19
BAB III METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan metode eksperimental experimental research, yang meliputi pengumpulan bahan tumbuhan,
identifikasi bahan tumbuhan, pembuatan simplisia, karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak dan pengujian antibakteri ekstrak etanol,
fraksi n-hesana dan etilasetat daun mindi Melia azedarach L.. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Framakognosi dan Laboratorium Mikrobiologi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Medan.
3.1 Alat- alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah aluminium foil, blender National, timbangan analitik Mettler Toledo, alat-alat gelas, alat tanur
Nabertherm, Kurs Porselen, cawan beralas datar, rotary evaporator, penangas air, desikator, oven Memmert, autoklaf Fisons, inkubator Memmert,
mikroskop, jarum ose, lampu bunsen, cawan petri, jangka sorong, pinset, pipet mikro Eppendorf, Spektrofotometer visibel Dynamica Halo Vis-10 dan
Laminar Air Flow Cabinet Astec HLF 1200 L.
3.2 Bahan-bahan
Bahan-Bahan kimia pro-analisa yang digunakan adalah etilasetat, n- heksan, raksa II klorida, kalium iodida, iodium, bismut III nitrat, asam nitrat
pekat, α-naftol, besi III klorida, timbal II asetat, natrium hidroksida, asam klorida pekat, asam sulfat pekat, asam asetat anhidrat, kloralhidrat, toluena,
Universitas Sumatera Utara
20 kloroform, etanol, eter, metanol, isopropanol dan serbuk magnesium kecuali
etanol dan air suling. Tumbuhan yang digunakan adalah daun mindi Melia azedarach L.. Bakteri yang digunakan adalah bakteri Staphylococccus aureus
ATCC 6538 dan Escherichia coli ATCC 8939.
3.3 Penyiapan Bahan Tumbuhan
Penyiapan bahan tumbuhan meliputi pengumpulan bahan tumbuhan, identifikasi bahan tumbuhan dan pembuatan simplisia daun mindi Melia
azedarach L.
3.3.1 Pengumpulan bahan tumbuhan
Pengumpulan bahan dilakukan secara purposif yaitu diambil dari satu daerah saja tanpa membandingkan dengan tumbuhan yang sama di daerah lain.
Bahan tumbuhan yang digunakan adalah daun mindi Melia azedarach L. yang diperoleh dari Jalan Berdikari, Kelurahan Padang Bulan Selayang, Kecamatan
Medan Baru, Provinsi Sumatera Utara.
3.3.2 Identifikasi bahan tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan oleh Lembaga Imu Pengetahuan Indonesia LIPI Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor Jalan Raya Jakarta-Bogor
km.46 Cibinong, Indonesia. Hasil identifikasi tumbuhan dapat dilihat pada Lampiran 01, halaman 45.
3.3.3 Pembuatan simplisia
Pembuatan simplisia daun mindi dilakukan dengan cara: daun yang muda dan tua yang masih segar dibersihkan dari kotoran yang melekat kemudian
dicuci bersih, ditiriskan dan ditimbang berat basahnya. Daun tersebut dikeringkan dalam lemari pengering pada suhu 40-60
o
C sampai simplisia
Universitas Sumatera Utara
21 menjadi rapuh diremas menjadi hancur dan ditimbang berat keringnya,
kemudian daun mindi yang telah kering diserbuk menggunakan blender, dimasukkan dalam wadah plastik yang tertutup rapat dan disimpan pada suhu
kamar.
3.4. Pembuatan Larutan Pereaksi 3.4.1. Pereaksi Mayer
Kategori