bejana tertutup rapat yang berisi larutan
pengembang yang cocok. Pemisahan terjadi selama perambatan kapiler pengembangan Stahl, 1973.
KLT dapat dipakai dengan dua tujuan, yaitu yang pertama dapat dipakai sebagai metode untuk mencapai hasil kualitatif, kuantitatif, atau preparatif.
Sedangkan yang kedua dapat dipakai untuk menjajaki sistem pelarut dan sistem penyangga yang sesuai dengan sifat senyawa Gritter, Bobbitt, Schwarting,
1991. Metode ini memiliki beberapa keuntungan, yaitu hanya memerlukan perlengkapan yang sedikit, menggunakan waktu yang singkat untuk
menyelesaikan analisis, memerlukan jumlah cuplikan yang sangat sedikit, hasil palsu yang disebabkan oleh komponen sekunder tidak mungkin terjadi, dan
penanganannya sederhana Stahl, 1973.
I. Landasan Teori
Brokoli Brassica oleracea var. Italica merupakan salah satu jenis sayuran yang memiliki aktivitas antikanker. Hal ini disebabkan antara lain oleh
adanya alil isotiosianat dalam tanaman brokoli, alil isotiosianat bersifat sebagai antikanker karena dapat menginduksi jalur apoptosis serta dapat menghentikan
pertumbuhan sel pada fase M dalam siklus hidup sel. Metode BST digunakan untuk pengujian toksisitas akut senyawa yang
memiliki aktivitas sebagai antikanker menggunakan hewan uji larva artemia. Larva artemia digunakan karena memiliki kesamaan sistem enzim dengan
mamalia, misalnya tipe DNA-dependent RNA polymerase, dan ouabaine sensitive
Na
P
+
P
dan K
P
+
P
dependent ATPase. Selain itu larva artemia yang berumur 48 jam PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
memiliki sensitivitas maksimal terhadap ekstrak yang memiliki aktivitas sitotoksik. Hubungan antara isotiosianat dengan kedua sistem enzim ini yaitu
isotiosianat dapat menghambat aktifitas Na
P
+
P
K
P
+
P
-ATPase. Aktivitas alil isotiosianat dalam menginduksi apoptosis dan menghentikan
siklus hidup sel, menyebabkan brokoli sangat mungkin bersifat toksik terhadap larva artemia. Oleh karena itu, dalam uji BST senyawa antikanker dalam brokoli
dapat teramati dengan menghitung jumlah kematian larva artemia. Selanjutnya dapat dianalisis untuk mengetahui nilai LC
B
50
B
.
J. Hipotesis
Kategori