Efek Inotropik dan Kronotropik Ekstrak Etanol Daun Afrika (Vernonia amygdalina Delile) Dalam Larutan Krebs Henseleit Dengan dan Tanpa Kalsium Pada Isolat Jantung Tikus

Lampiran 2 Gambar tumbuhan

Tumbuhan daun Afrika

Lampiran 3Gambar alat, bahan, dan objek penelitian

Alat Langendorff

Injeksi Heparin

Injeksi Digoksin

Lampiran 4 Bagan penelitian

Ekstrak Etanol Daun Afrika

Karakterisasi Skrining Fitokimia Uji Efek Inotropik dan Kronotropik

Alkaloid Flavonoid Glikosida Saponin Tanin

Triterpenoid/Steroid Glikosida Jantung PK air

Lampiran 5 Perhitungan penetapan kadar air EEDA

a. Berat sampel = 2,071g Volume air = 0,15 ml Kadar air =0,15

2,071 � 100% = 7,243%

b. Berat sampel = 2,075 g Volume air = 0,15 ml Kadar air = 0,15

2,075 x 100% = 7,229%

c. Berat sampel = 2,070 g Volume air = 0,15 ml Kadar air = 0,15

2,075 x 100% = 7,246%

Kadar air rata-rata = (7,243+7,229+7,246)%

3 = 7,239%

No Berat sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml)

1 2,071 1,85 2,00

2 2,075 2,00 2,15

3 2,070 2,15 2,3

Kadar air ekstrak = volume air

Lampiran 6 Data hasil uji statistik

Descriptives persen peningkatan kontraktilitas

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Minimum Maximum Lower

Bound

Upper Bound

EEDA 1 MG 3 54,67 21,032 12,143 2,42 106,91 33 75 EEDA 0,5 MG 3 21,67 9,452 5,457 -1,81 45,15 11 29 EEDA 0,5 MG

Ca free

3 -2,67 10,116 5,840 -27,80 22,46 -9 9

EEDA 1 MG Ca free

3 -7,00 17,776 10,263 -51,16 37,16 -21 13

digoksin 0,1 mg

3 90,67 17,926 10,349 46,14 135,20 70 102

digoksin 0,1 mg Ca free

3 -13,67

2,082 1,202 -18,84 -8,50 -16 -12

Total 18 23,94 40,580 9,565 3,76 44,12 -21 102

ANOVA persen peningkatan kontraktilitas

Sum of

Squares Df Mean Square F Sig.

Between Groups 25443,611 5 5088,722 23,934 ,000 Within Groups 2551,333 12 212,611

Total 27994,944 17

Multiple Comparisons persen peningkatan kontraktilitas

Tukey HSD

(I) variasi dosis (J) variasi dosis

Mean Difference (I-J)

Std. Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound

EEDA 1 MG EEDA 0,5 MG 33,000 11,905 ,131 -6,99 72,99

EEDA 0,5 MG Ca free

EEDA 1 MG Ca free

61,667* 11,905 ,002 21,68 101,66

digoksin 0,1 mg -36,000 11,905 ,087 -75,99 3,99

digoksin 0,1 mg Ca free

68,333* 11,905 ,001 28,34 108,32

EEDA 0,5 MG EEDA 1 MG -33,000 11,905 ,131 -72,99 6,99 EEDA 0,5 MG Ca

free

24,333 11,905 ,374 -15,66 64,32

EEDA 1 MG Ca free

28,667 11,905 ,227 -11,32 68,66

digoksin 0,1 mg -69,000* 11,905 ,001 -108,99 -29,01 digoksin 0,1 mg

Ca free

35,333 11,905 ,095 -4,66 75,32

EEDA 0,5 MG Ca free

EEDA 1 MG -57,333* 11,905 ,004 -97,32 -17,34 EEDA 0,5 MG -24,333 11,905 ,374 -64,32 15,66 EEDA 1 MG Ca

free

4,333 11,905 ,999 -35,66 44,32

digoksin 0,1 mg -93,333* 11,905 ,000 -133,32 -53,34 digoksin 0,1 mg

Ca free

11,000 11,905 ,933 -28,99 50,99

EEDA 1 MG Ca free

EEDA 1 MG -61,667* 11,905 ,002 -101,66 -21,68 EEDA 0,5 MG -28,667 11,905 ,227 -68,66 11,32 EEDA 0,5 MG Ca

free

-4,333 11,905 ,999 -44,32 35,66

digoksin 0,1 mg -97,667* 11,905 ,000 -137,66 -57,68 digoksin 0,1 mg

Ca free

6,667 11,905 ,992 -33,32 46,66

digoksin 0,1 mg EEDA 1 MG 36,000 11,905 ,087 -3,99 75,99 EEDA 0,5 MG 69,000* 11,905 ,001 29,01 108,99 EEDA 0,5 MG Ca

free

93,333* 11,905 ,000 53,34 133,32

EEDA 1 MG Ca free

97,667* 11,905 ,000 57,68 137,66

digoksin 0,1 mg Ca free

104,333* 11,905 ,000 64,34 144,32

digoksin 0,1 mg Ca free

EEDA 1 MG -68,333* 11,905 ,001 -108,32 -28,34

EEDA 0,5 MG -35,333 11,905 ,095 -75,32 4,66

EEDA 0,5 MG Ca free

EEDA 1 MG Ca free

-6,667 11,905 ,992 -46,66 33,32

digoksin 0,1 mg -104,333* 11,905 ,000 -144,32 -64,34

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Descriptives persen peningkatan denyut jantung

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Minimum Maximum Lower

Bound

Upper Bound

EEDA 1 MG 3 107,00 26,230 15,144 41,84 172,16 83 135 EEDA 0,5 MG 3 61,33 6,658 3,844 44,79 77,87 57 69 EEDA 0,5 MG

Ca free

3 -41,00 25,865 14,933 -105,25 23,25 -69 -18

EEDA 1 MG Ca free

3 -24,00 64,094 37,005 -183,22 135,22 -62 50

Digoksin 0,1 mg

3 -79,33 18,502 10,682 -125,30 -33,37 -98 -61

digoksin 0,1 mg Ca free

3 -10,33 2,517 1,453 -16,58 -4,08 -13 -8

Total 18 2,28 69,970 16,492 -32,52 37,07 -98 135

ANOVA persen peningkatan denyut jantung

Sum of Squares Df Mean Square F Sig.

Between Groups 71511,611 5 14302,322 14,649 ,000 Within Groups 11716,000 12 976,333

Total 83227,611 17

Multiple Comparisons persen peningkatan denyut jantung

Tukey HSD

(I) variasi dosis (J) variasi dosis

Mean Difference (I-J)

Std. Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound

EEDA 1 MG EEDA 0,5 MG 45,667 25,513 ,506 -40,03 131,36

EEDA 0,5 MG Ca free

148,000* 25,513 ,001 62,31 233,69

EEDA 1 MG Ca free

131,000* 25,513 ,003 45,31 216,69

Digoksin 0,1 mg 186,333* 25,513 ,000 100,64 272,03

digoksin 0,1 mg Ca free

117,333* 25,513 ,006 31,64 203,03

EEDA 0,5 MG EEDA 1 MG -45,667 25,513 ,506 -131,36 40,03 EEDA 0,5 MG Ca

free

102,333* 25,513 ,017 16,64 188,03

EEDA 1 MG Ca free

85,333 25,513 ,051 -,36 171,03

Digoksin 0,1 mg 140,667* 25,513 ,001 54,97 226,36 digoksin 0,1 mg

Ca free

71,667 25,513 ,123 -14,03 157,36

EEDA 0,5 MG Ca free

EEDA 1 MG -148,000* 25,513 ,001 -233,69 -62,31 EEDA 0,5 MG -102,333* 25,513 ,017 -188,03 -16,64 EEDA 1 MG Ca

free

-17,000 25,513 ,983 -102,69 68,69

Digoksin 0,1 mg 38,333 25,513 ,669 -47,36 124,03 digoksin 0,1 mg

Ca free

-30,667 25,513 ,828 -116,36 55,03

EEDA 1 MG Ca free

EEDA 1 MG -131,000* 25,513 ,003 -216,69 -45,31 EEDA 0,5 MG -85,333 25,513 ,051 -171,03 ,36 EEDA 0,5 MG Ca

free

17,000 25,513 ,983 -68,69 102,69

Digoksin 0,1 mg 55,333 25,513 ,318 -30,36 141,03 digoksin 0,1 mg

Ca free

-13,667 25,513 ,993 -99,36 72,03

Digoksin 0,1 mg EEDA 1 MG -186,333* 25,513 ,000 -272,03 -100,64 EEDA 0,5 MG -140,667* 25,513 ,001 -226,36 -54,97 EEDA 0,5 MG Ca

free

-38,333 25,513 ,669 -124,03 47,36

EEDA 1 MG Ca free

-55,333 25,513 ,318 -141,03 30,36

digoksin 0,1 mg Ca free

-69,000 25,513 ,145 -154,69 16,69

Ca free EEDA 0,5 MG -71,667 25,513 ,123 -157,36 14,03

EEDA 0,5 MG Ca free

30,667 25,513 ,828 -55,03 116,36

EEDA 1 MG Ca free

13,667 25,513 ,993 -72,03 99,36

Digoksin 0,1 mg 69,000 25,513 ,145 -16,69 154,69

DAFTAR PUSTAKA

Anonim. (2010)

Diakses pada tanggal 13 Agustus 2014.

Arini, S., dan Nafrialdi. (2011). Obat Gagal Jantung. Dalam Farmakologi dan Terapi. Edisi 5. Editor: Sulistia Gan Gunawan. Jakarta: FK UI. Halaman: 299-311.

Atangwho, I.J., Ebong, P.E., Egbung, G.E., dan Obi, A.U. (2010). Extract of Vernonia amygdalina Del. (African Bitter Leaf) Can Reverse Pancreatic Cellular Lesion after Alloxan Damage in the Rat. Australian Journal of Basic and Applied Sciences. 4(5): 711-716.

Akpaso, M.I., Atangwho, I.J., Akpantah, A., Fischer V.A., Igiri A.O., dan Ebong, P.E. (2011). Effect of Combined Leaf Extract of Vernonia amygdalina (Bitter Leaf) and Gongronema latifolium (Utazi) on the Pancreatic β-cells of Streptozotocin-Induced Diabetic Rats. British Journal of Medicineand Medical Research. 1(1): 24-24.

DeBeasi, L.C. (2012). Prosedur Diagnostik Penyakit Kardiovaskular. Dalam Patofisiologi. Volume 1. Sylvia A. Price dan Lorraine M. Wilson. Jakarta : EGC. Halaman : 533, 539.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 297-326, 333-337.

Depkes RI. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 1, 9-10.

Ginting, R.A. (2012). Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Uji Antimutagenik Ekstrak Etanol Daun Afrika (Vernonia amygdalina Del. pada Mencit Jantan Menggunakan Metode Mikronukleus. Skripsi. Medan : Fakultas Farmasi USU.

Gresham, L.J., Jetaime, R., Ernest, B.I. (2008). Vernonia amygdalina: Anticancer Activity, Authentication, and Adulteration Detection. International Journal of Environmental Research and Public Health. 5(5): 342 348. Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisa

Tumbuhan. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 147, 259.

Henry, O., dan Wilson, S.C. (2007). Pengobatan Farmakologis Gagal Jantung. Dalam Goodman dan Gilman Dasar Farmakologi Terapi. Volume 1. Editor: Joel G. Hardman dan Lee E.Limbird. Jakarta: EGC. Halaman: 877-886, 890.

Ibrahim, G., Abdurahman, E.M., dan Katayal, U.A., (2004). Pharmacognostic Studies on the Leaves of Vernonia amygdalina Del. (Asteraceae). Nigerian Journal of Natural Products and Medicine. 8:8-10.

Ijeh , I.I., dan Chukwunonso, E.C.C.E. (2010). Current Perspectives on The Medicinal Potentials of Vernonia amygdalina Del. Journal of Medicinal Plant Research. 5(7): 1051 – 1061.

Imaligy, E.U., (2014). Gagal Jantung pada Geriatri. Cermin Dunia Kedokteran 212. 41(1): 19-24

Majid, A. (2005). Fisiologi Kardiovaskular. Edisi 2. Medan: Bagian Fisiologi Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara. Halaman: 39.

Mycek, M.J., Richard, A.H., dan Pamela, C.C. (2001). Farmakologi Ulasan Bergambar. Edisi 2. Jakarta: Widya Medika. Halaman: 155-163.

Njan, A.A., Adza, B., Agaba, A.G., Byamgaba, D., Diaz, S., dan Bansberg, D.R. (2008). The Analgesic and Antiplasmodial Activities and Toxicology of Vernonia amygdalina. J.Med. Food. 11: 574-581.

Niazmand, S., dan Saberi, Z. (2010). The Chronotropic and Inotropic Effects of Aqueous-Ethanolic Extract of Achillea Millefolium on Rat’s Isolated Heart. Pharmacologyonline. 3: 792, 795.

Nwanjo, H.U., dan Nwokoro, E.A. (2004). Antidiabetic and Biochemical Effects of Aqueous Extract of Vernonia amygdalina Leaf In Normoglycaemic and Diabetic Rats. J.Innov. Life Sci. 7: 6-10.

Obikeze, K. (2004). Cardiovascular Effects of Leonotis leonurus Extracts in Normotensive Rats and in Isolated Perfused Rat Heart. Tesis. Republic of South Afrika. School of Pharmacy. University of the Western Cape. Halaman: 36, 81.

Ojiako, O.A., dan Nwanju, H.U. (2006). Is Vernonia amygdalina hepatotoxic or hepatoproctetive? Response From Biochemical and Toxicity Studies in Rats. African Journal of Biotechnology.5(18): 1648-165.

Oyugi, D.A., Luo, X., Lee, K.S., Hill, B., dan Izevbigie, E.B. (2009). Activity Markers of The Anti-Breast Carcinoma Cell Growth Fractions of Vernonia amygdalina Extracts. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. Doi. 10: 3181.

Parsaee, H., Shafei, M.N., Boskabady, M.H. (2006). Effects of Hydro-Ethanolic of Berberis vulgaris Fruit on Rabbit Isolated Heart. DARU. 14(6): 212. Pinem, A.F. (2012). Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Uji

Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Afrika (Vernonia amygdalina Del.) Skripsi. Medan : Fakultas Farmasi USU.

Sembiring, I.G., (2013). Efek Inotropik dan Kronotropik Ekstrak Etanol Daun Afrika (Vernonia amygdalina Delile) Pada Isolat Jantung Tikus. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi USU.

Setiawan, A. (2012). Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Daun Afrika (Vernonia amygdalina Del. )Terhadap Tikus Jantan Galur Wistar. Skripsi. Medan : Fakultas Farmasi USU.

Sherwood, L. (2011). Fisiologi Manusia. Edisi VI. Jakarta. EGC. Halaman: 333 338.

WHO. (1998). Quality Control Methods For Medicinal Plant Materials. Geneva : WHO . Halaman31-33.

WHO. (2013). pada tanggal 22 September 2014.

Yeap, S.K., Wan, Y.H, Boon, K.B., Woon, S.L., Huynh, K., Abdul, H.N.Y., Noorjahan, B.A., (2010). Vernonia amygdalina, an Ethnoveterinary and Ethnomedical Used Green Vegetable with Multiple Bioactivities. Journal of Medicinal Plant Research. 4(25): 2787-2812.

BAB III

METODE PENELITIAN 3.1 Jenis Penelitian

Metode yang digunakan dalam penelitian adalah metode eksperimental. Penelitian eksperimental bertujuan untuk mengetahui pengaruh variabel bebas terhadap variabel terikat dalam kondisi yang terkontrol ketat. Penelitian ini meliputi pengumpulan dan penyiapan bahan, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak etanol dan pengujian efek inotropik dan kronotropik menggunakan alat Langendorff dengan menggunakan larutan Krebs-Henseleit yang tidak mengandung kalsium di dalam komposisinya.

3.2 Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian terdiri dari alat bedah, alat-alat gelas, alat Langendorff (AD instrument), benang cut gut, cawan petri, cawan porselen, jarum suntik, mortir dan stamfer, neraca analitis (Boeco), dan timbangan tikus (Presica).

3.3 Bahan

Bahan tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini adalah daun afrika (Vernonia amygdalina Del). Bahan kimia yang digunakan adalah etanol 96% (teknis), pereaksi ; Bouchardat; Dragendorff; Mayer; besi (III) klorida 4,5% b/v; Molish; timbal (II) asetat 0,4 M; asam sulfat 6 N; asam klorida 2 N; Lieberman-Burchard; toluen; kloroform; kloralhidrat; asam klorida; DMSO; NaCl 0,9%; larutan fisiologis Krebs-Henseleit (NaCl 6,9 g; KCl 0,35 g; NaHCO3 2,1 g; MgSO4.7H2O 0,29 g; KH2SO4 0,16 g; CaCl2 0,28 g; glukosa 1 g; pH 7,4);

karbogen (campuran 95% O2 + 5% CO2); digoxin injeksi; heparin injeksi, ketamin injeksi; dan akuades.

3.4 Hewan Percobaan

Hewan yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus putih jantan 150-200 g dengan usia sekitar 2-3 bulan. Sebelum penelitian dimulai, terlebih dahulu tikus dipelihara selama 2 minggu dengan kondisi lingkungan, makanan, suhu, dan minuman yang sama.

3.5 Penyiapan Sampel

3.5.1 Pengambilan,pengolahan sampel, dan pembuatan EEDA

Pengambilan, pengolahan, dan pembuatan EEDA telah dilakukan oleh Indra Gunanta Sembiring (2013) dalam penelitian efek inotropik dan kronotropik ekstrak etanol daun Afrika (Vernonia amygdalina Delile) pada isolat jantung tikus. Pada penelitian ini digunakan tumbuhan yang sama sehingga pengolahan sampel tidak dilakukan kembali. Pengambilan sampel dilakukan secara purposif tanpa membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Sampel diambil dari Taman Tanaman Obat yang berada di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, Pintu 4 Jl. Tridharma Universitas Sumatera Utara.

3.6 Pemeriksaam Karakteristik EEDA 3.6.1 Penetapan kadar air

Penetapan kadar air dilakukan menurut metode Azeotropi (destilasi toluena). Alat terdiri dari labu alas bulat 500 mL, pendingin, tabung penyambung, tabung penerima 5 mL berskala 0,05 mL, alat penampung dan pemanas listrik.

Cara kerja :

Dimasukkan 200 mL toluena dan 2 mL air suling ke dalam labu alas bulat, lalu didestilasi selama 2 jam. Setelah itu, toluena dibiarkan mendingin selama 30 menit, dan dibaca volume air pada tabung penerima dengan ketelitian 0,05 mL. Kemudian ke dalam labu tersebut dimasukkan 5 g ekstrak yang telah ditimbang seksama, labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluena mendidih, kecepatan tetesan diatur lebih kurang 2 tetes tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan tetesan dinaikkan hingga 4 tetes tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluena. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluena memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 mL. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO, 1998).

3.7Skrining Fitokimia EEDA 3.7.1 Pemeriksaan alkaloida

Ekstrak ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan lalu disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut:

a. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Mayer akan terbentuk endapan berwarna putih atau kuning

b. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Bouchardat akan terbentuk endapan berwarna coklat-hitam

c. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Dragendorff akan terbentuk endapan berwarna merah atau jingga

Alkaloida dinyatakan positif jika terjadi endapan atau paling sedikit dua atau tiga dari percobaan di atas (Depkes RI., 1995).

3.7.2 Pemeriksaan flavonoida

Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 ml metanol lalu direfluks selama 10 menit, disaring panas-panas melalui kertas saring berlipat, filtrat diencerkan dengan 10 ml air suling. Setelah dingin ditambah 5 ml eter minyak tanah, dikocok hati-hati, didiamkan. Lapisan metanol diambil, diuapkan pada temperatur 40oC. Sisa dilarutkan dalam 5 ml etil asetat, disaring.

Cara Percobaan:

a. satu ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan dalam 1-2 ml etanol 96%, ditambahkan 0,5 g serbuk seng dan 2 ml asam klorida 2 N, didiamkan selama satu menit. Ditambahkan 10 ml asama klorida pekat, jika dalam waktu 2-5 menit terjadi warna merah intensif menunjukkan adanya flavonoida (glikosida-3-flavonol)

b. satu ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan dalam 1 ml etanol 96%, ditambahkan 0,1 g magnesium dan 10 ml asam klorida pekat, terjadi warna merah jingga sampai merah ungu menunjukkan adanya flavonoida (Depkes RI., 1995).

3.7.3 Pemeriksaan saponin

Sebanyak 0,5 g sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi

1-10 cm. Ditambahkan1 tetes larutan asam klorida 2 N, bila buih tidak hilang menunjukkan adanya saponin (Depkes RI., 1995).

3.7.4 Pemeriksaan tanin

Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 ml air suling, disaring lalu filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Diambil 2 ml larutan lalu ditambahkan 1 sampai 2 tetes pereaksi besi (III) klorida. Terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966). 3.7.5 Pemeriksaan steroida/triterpenoida

Sebanyak 1 g sampel dimaserasi dengan 20 ml eter selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa dalam cawan penguap ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbul warna ungu atau merah kemudian berubah menjadi hijau biru menunjukkan adanya steroida/triterpenoida (Farnsworth, 1966).

3.7.6 Pemeriksaan glikosida

Sampel ditimbang sebanyak 3 g kemudian disari dengan 30 ml campuran 7 bagian volume etanol 96% dan 3 bagian volume air suling, selanjutnya ditambahkan 10 ml HCl 2 N, direfluks selama 10 menit, didinginkan dan disaring. Pada 30 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan selama 5 menit lalu disaring. Filtrat disari sebanyak 3 kali, tiap kali dengan 20 ml campuran 3 bagian volume kloroform dan 2 bagian volume isopropanol. Diambil lapisan air kemudian ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molisch, ditambahkan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat terbentuk cincin warna ungu pada batas kedua cairan menunjukkan adanya ikatan gula (Depkes RI., 1995).

3.7.7 Pemeriksaaan glikosida jantung Ekstrak disari dengan 30 ml campuran 7 bagian volum etanol (95%) dan 3 bagian volume air dalam alat pendingin balik selama 10 menit, dinginkan, saring. Pada 2ml filtrat tambahkan 55 ml dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, kocok, diamkan selama 5 menit, saring. Sari filtrat 3 kali, tiap kali dengan 20 ml campuran 3 bagian volume kloroform dan 2 bagian volume isopropanolol. Pada kumpulan sari tambahkan natrium sulfat anhidrat, saring, dan uapkan pada suhu tidak lebih dari 50º. Larutkan sisa dalam 2 ml metanol.

Cara percobaan :

Uapkan 0,2 ml larutan percobaan di atas tangas air. Larutkan sisa dengan 3 ml asam asetat dengan sedikit pemanasan, dinginkan. Teteskan besi (III) klorida 0,3 M, kemudian tambahkan hati-hati campuran 3 ml asam sulfat dan 1 tetes besi (III) klorida 0,3 M, terbentuk cincin berwarna merah coklat pada batas cairan, setelah beberapa menit lapisan di atas cincin berwarna biru hijau, menunjukkan adanya glikosida dengan glikon 2-desoksi-gula (reaksi Keller-Killiani) (Depkes RI., 1995).

3.8 Pembuatan Larutan Krebs-Henseleit

Timbang sebanyak 6,9 g NaCl; 0,35 g KCl; 2,1 g CaCl2; 2,1 g NaHCO3; 1 g glukosa; 0,29 g MgSO4.7H2O; 0,16 g KH2SO4; kemudian dilarutkan dalam I liter akuades.

3.9 Pembuatan Larutan Krebs –Henseleit Tanpa Kalsium

Timbang sebanyak 6,9 g NaCl; 0,35 g KCl; 2,1 g NaHCO3; 1 g glukosa; 0,29 g MgSO4.7H2O; 0,16 g KH2SO4; kemudian dilarutkan dalam 1 liter akuades.

3.10 Pembuatan Larutan Induk EEDA

Sebanyak 250 mg EEDA ditimbang, kemudian ditambahkan DMSO sedikit demi sedikit hingga larut. Kemudian dicukupkan volumenya hingga 250 ml dengan larutan Krebs-Henseleit dalam labu tentukur sampai garis tanda (konsentrasi 1 mg/ml).

3.11 Pembuatan Larutan Uji EEDA

Larutan induk EEDA dipipet sebanyak 50 ml; 100 ml; kemudian dimasukkan ke dalam masing-masing labu tentukur 100 ml lalu volumenya dicukupkan dengan larutan Krebs-Henseleit sampai garis tanda (konsentrasi 0,5 mg/ml, 1 mg/ml).

3.12 Uji Efek EEDA Terhadap Kontraktilitas dan Denyut pada Isolat Jantung Tikus

15 ekor tikus dikelompokkan secara acak menjadi 5 kelompok, masing– masing kelompok terdiri dari 3 ekor tikus. Tikus dianestesi terlebih dahulu dengan ketamin dosis 70 mg/KgBB secara intraperitonial, selanjutnya diberikan heparin dosis 2500 UI, 0,2 ml/100 g BB secara intraperitonial, yang bertujuan untuk mencegah pembekuan darah yang mungkin terjadi di jantung yang dapat menganggu sirkulasi koroner. Jantung tikus diisolasi dan diletakkan dalam cawan petri yang berisi larutan fisiologis Krebs-Henseleit dingin dan dialiri karbogen (campuran 95% O2+ 5% CO2), lalu jantung dibersihkan dari lemak. Setelah bersih, jantung digantung pada alat Langendorff dan dialiri larutan Krebs-Henseleit dengan laju 20 ml/menit dan tetap dialiri dengan karbogen. Bagian ventrikel jantung disambungkan dengan transduser yang akan merekam

pergerakan otot jantung. Setelah dicapai kondisi stabil, isolat jantung diberikan perlakuan sebagai berikut :

a. Kelompok 1: dialiri dengan larutan Krebs Henseleit utuh dengan diberikan EEDA dosis 0,5 mg

b. Kelompok 2: dialiri dengan larutan Krebs Henseleit utuh dengan diberikan EEDA dosis 1 mg

c. Kelompok 3: dialiri dengan larutan Krebs Henseleit tanpa kalsium dengan diberikan EEDA dosis 0,5 mg

d. Kelompok 4: dialiri dengan larutan Krebs Henseleit tanpa kalsium dengan diberikan EEDA dosis 1 mg

e. Kelompok 5: dialiri dengan larutan Krebs Henseleit dengan diberikan digoksin dosis 0,1 mg.

f. Kelompok 6: dialiri dengan larutan Krebs Henseleit tanpa kalsium dengan diberikan digoksin dosis 0,1 mg.

Diamati efek kontraksi dan denyut yang terjadi pada jantung melalui rekaman yang disampaikan transduser. Perlakuan diulang sebanyak tiga kali (Niazmand dan Saberi, 2010).

3.13 Analisis Hasil

Persen perubahan kontraktilitas dan denyut jantung dapat dihitung dengan rumus : (B-A)/A x 100%, dimana A adalah nilai sebelum pemberian obat atau ekstrak, dan B adalah nilai setelah pemberian obat atau ekstrak (Niazmand dan Saberi, 2010). Kemudian data dianalisis dengan one way analysis of

variance(ANOVA) dan dilanjutkan dengan uji Tukey pada program Statistic Product and Service Solutions (SPSS) 18.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Bahan Baku Ekstrak

Pada penelitian ini digunakan ekstrak etanol daun Afrika yang sama dengan ekstrak yang digunakan Indra Gunanta Sembiring (2013) pada penelitian yang berjudul efek inotropik dan kronotropik ekstrak etanol daun Afrika (Vernonia amygdalina Delile) pada isolat jantung tikus. Oleh karena itu, identifikasi tumbuhan tidak dilakukan lagi.

EEDA disimpan di lemari pendingin dalam wadah tertutup rapat sehinggan EEDA terhindar dari kontaminasi zat-zat asing. Penyimpanan di lemari pendingin bertujuan untuk mencegah tumbuhnya jamur, mencegah ekstrak terkena sinar matahari langsung. Secara organoleptik, EEDA yang disimpan tidak ada ditumbuhi kapang dan jamur. Pada penelitian ini, dilakukan pemeriksaan karakteristik kembali yaitu penetapan kadar air dan juga dilakukan skrining fitokimia kembali. Hal ini dilakukan untuk membuktikan bahwa EEDA yang digunakan memenuhi standar secara umum dan masih layak digunakan dalam penelitian ini.

Hasil karakterisasi berupa penetapan kadar air EEDA memberikan hasil lebih kecil dari 10% yaitu 7,24%. Persyaratan kadar air EEDA tidak ditetapkan dalam Materia Medika Indonesia. Namun, kadar air yang melebihi 10% dapat menjadi media yang baik untuk pertumbuhan mikroba, keberadaan jamur atau serangga, serta mendorong kerusakan karena terjadi hidrolisis ( WHO, 1998). Penentuan golongan senyawa pada ekstrak etanol daun Afrika untuk mendapatkan informasi golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat di dalamnya.

Adapun pemeriksaan yang dilakukan terhadap ekstrak etanol daun Afrika adalah pemeriksaan golongan senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, triterpenoid/steroid, glikosida, dan glikosida jantung. Hasil skrining fitokimia EEDA dapat dilihat pada Tabel 4.1.`

Tabel 4.1 Hasil skrining fitokimia EEDA

No Parameter Hasil Pengamatan

1 Alkaloid -

2 Flavonoid +

3 Saponin +

4 Tanin +

5 Triterpenoid/Steroid +

6 Glikosida +

7 Glikosida jantung +

Keterangan: + = mengandung golongan senyawa - = tidak mengandung golongan senyawa

Pada Tabel 4.1 di atas menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun Afrika memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder meliputi flavonoid, saponin, tanin, triterpenoid/steroid, glikosida, dan glikosida jantung. Kandungan senyawa metabolit sekunder yang didapat dari hasil skrining sesuai dengan penelitian yang telah dilakukan oleh peneliti sebelumnya Indra Gunanta Sembiring (2013).

4.2. Hasil Uji Efek Inotropik dan Kronotropik EEDA 4.2.1 Uji Inotropik

Uji inotropik merupakan pengujian yang dilakukan untuk melihat peningkatan kontraktilitas isolat jantung. Hasil uji inotropik pada isolat jantung berupa persen (%) peningkatan kontraktilitas yang dihitung berdasarkan rumus [(B-A)/A] x 100%, dimana A merupakan nilai kontraktilitas jantung sebelum pemberian EEDA dan B adalah nilai kontraktilitas jantung setelah pemberian EEDA.

Berdasarkan hasil penelitian ditemukan bahwa EEDA memiliki efek terhadap kontraktilitas jantung. Persen peningkatan kontraktilitas jantung yang disebabkan oleh EEDA 0,5 mg (21,67 ± 9,45) berbeda bermakna dengan kontrol positif digoksin 0,1 mg (90,67 ± 17,92). EEDA 1 mg (54,67 ± 21,03) memiliki persen peningkatan kontraktilitas jantung yang tidak berbeda bermakna dengan digoksin 0,1 mg (90,67 ± 17,92). Sedangkan untuk EEDA 0,5 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-7,00 ± 17,77) dan EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-2,67 ± 10,11) memiliki hasil yang berbeda bermakna dengan digoksin 0,1 mg (90,67 ± 17,92) (Tabel 4.2 dan Gambar 4.1).

Tabel 4.2 Persen peningkatan kontraktilitas EEDA

No Perlakuan Peningkatan

Kontraktilitas (%)

Signifikansi Terhadap Kontrol 1 EEDA 0,5 mg dengan Krebs

Henseleit

21,67 ± 9,45 0,002* 2 EEDA 1 mg dengan Krebs

Henseleit

54,67 ± 21,03 0.112 3 EEDA 0,5 mg dengan Krebs

Henseleit tanpa Ca

-7,00 ± 17,77 0,000* 4 EEDA 1 mg dengan Krebs

Henseleit tanpa Ca

-2,67 ± 10,11 0,000* 5 Digoksin 0,1 mg dengan

Krebs Henselei

90,67 ± 17,92 -

6 Digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa Ca

-13,67 ± 2,08 0,000*

Keterangan : (*) : berbeda bermakna dibandingkan dengan kontrol (digoksin dengan Krebs Henseleit).

Selanjutnya dilakukan perbandingan antara EEDA 0,5 mg dan 1 mg dengan EEDA 0,5 dan 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium. EEDA 0,5 mg (21,67 ± 9,45) tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna dengan EEDA 1 mg (54,67 ± 21,03), EEDA 0,5 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-7,00 ± 17,77), dan EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-2,67 ± 10,11). EEDA 1 mg (54,67 ± 21,03) menunjukkan perbedaan yang bermakna dengan EEDA 0,5 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-7,00 ± 17,77),EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-2,67 ± 10,11),dan juga dengan digoksin 0,1 mg Krebs Henseleit tanpa kalsium (-13,67 ± 2,08) namun tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna dengan EEDA 0,5 mg (21, 67 ± 9,45).

Dilakukan juga perbandingan antara EEDA 0,5 mg dan 1 mg dengan kontrol negatif, yaitu digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium. EEDA 0,5 mg Krebs Henseleit tanpa kalsium (-7,00 ± 17,77) dan EEDA 1 mg Krebs Henseleit tanpa kalsium ( -2,67 ± 10,11) tidak memiliki perbedaan yang

21,67 54,67 -7 -2,67 90,67 90,67 -13,67 -13,67 -20 0 20 40 60 80 100 KH

KH Ca free

Digoksin - KH

Digoksin - KH Ca free

% P e n in gk at an Kon tr ak tili tas

0,5 1

Konsentrasi EEDA (mg/ml)

bermakna jika dibandingkan dengan digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-13,67 ± 2,08).

Berdasarkan hasil statistik di atas maka dapat disimpulkan bahwa EEDA 0,5 mg tidak dapat meningkatkan kontraktilitas jantung jika dibandingkan dengan kontrol positif digoksin 0,1 mg. Sedangkan EEDA 1 mg dapat meningkatkan kontraktilitas jantung yang hampir sama dengan digoksin 0,1 mg. Pada EEDA 0,5 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium dan juga EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium tidak dapat meningkatkan kontraktilitas jantung secara signifikan jika dibandingkan dengan EEDA 1 mg,dengan kontrol positif digoksin 0,1 mg maupun dengan kontrol negatif digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium.

Pada EEDA 0,5 mg dan 1 mg yang dialiri larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium menunjukkan tidak adanya peningkatan kontraktilitas (inotropik negatif). Hal ini menunjukkan bahwa kalsium berperan penting dalam fungsi inotropik isolat jantung yang masuk melalui L-type calcium channel (Niazmand dan Saberi, 2010). Ada beberapa mekanisme yang dapat menyebabkan terjadinya efek

inotropik pada jantung yaitu stimulasi dari β- adrenoseptor, aktivitas pintu

kalsium ataupun efek pada cAMP intraseluler (Parsaee, et al, 2006). Mekanisme yang mungkin terjadi adalah karena tidak adanya kalsium dalam larutan Krebs-Henseleit yang dialirkan ke isolat jantung, EEDA tidak dapat meningkatkan kontraktilitas isolat jantung secara signifikan.

Kontraktilitas merupakan perubahan kekuatan kontraksi yang terbentuk yang terjadi tanpa tergantung perubahan pada panjang serabut miokardium. Peningkatan kontraktilitas merupakan hasil intensifikasi hubungan jembatan

penghubung pada sarkomer. Kekuatan interaksi ini berkaitan dengan konsentrasi ion kalsium bebas intrasel. Kontraksi miokardium secara langsung sebanding dengan jumlah kalsium intrasel (DeBeasi, 2003).

Sarkomer merupakan unit kontraktil dasar miokardium, tersusun oleh dua miofilamen yang saling tumpang tindih: filamen tebal miosin dan filamen tipis aktin. Filamen aktin tersusun atas tiga komponen protein: aktin, tropomiosin, dan troponin. Kontraksi otot terjadi bila tempat aktif pada filamen aktin berikatan dengan jembatan penghubung miosin, menyebabkan filamen aktin tertarik ke pusat ke pusat filamen miosin, dan terjadi pemendekan sarkomer.

Kalsium berperan penting dalam ikatan aktin-miosin. Bila tidak terdapat kalsium, tropomiosin dan troponin melindungi tempat aktif pada filamen aktin, sehingga mencegah ikatan dengan miosin. Hal ini menghasilkan relaksasi otot jantung. Bila terdapat kalsium, efek inhibisi tropomiosin dan troponin dapat dihambat sendiri sehingga tempat aktif pada filamen aktin dapat berikatan dengan jembatan penghubung miosin. Hal ini menyebabkan pemendekan sarkomer dan terjadilah kontraksi jantung (DeBeasi, 2003).

4.2.2 Uji Kronotropik

Uji kronotropik merupakan pengujian yang dilakukan untuk melihat peningkatan denyut isolat jantung. Hasil uji kronotropik pada isolat jantung berupa persen (%) peningkatan denyut yang dihitung berdasarkan rumus [(B-A)/A] x 100%, dimana A merupakan nilai denyut isolat jantung sebelum pemberian EEDA dan B adalah nilai denyut isolat jantung setelah pemberian EEDA.

Berdasarkan hasil penelitian, EEDA memiliki efek terhadap denyut jantung. Digoksin memiliki sifat sebagai kronotropik negatif maka tidak memiliki fungsi dalam menaikkan denyut isolat jantung (-10,33 ± 2,51). Maka dilakukan perbandingan antara EEDA 0,5 mg, EEDA 1 mg, EEDA 0,5 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium, dan EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium. EEDA 0,5 mg (61,33 ± 6,65), EEDA 1 mg (107,00 ± 26,23), dan EEDA 0,5 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (17,33 ± 67,24) memiliki perbedaan yang bermakna dalam meningkatkan denyut isolat jantung dibandingkan dengan digoksin 0,1 mg (-10,33 ± 2,51). EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium tidak memiliki perbedaan yang bermakna dibandingkan dengan digoksin 0,1 mg (-10,33 ± 2,51) (Tabel 4.3 dan Gambar 4.2).

Tabel 4.3 Persen peningkatan denyut EEDA

No Perlakuan Peningkatan denyut

(%)

Signifikansi Terhadap Kontrol 1 EEDA 0,5 mg dengan Krebs

Henseleit

61,33 ± 6,65 0,005* 2 EEDA 1 mg dengan Krebs

Henseleit

107,00 ± 26,23 0.001* 3 EEDA 0,5 mg dengan Krebs

Henseleit tanpa Ca

17,33 ± 67,24 0,046* 4 EEDA 1 mg dengan Krebs

Henseleit tanpa Ca

-41,00 ± 25,86 0,683 5 Digoksin 0,1 mg dengan

Krebs Henseleit

-10,33 ± 2,51 -

6 Digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa Ca

-79,33 ± 18,50 0,145

Keterangan : (*) : berbeda bermakna dibandingkan dengan kontrol (digoksin dengan Krebs Henseleit)

Selanjutnya dilakukan perbandingan antara EEDA 0,5 dan 1 mg dengan EEDA 0,5 mg dan 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium. EEDA 0,5 mg (61,33 ± 6,65) menunjukkan perbedaan yang bermakna dengan EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-41,00 ± 25,86), namun tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna dibandingkan dengan EEDA 1 mg (107,00 ± 26,23) dan EEDA 0,5 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (17,33 ± 67,24). Sedangkan untuk EEDA 1 mg (107,00 ± 26,23) memiliki perbedaan yang bermakna dengan EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-41,00 ± 25,86), namun tidak memiliki perbedaan yang bermakna dengan EEDA 0,5 mg (61,33 ± 6,65) dan EEDA 0,5 mg KH tanpa kalsium (17,33 ± 67,24).

Dilakukan juga perbandingan antara EEDA 0,5 mg Krebs Henseleit tanpa kalsium dan EEDA 1 mg Krebs Henseleit tanpa kalsium dengan kontrol negatif, yaitu digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium. EEDA 0,5 mg Krebs Henseleit tanpa kalsium (17,33 ± 67,24) dan EEDA 1 mg Krebs Henseleit

61,33 54,67 17,33 -41 -10,33 -10,33 -79,33 -79,33 -100 -80 -60 -40 -20 0 20 40 60 80 KH

KH Ca free

Digoksin - KH

Digoksin - KH Ca free

% P e ni ngk at a De nyu t 1 0,5

Konsentrasi EEDA (mg/ml)

% P e ni ngk at an D e nyu t

tanpa kalsium (-41,00 ± 25,86) tidak memiliki perbedaan yang bermakna jika dibandingkan dengan digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium (-79,33 ± 18,50).

Berdasarkan hasil perbandingan secara statistik tersebut, maka dapat disimpulkan bahwa EEDA 0,5 mg dan 1 mg memiliki aktivitas untuk meningkatkan denyut isolat jantung. Pada EEDA 0,5 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium masih memiliki efek kronotropik positif walaupun persen peningkatan denyut isolat jantungnya kecil. EEDA 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium memiliki efek kronotropik negatif yang signifikan jika dibandingkan dengan EEDA 1 mg, namun tidak signifikan jika dibandingkan dengan digoksin 0,1 mg. Maka dapat disimpulkan, semakin besar dosis EEDA yang diberikan dapat meningkatkan penurunan denyut isolat jantung yang dialiri dengan larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium. Dosis rendah memiliki efek kronotropik positif pada jantung, sedangkan dosis yang lebih tinggi memiliki efek negatif pada kronotropik jantung. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak memiliki efek tergantung dosis pada denyut jantung (Obikeze, 2004).

Kronotropik mengacu pada laju dimana jantung berkontraksi. SA node,

AVnode danmiokardiumventrikeldipersarafiolehsarafsimpatis dan parasimpatisyangmempengaruhidenyut jantung. Stimulasisarafparasimpatis(saraf

vagus), menyebabkanmelambatnyadenyut jantung, efekkronotropiknegatif, sementarastimulasisarafsimpatisakanmenyebabkanpeningkatandenyut jantung, efekkronotropikpositif (Obikeze, 2004).

Pada EEDA 0,5 mg dan 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium terjadi penurunan kontraksi maupun denyut jantung. Hal ini disebabkan adanya

keterkaitan antara kontraksi dan denyut jantung. Menurut DeBeasi (2003), Peningkatan frekuensi denyut jantung dapat meningkatkan kekuatan kontraksi. Apabila jantung berdenyut lebih sering, kalsium yang tertimbun dalam sel jantung meningkat, menyebabkan peningkatan kekuatan kontraksi.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat diambil kesimpulan bahwa:

a. ekstrak etanol daun Afrika memiliki efek inotropik positif dalam larutan Krebs-Henseleit, tetapi memiliki efek inotropik negatif dalam larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium.

b. ekstrak etanol daun Afrika memiliki efek kronotropik positif dalam larutan Krebs-Henseleit, tetapi memiliki efek kronotropik negatif dalam larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium.

5.2 Saran

Berdasarkan kesimpulan di atas, disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melihat pengaruh kalsium pada ekstrak etanol daun Afrika dengan membandingkannya dengan obat golongan calcium channel blocker misalnya amlodipin, diltiazem.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Uraian Tumbuhan

Vernonia amygdalina merupakan salah satu jenis dari genus Vernonia yang paling sering digunakan (Toyang dan Verpoorte, 2013). Daun Afrika ternyata sudah dikenal sejak dulu oleh masyarakat di Cina sebagai tanaman obat yang sangat mujarab. Mereka menyebutnya Nan Fei Shu dan di sebagian daratan Cina ada yang menyebut Nan Hui Ye. Konon tanaman ini digunakan oleh kalangan petinggi di lingkungan kekaisaran Cina sebagai obat untuk berbagai penyakit (Anonim, 2010). Daun Afrika dapat juga ditemukan di rumah-rumah maupun desa-desa sebagai tanaman pagar dan pot (Akpaso, et al., 2011).

2.1.1 Habitat

Daun Afrika tumbuh di beberapa bagian Afrika, termasuk daerah tropis dan terutama Afrika Selatan, Zimbabwe, dan Nigeria (Gresham, et al., 2008). Daun Afrika juga dapat tumbuh liar ataupun ditanam sepanjang sub-saharan Afrika (Akpaso, et al., 2011).

2.1.2 Morfologi tumbuhan

Daun Afrika (Vernonia amygdalina Delile), umumnya dikenal sebagai daun yang pahit, merupakan semak yang tinggi puncaknya sekitar 3 meter (Gresham, et al., 2008). Batang tegak, bulat, berkayu, dan berwarna coklat kotor. Daun majemuk , anak daun berhadapan, panjang 15-25 cm, lebar 5-8 cm, tebal 7-10 mm, berbentuk seperti ujung tombak, tepi bergerigi, ujung runcing, pangkal membulat, pertulangan menyirip, dan berwarna hijau tua (Ibrahim, et al., 2004; Ijeh dan Chukwunonso, 2010).

2.1.3 Sistematika tumbuhan

Menurut Yeap, et al., (2010), sistematika dari tumbuhan daun Afrika adalah sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledoneae Bangsa : Asterales Suku : Asteraceae Marga : Vernonia Spesies : V. Amygdalina 2.1.4 Nama asing

South Africa leaf (Malaysia), bitter leaf (English), akpa gbo (Afrika), Suwaaka (Cameroon), Ikaruga Chrysanthemum tonsils (China), Etidod (Nigeria), Olulusia dan South Africa Leaf (Kenya), Awonoo (Ghana), dan Musikavakadzi (Zimbabwe) (Yeap, et al., 2010).

2.1.5 Kandungan kimia dan kegunaan

Daun Afrika mengandung senyawa golongan saponin, flavonoid, sesquiterpen lakton, dan glikosida steroid (Ijeh dan Chukwunonso, 2010). Selain itu juga terdapat sesquiterpen lakton seperti vernodalin dan vernoamygdalin dan glikosida steroid seperti vernonioside B1 dan vernoniol B1 (Ojiako dan Nwanjo, 2006).

Daun Afrika memiliki khasiat antara lain sebagai antioksidan (Pinem, 2012), antimutagenik (Ginting, 2012), antikanker (Oyugi, et al., 2009; Gresham,

et al., 2008) antidiabetes (Atangwho, et al.,2007; Nwanjo dan Nwokoro, 2004; Setiawan, 2012), dan analgetik (Njan, et al., 2008).

2.2 Ekstraksi

Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan kandungan senyawa kimia dari jaringan tumbuhan maupun hewan dengan pelarut yang sesuai. Sebelum ekstraksi dilakukan biasanya bahan dikeringkan terlebih dahulu kemudian dihaluskan pada derajat kehalusan tertentu(Harborne, 1987).

Hasil ekstraksi disebut ekstrak, yaitu sediaan kental atau cair yang diperoleh dengan cara mengekstraksi zat aktif dengan pelarut yang sesuai kemudian menguapkan semua atau hampir semua pelarut yang digunakan pada ekstraksi (Depkes RI., 1995).

Tujuan utama dari ekstraksi adalah untuk mendapatkan atau memisahkan sebanyak mungkin zat-zat yang memiliki khasiat pengobatan. Zat aktif yang terdapat dalam simplisia tersebut dapat digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid dan lain-lain (Depkes RI., 2000).

Menurut Depkes RI (2000), ada beberapa metode ekstraksi yang sering digunakan antara lain yaitu:

a. Cara dingin Maserasi

Maserasi adalah penyarian simplisia dengan cara perendaman menggunakan pelarut disertai sesekali pengadukan pada temperatur kamar.Maserasi yang dilakukan pengadukan secara terus menerus disebut maserasikinetik sedangkan yang dilakukan panambahan ulang pelarut setelah

dilakukan penyaringan terhadap maserat pertama dan seterusnya disebutremaserasi.

Perkolasi

Perkolasi adalah proses penyarian simplisia menggunakan alat perkolator dengan pelarut yang selalu baru sampai terjadi penyarian sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur kamar. Proses perkolasi terdiri dari tahap pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak) terus menerus sampai diperoleh perkolat.

b. Cara panas Refluks

Refluks adalah proses penyarian simplisia pada temperatur titik didihnya menggunakan alat dengan pendingin balik dalam waktu tertentu dimana pelarut akan terkondensasi menuju pendingin dan kembali ke labu.

Digesti

Digesti adalah proses penyarian dengan pengadukan kontinu pada temperatur lebih tinggi dari temperatur kamar, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50°C.

Sokletasi

Sokletasi adalah proses penyarian menggunakan pelarut yang selalu baru, dilakukan dengan menggunakan alat khusus (soklet) dimana pelarut akan terkondensasi dari labu menuju pendingin, kemudian jatuh membasahi sampel. Infundasi

Infundasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperatur 90°C selama 15 menit.

Dekoktasi

Dekoktasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperatur 90°C selama 30 menit.

2.3 Kontraksi Jantung

Kontraksi sel otot jantung dipicu oleh potensial aksi yang akan menyebar ke seluruh membran sel. Terdapat dua jenis sel otot jantung :

a. Sel kontraktil, yang membentu 99% dari sel-sel otot jantung, melakukan kerja mekanis memompa jantung. Sel-sel ini dalam keadaan normal tidak membentuk sendiri potensial aksinya.

b. Sel otoritmik, tidak berkontraksi tetapi khusus memulai dan menghantarkan potensial aksi yang menyebabkan kontraksi sel-sel jantung kontraktil (Sherwood, 2011).

Sel-sel jantung non-kontraktil yang mampu melakukan otoritmisitas terletak di tempat-tempat berikut :

a. Sinoatrial node (SA node), terletak di atrium kanan dekat tempat masuknya vena cava superior.

b. Atrioventricular node (AV node), suatu berkas kecil sel-sel otot jantung khusus yang terletak di dasar atrium kanan dekat septum, tepat di atas pertemuan atrium dan ventrikel.

c. Bundle of His, bercabang dua di septum yaitu left bundle branch (LBB) dan right bundle branch (RBB). LBB aktivasi ke ventrikel kiri dan RBB aktivasi ke ventrikel kanan.

Impuls jantung berasal dari nodus SA, yaitu pemacu jantung yang memiliki kecepatan tertinggi. Setelah terbentuk, potensial aksi menyebar ke seluruh atrium kanan dan kiri. Impuls berjalan dari atrium ke dalam ventrikel melalui nodus AV. Impuls kemudian merambat cepat menuju berkas His dan menyebar ke seluruh miokardium melalui serat Purkinje (Sherwood, 2011).

Sarkomer merupakan unit kontraktil dasar miokardium, tersusun oleh dua miofilamen yang saling tumpang tindih: filamen tebal miosin dan filamen tipis aktin. Filamen aktin tersusun atas tiga komponen protein: aktin, tropomiosin, dan troponin. Kontraksi otot terjadi bila tempat aktif pada filamen aktin berikatan dengan jembatan penghubung miosin, menyebabkan filamen aktin tertarik ke pusat ke pusat filamen miosin, dan terjadi pemendekan sarkomer.

Kalsium berperan penting dalam ikatan aktin-miosin. Bila tidak terdapat kalsium, tropomiosin dan troponin melindungi tempat aktif pada filamen aktin, sehingga mencegah ikatan dengan miosin. Hal ini menghasilkan relaksasi otot jantung. Bila terdapat kalsium, efek inhibisi tropomiosin dan troponin dapat dihambat sendiri sehingga tempat aktif pada filamen aktin dapt berikatan dengan jembatan penghubung miosin. Hal ini menyebabkan pemendekan sarkomer dan terjadilah kontraksi jantung (DeBeasi, 2003).

Kalsium yang penting dalam ikatan aktin-miosin tersedia selama stimulasi listrik sel jantung, yaitu saat timbul potensial aksi. Begitu dihasilkan potensial aksi melewati membran sel, saluran kalsium lambat pada membran sel menjadi teraktivasi. Hal ini menimbulkan periode plateau pada potensal aksi. Kalsium berpindah melewati sarkolema (membran sel) dan tubulus transversa (perluasan membran sel). Perpindahan kalsium ke bagian dalam sel menyebabkan lepasnya

sejumlah besar kalsium yang tersimpan dari retikulum sarkoplasma. Kalsium kemudian menghambat efek inhibisi tropomiosin-troponin, menyebabkan terjadinya ikatan aktin-miosin, pemendekan sarkomer, dan menyebabkan kontraksi miokardium. Energi yang dibutuhkan untuk proses kontraksi berasal dari degradasi adenosin trifosfat (ATP) menjadi adenosin difosfat (ADP) (DeBeasi, 2003).

2.4 Gagal Jantung Kongestif

Gagal jantung diartikan sebagai keadaan fungsi jantung yang abnormal, dimana jantung gagal memompakan darah secara adekuat untuk memenuhi kebutuhan metabolisme jaringan tubuh. Definisi gagal jantung menurut American Heart Association (AHA) adalah sindroma klinik yang disebabkan oleh kelainan struktural atau fungsi jantung dimana terjadi gangguan kemampuan jantung baik untuk pengisian darah ke ventrikel ataupun pemompaan darah (Majid, 2005).

Manifestasi gagal jantung yang utama adalah (1) sesak napas dan rasa lelah, yang membatasi kemampuan melakukan kegiatan fisik; dan (2) retensi cairan, yang menyebabkan kongesti paru dan edema perifer. Kedua abnormalitas tersebut menganggu kapasitas fungsional dan kualitas hidup pasien, tetapi tidak selalu ditemukan bersama pada seorang pasien. Ada pasien dengan aktivitas fisik terbatas tanpa retensi cairan, tetapi ada juga pasien dengan edema tanpa sesak napas atau rasa lelah (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Klasifikasi gagal jantung berdasarkan abnormalitas struktural jantung (ACC/AHA) atau berdasarkan gejala berkaitan dengan kapasitas fungsional (NYHA) adalah sebagai berikut (Imaligy, 2014).

Tabel 2.1 Klasifikasi gagal jantung

ACC/AHA NYHA

Stadium A

Memiliki resiko tinggi berkembang menjadi gagal jantung. Tidak terdapat gangguan struktural dan fungsional jantung., tidak terdapat tanda dan gejala

Kelas I

Tidak terdapat batasan melakukan aktivitas fisik. Aktivitas fisik sehari-hari tidak menimbulkan kelelahan, palpitasi atau sesak napas

Stadium B

Telah terbentuk penyakit struktur jantung yang berhubungan dengan perkembangan gagal jantung. Tidak terdapat tanda dan gejala.

Kelas II

Terdapat batasan aktivitas ringan. Tidak terdapat keluhan saat istirahat, namun aktivitas fisik sehari-hari menimbulkan kelelahan, palpitasi atau sesak napas

Stadium C

Gagal jantung asimptomatis yang berhubungan dengan penyakit struktural jantung yang mendasari

Kelas III

Terdapat batasan aktivitas bermakna. Tidak terdapat keluhan saat istirahat, tetapi aktivitas fisik ringan menyebabkan kelelahan, palpitasi atau sesak

Stadium D

Penyakit jantung struktural jantung yang lanjut serta gejala gagal jantung yang sangat bermakna saat istirahat walaupun sudah mendapat terapi medis maksimal.

Kelas IV

Tidak dapat melakukan aktivitas fisik tanpa keluhan. Terdapat gejala saat istirahat. Keluhan meningkat saat melakukan aktivitas.

ACC: American College of Cardiology, AHA: American Heart Association, NYHA: New York Heart Association

Pada kebanyakan pasien dengan gagal jantung, disfungsi sistolik dan disfungsi diastolik ditemukan bersama. Pada disfungsi sistolik, kekuatan kontraksi ventrikel kiri terganggu sehingga ejeksi darah berkurang, menyebabkan curah jantung berkurang. Pada disfungsi diastolik, relaksasi dinding ventrikel terganggu sehingga pengisian darah berkurang, menyebabkan curah jantung berkurang. Berkurangnya curah jantung inilah yang menimbulkan gejala-gejala gagal jantung, sebagai akibat langsung dan/atau kompensasinya (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Kompensasi pada gagal jantung sistolik terjadi melalui 2 mekanisme utama, yaitu sistem simpatis dan sistem renin-angiotensin-aldosteron (RAA). Aktivasi sistem simpatis terjadi sebagai reaksi terhadap penurunan curah jantung yang dipersepsi oleh baroreseptor. Peningkatan aktivitas simpatis menyebabkan peningkatan kontraksi otot jantung dan frekuensi denyut jantung melalui stimulasi reseptor adrenergik β1 di jantung. Akibatnya terjadi peningkatan curah jantung sebagai kompensasi terhadap penurunan curah jantung pada gagal jantung sistolik (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Aktivasi sistem RAA dimulai dengan sekresi renin oleh sel jukstaglomerular di ginjal melalui stimulasi reseptor adrenergik β1 dan sebagai reaksi terhadap berkurangnya perfusi ke ginjal. Sekresi renin akan menghasilkan angiotensin II (Ang II), yang memiliki 2 efek utama yaitu sebagai vasokonstriktor kuat dan sebagai perangsang produksi aldosteron di korteks adrenal. Efek vasokontriksi oleh aktivitas simpatis dan Ang II akan meningkatkan beban hulu (preload) dan beban hilir (afterload) jantung, sedangkan aldosteron menyebabkan retensi air dan natrium yang akan menambah peningkatan preload jantung. Tekanan pengisian ventrikel (preload) yang meningkat akan meningkatkan curah jantung (menurut hubungan Frank-Starling) sebagai mekanisme kompensasi (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Mekanisme kompensasi yang terjadi tidak berjalan lama, karena dengan berjalannya waktu, mekanisme kompensasi tersebut justru memperburuk disfungsi miokard. Dengan tujuan untuk tetap meningkatkan curah jantung yang kurang, terjadilah perubahan-perubahan maladaptif berupa hipertrofi dinding ventrikel (untuk meningkatkan kontraktilitas miokard) dan ekspansi volume

ventrikel (untuk meningkatkan tekanan dinding ventrikel sehingga meningkatkan kontraktilitas miokard). Akan tetapi perubahan-perubahan maladaptif tersebut, terutama peningkatan dinding ventrikel yang berlebihan, akan menyebabkan apoptosis sel jantung dan proliferasi jaringan ikat (fibrosis), sehingga kontraktilitas miokard akan menurun. Proses yang menghasilkan perubahan-perubahan maladaptif dalam struktur dan fungsi jantung ini disebut proses remodelling jantung. Proses remodelling yang progresif menyebabkan kontraktilitas miokard menurun, sehingga curah jantung akan semakin menurun pula. Di samping itu peningkatan afterload jantung juga akan menurunkan curah jantung. Akibatnya terjadi dekompensasi jantung (Arini dan Nafrialdi, 2011). 2.5 Pengobatan Gagal Jantung

2.5.1 Terapi non-farmakologi

Terapi non-farmakologi terdiri atas :

a. Diet : pasien gagal jantung dengan diabetes, dislipidemia atau obesitas harus diberi diet yang sesuai untuk menurunkan gula darah, lipid darah atau berat badannya. Asupan NaCl harus dibatasi menjadi 2-3 g/hari, atau <2 g/hari untuk gagal jantung sedang sampai berat. Restriksi cairan menjadi 1,5-2 L/hari hanya untuk gagal jantung berat.

b. Merokok : harus dihentikan.

c. Aktivitas fisik : olahraga yang teratur seperti berjalan atau bersepeda dianjurkan untuk pasien gagal jantung yang stabil (NYHA kelas II-III) dengan intensitas yang nyaman bagi pasien.

e. Bepergian : hindari tempat-tempat tinggi dan tempat-tempat yang sangat panas atau lembab, dan gunakan penerbangan-penerbangan pendek (Arini dan Nafrialdi, 2011).

2.5.2 Terapi farmakologi 2.5.2.1 Vasodilator

Dalam gagal jantung kongestif, gangguan fungsi kontraksi jantung diperberat oleh peningkatan kompensasi pada preload dan afterload. Preload adalah volume darah yang mengisi ventrikel selama diastol. Peningkatan preload menyebabkan pengisian jantung berlebihan. Afterload adalah tekanan yang harus diatasi jantung ketika memompa darah ke sistem arterial. Peningkatan afterload menyebabkan jantung bekerja lebih kuat memompa darah ke sistem arterial. Vasodilator berguna untuk mengurangi preload dan afterload yang berlebihan. Dilatasi pembuluh darah vena menyebabkan berkurangnya preload jantung dengan meningkatkan kapasitas vena; dilatasi arterial menurunkan resistensi arteriol sistemik dan menurunkan afterload (Mycek, dkk., 2001).

a. Penghambat ACE

Penghambat ACE menghambat konversi angiotensin I (Ang I) menjadi angiotensin II (Ang II). Kebanyakan efek biologik Ang II diperantarai oleh reseptor angiotensin tipe I (AT1). Stimulasi reseptor AT1 menyebabkan vasokonstriksi, stimulasi dan penglepasan aldosteron, peningkatan aktivitas simpatis dan hipertrofi miokard. Aldosteron menyebabkan reabsorpsi Na dan air di tubulus ginjal, sedangkan aktivitas simpatis menyebabkan sekresi renin dari sel jukstaglomerular di ginjal. Reseptor AT2 memperantarai stimulasi apoptosis dan antiproliferasi. Penghambat ACE dengan mengurangi pembentukan Ang II akan

menghambat aktivitas Ang II di reseptor AT1maupun AT2. Pengurangan hipertrofi miokard dan penurunan preload jantung akan menghambat progresi remodelling jantung. Di samping itu, penurunan neurohormonal endogen (Ang II, aldosteron) akan mengurangi efek langsungnya dalam menstimulasi remodelling jantung. Enzim ACE adalah kininase II, maka penghambat ACE akan menghambat degradasi bradikinin sehingga kadar bradikinin yang terbentuk lokal di endotel vaskular akan meningkat. Bradikinin bekerja lokal pada resptor BK2 di sel endotel dan menghasilkan nitric oxide (NO) dan prostasiklin (PGI2), keduanya merupakan vasodilator, antiagregasi trombosit, dan antiproliferasi (Arini dan Nafrialdi, 2011). Penghambat ACE merupakan terapi lini pertama untuk pasien dengan fungsi sistolik ventrikel kiri yang menurun, yakni dengan fraksi ejeksi di bawah normal (<40-45%), dengan atau tanpa gejala. Efek samping yang penting adalah batuk, hipotensi, gangguan fungsi ginjal, hiperkalemia, dan angiodema. Pasien yang tidak dapat mentoleransi obat ini karena batuk dapat menggunakan AT1 -bloker sebagai alternatif yang efektif. Contoh obat penghambat ACE adalah kaptopril, enalapril, lisinopril, dan lain-lain (Arini dan Nafrialdi, 2011).

b. Vasodilator lain

Pasien yang intoleransi terhadap inhibitor ACE, biasa digunakan kombinasi hidralazin dan isosorbid dinitrat (Mycek, dkk., 2001). Nitrat organik (isosorbid dinitrat) : efek utamanya adalah penurunan preload karena peningkatan kapasitas vena perifer. Pada gagal jantung, hidralazin mengurangi afterload ventrikel kiri dan kanan dengan mengurangi resistensi pembuluh sistemik dan pulmonal (Henry dan Wilson, 2007).

Natrium nitroprusid (iv) merupakan prodrug dari nitric oxide (NO), suatu vasodilator kuat, kerjanya di arteri maupun vena, sehingga menurunkan afterload dan preload jantung. Mula kerjanya cepat (2-5 menit) karena cepat dimetabolisme membentuk NO yang aktif (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Nitrogliserin (iv), obat ini juga prodrug dari NO. Pada kecepatan infus yang rendah, obat ini hanya mendilatasi vena dan dengan demikian hanya menurunkan preload jantung (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Nesiritid (iv), merupakan rekombinan dari peptida natriuretik otak (BNP) manusia, dan diindikasikan untuk gagal jantung akut dengan sesak napas saat istirahat dengan aktivitas minimal. Mekanisme kerjanya melalui peningkatan siklik GMP menyebabkan dilatasi vena dan arteri. Pada pasien gagal jantung, nesiritid mengantagonisasi efek angiotensin dan norefineprin dengan menimbulkan vasodilatasi, natriuresis dan diuresis (Arini dan Nafrialdi, 2011). 2.5.2.2 Antagonis angiotensin II (AT1- bloker)

Antagonis angiotensin II (Ang II) menghambat aktivitas Ang II hanya di reseptor AT1 dan tidak di reseptor AT2, maka disebut juga AT1-bloker. Tidak adanya hambatan kininase II menyebabkan bradikinin dipecah menjadi kinin inaktif,sehingga vasodilator NO dan PGI2 tidak terbentuk. Karena itu AT1- bloker tidak menimbulkan efek samping batuk kering (Arini dan Nafrialdi, 2011).

2.5.2.3 Diuretik

Diuretik merupakan obat utama untuk mengatasi gagal jantung akut yang selalu disertai dengan kelebihan (overload) cairan yang bermanifestasi sebagai kongesti paru atau edema perifer. Pada pasien-pasien ini diuretik mengurangi retensi air dan garam sehingga mengurangi volume cairan ekstrasel, alir balik

vena, dan tekanan pengisian ventrikel (preload). Dengan demikian, edema perifer dan kongesti paru akan berkurang/hilang, sedangkan curah jantung tidak berkurang. Pada mereka ini, diuretik diberikan sampai etrjadi diuresis yang cukup untuk mencapai euvolemia, dan mempertahankannya (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Untuk tujuan ini, biasanya diberikan diuretik kuat, misalnya furosemid. Dosis awal yang lebih tinggi mungkin diperlukan pada gagal jantung lanjut atau yang disertai dengan gagal ginjal. Setelah euvolemia tercapai, dosis diuretik harus diturunkan sampai dosis minimal yang diperlukan untuk mempertahankan euvolemia. Hipokalemia dapat dikoreksi dengan suplemen kalium atau penambahan diuretik hemat kalium. Oleh karena penggunaan diuretik tidak mengurangi mortalitas pada gagal jantung (kecuali spironolakton), maka diuretik harus selalu diberikan dalam kombinasi dengan penghambat ACE (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Diuretik tiazid pada pengobatan gagal jantung tidak pernah diberikan sendiri (karena efek diuresisnya lemah), tetapi dalam kombinasi dengan diuretik kuat (akan menunjukkan efek sinergistik). Diuretik hemat kalium : triamteren, amilorid. Pada pengobatan gagal jantung, obat-obat ini hanya digunakan jika hipokalemia menetap setelah awal terapi dengan penghambat ACE dan diuretik (Arini dan Nafrialdi, 2011).

2.5.2.4 Antagonis aldosteron

Pada pasien gagal jantung, kadar plasma aldosteron meningkat (akibat aktivasi sistem renin-angiotensin-aldosteron), bisa sampai 20 kali kadar normal. Aldosteron menyebabkan retensi Na dan air serta ekskresi K dan Mg. Retensi Na dan air menyebabkan edema dan peningkatan preload jantung. Karena itu

antagonisasi aldosteron akan mengurangi progresi remodelling jantung sehingga dapat mengurangi mortalitas dan morbiditas akibat gagal jantung. Pada saat ini ada 2 antagonis aldosteron, yakni spironolakton dan eplerenon (Arini dan Nafrialdi, 2011).

2.5.2.5 Obat-obat inotropik

Obat-obat inotropik positif meningkatkan kontraksi jantung dan meningkatkan curah jantung. Meskipun obat-obat ini bekerja melalui mekanisme yang berbeda, dalam tiap kasus kerja inotropik adalah akibat peningkatan konsentrasi kalsium sitoplasma yang memacu kontraksi jantung (Mycek, dkk., 2001).

a. Glikosida jantung

Glikosida jantung sering disebut sebagai digitalis atau glikosida digitalis karena obat-obat ini pada umumnya berasal dari tanaman digitalis. Glikosida digitalis memperlihatkan perbedaan yang kecil antara dosis efektif terapi dan dosis toksis atau yang menyebabkan kematian. Karena itu, obat-obat ini mempunyai indeks terapi rendah. Glikosida digitalis antara lain digitoksin, dan obat yang paling banyak digunakan digoksin (Mycek, dkk., 2001).

Saat ini hanya digoksin yang digunakan untuk terapi gagal jantung. Efek digoksin pada pengobatan gagal jantung: (1) inotropik positif, (b) kronotropik negatif (mengurangi frekuensi denyut ventrikel dan takikardia atau fibrilasi atrium), dan (c) mengurangi aktivitas saraf simpatis (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Efek inotropik positif. Ion Na+ dan Ca2+ masuk ke dalam sel otot jantung pada tiap siklus depolarisasi dan repolarisasi. Ca2+ yang memasuki sel melalui saluran Ca2+ tipe L selama depolarisasi memicu pelepasan Ca2+ lain ke dalam

sitosol dari suatu kompartemen, yaitu retikulum sarkoplasma (RS). Semakin banyak jumlah Ca2+ yang mengaktivasi, maka semakin kuat kontraksinya. Selama repolarisasi dan relaksasi otot jantung, Ca2+ dipompa kembali ke RS oleh Ca2+ -ATPase dan juga dikeluarkan dari dalam sel oleh protein penukar ion Na+-Ca2+ dan oleh Ca2+-ATPase sarkolema (Henry dan Wilson, 2007).

Digoksin menghambat pompa Na-K-ATPase pada membran sel otot jantung sehingga meningkatkan kadar Na+ intrasel, dan ini menyebabkan berkurangnya pertukaran Na+-Ca2+ selama repolarisasi dan relaksasi otot jantung sehingga Ca2+ tertahan di dalam sel, kadar Ca2+ intrasel meningkat, dan ambilan Ca2+ ke dalam retikulum sarkoplamik (RS) meningkat. Dengan demikian, Ca2+ yang tersedia dalam RS untuk dilepaskan ke dalam sitosol untuk kontraksi meningkat, sehingga kontraktilitas sel otot jantung meningkat (Arini dan Nafrialdi, 2011).

Peningkatan kontraksi otot jantung menyebabkan penurunan volume distribusi aksi, jadi meningkatkan efisiensi kontraksi (fraksi ejeksi meningkat). Akibat sirkulasi yang sudah baik itu terus menimbulkan aktivitas simpatik berkurang yang selanjutnya menurunkan resistensi perifer. Bersamaan dengan itu, efek-efek ini menyebabkan reduksi kecepatan jantung (Mycek, dkk., 2001)

b. Agonis β-adrenergik

Stimulasi β-adrenergik memperbaiki kemampuan jantung dengan efek inotropik spesifik dalam fase dilatasi. Dobutamin (iv), adalah obat inotropik yang paling banyak digunakan selain digitalis. Dobutamin menyebabkan peningkatan siklik-AMP intrasel, yang menyebabkan aktivasi protein kinase. Saluran kalsium lambat merupakan tempat penting fosforilasi protein kinase. Jika difosforilasi,

masuknya ion kalsium ke dalam sel miokardium meningkat, sehingga meningkatkan pula kontraksi (Mycek, dkk., 2001).

c. Penghambat fosfodiesterase

Inamrinon (dulu disebut amrinon) dan milrinon merupakan penghambat fosfodiesterase kelas III (PDE3) yang digunakan sebagai penunjang sirkulasi jangka pendek pada gagal jantung yang parah. Akan tetapi, pada penggunaan jangka panjang, obat-obat ini meningkatkan mortalitas (mempercepat kematian). Karena itu indikasinya hanya untuk penggunaan jangka pendek pada gagal jantung tahap akhir dengan gejala-gejala refrakter terhadap obat-obat lain (Arini dan Nafrialdi, 2011).

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Daun Afrika (Vernonia amygdalina Delile), umumnya dikenal sebagai daun yang pahit, merupakan semak yang tinggi puncaknya sekitar 3 meter. Tumbuh di beberapa negaradi Afrika, termasuk daerah tropis dan terutama Afrika Selatan, Zimbabwe, dan Nigeria (Gresham, et al., 2008). Daun Afrika ternyata sudah dikenal sejak dulu oleh masyarakat di Cina sebagai tanaman obat yang sangat mujarab. Mereka menyebutnya Nan Fei Shu dan di sebagian daratan Cina ada yang menyebut Nan Hui Ye. Konon tanaman ini digunakan oleh kalangan petinggi di lingkungan kekaisaran Cina sebagai obat untuk berbagai penyakit (Anonim, 2010).

Daun Afrika mengandung senyawa golongan saponin, flavonoid, sesquiterpen lakton, dan glikosida steroid (Ijeh dan Chukwunonso, 2010). Selain itu juga terdapat sesquiterpen lakton seperti vernodalin dan vernoamygdalin dan glikosida steroid seperti vernonioside B1 dan vernoniol B1 (Ojiako dan Nwanjo, 2006).

Beberapa penelitian yang telah dilakukan untuk daun Afrika pada hewan percobaan antara lain seperti antioksidan (Pinem, 2012), antimutagenik (Ginting, 2012), antikanker (Oyugi, et al., 2009; Gresham, et al., 2008) antidiabetes (Atangwho, et al.,2007; Nwanjo dan Nwokoro, 2004; Setiawan, 2012), dan analgetik (Njan, et al., 2008).

Penyakit kardiovaskuler telah menjadi penyebab kematian nomor satu secara global; lebih banyak orang yang meninggal setiap tahunnya dikarenakan

penyakit kardiovaskular dibandingkan penyebab lainnya. Sekitar 17,3 juta orang meninggal akibat penyakit kardiovaskular pada tahun 2008, yang mewakili 30% dari kematian global yang ada (WHO, 2013). Gagal jantung diartikan sebagai keadaan fungsi jantung yang abnormal, dimana jantung gagal memompakan darah secara adekuat untuk memenuhi kebutuhan metabolisme jaringan tubuh (Majid, 2005).

Kontraksi miokardium secara langsung sebanding dengan jumlah kalsium intrasel. Peningkatan frekuensi denyut jantung dapat meningkatkan kekuatan kontraksi. Apabila jantung berdenyut lebih sering, kalsium tertimbun dalam sel jantung, menyebabkan peningkatan kekuatan kontraksi jantung (DeBeasi, 2012). Beberapa obat yang memiliki efek terapi terhadap gagal jantung yang bersifat inotropik positif seperti glikosida jantung memiliki efek samping yang dapat mengurangi kegunaannya. Untuk itu diperlukan untuk mengembangkan obat baru yang lebih efektif dan memiliki efek samping yang lebih sedikit (Parsaee, et al., 2006).

Menurut Sembiring (2013), daun Afrika memiliki efek inotropik dan kronotropik positif. Ekstrak etanol daun Afrika (EEDA) dapat meningkatkan kontraksi dan denyut jantung secara bermakna jika dibandingkan dengan kontrol negatif. Hal ini juga diperkuat oleh Ijeh dan Chukwunonso (2010) yang telah melakukan studi pustaka yang menyatakan ternyata di dalam daun Afrika terkandung senyawa vernonioside yang memiliki kemiripan struktur dengan digoksin, sehingga diduga daun Afrika memiliki khasiat inotropik dan kronotropik.

Berdasarkan hal tersebut, maka peneliti tertarik untuk menguji efek inotropik dan kronotropik dari ekstrak etanol daun Afrika (EEDA) dalam larutan Krebs- Henseleit dengan dan tanpa kalsium pada isolat jantung tikus. Percobaan dilakukan menggunakan alat Langendorff, larutan fisiologis Krebs-Henseleit tanpa kalsium, sehingga peneliti dapat melihat efek inotropik dan kronotropik dari ekstrak etanol daun Afrika tanpa bantuan kalsium yang terkandung di dalam larutan Krebs-Henseleit.

1.2Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka rumusan masalah penelitian ini adalah:

a. apakah ekstrak etanol daun Afrika (EEDA) memiliki efek inotropik dalam larutan Krebs-Henseleit dengan dan tanpa kalsium?

b. apakah ekstrak etanol daun Afrika (EEDA) memiliki efek kronotropik dalam larutan Krebs-Henseleit dengan dan tanpa kalsium?

1.3.Hipotesis

Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka hipotesis penelitian adalah:

a. ekstrak etanol daun Afrika (EEDA) memiliki efek inotropik dalam larutan Krebs-Henseleit dengan dan tanpa kalsium.

b. ekstrak etanol daun Afrika (EEDA) memiliki efek kronotropik dalam larutan Krebs-Henseleit dengan dan tanpa kalsium.

1.4 Tujuan Penelitian

Berdasarkan hipotesis di atas, maka tujuan penelitian ini adalah:

a. untuk mengetahui efek inotropik ekstrak etanol daun Afrika (EEDA) dalam larutan Krebs-Henseleit dengan dan tanpa kalsium.

b. untuk mengetahui efek kronotropik ekstrak etanol daun Afrika (EEDA) dalam larutan Krebs-Henseleit dengan dan tanpa kalsium.

1.5Manfaat Penelitian

Manfaat penelitian ini adalah sebagai informasi tentang efek inotropik dan kronotropik dari ekstrak etanol daun Afrika dalam larutan Krebs-Henseleit dengan dan tanpa kalsium.

1.6 Kerangka Pikir Penelitian

Pada penelitian ini subjek yang digunakan adalah organ jantung dari tikus jantan galur Wistar dengan berat 150 – 200 g. Pada penelitian ini ada tiga variabel yaitu variasi dosis EEDA dengan larutan Krebs Henseleit, variasi dosis EEDA dengan larutan Krebs Henseleit tanpa kalsium, dan kontrol positif yaitu digoksin.

Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter

Gambar 1.1 Skema kerangka pikir penelitian

Karakteristik PK air

EEDA

% Peningkatan Kontraktilitas 1. Alkaloid 2. Flavonoid 3. Glikosida 4. Saponin 5. Tanin

6. Triterpen/Steroid 7. Glikosida Jantung

EEDA dosis 0,5 mg; 1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa Ca

Digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit

Uji efek inotropik dan kronotropik pada isolat jantung tikus

Skrining Fitokimia

%Peningkatan denyut jantung

EEDA dosis 0,5 mg; 1 mg dengan Krebs Henseleit

Digoksin 0,1 mg dengan Krebs Henseleit tanpa kalsium

EFEK INOTROPIK DAN KRONOTROPIK EKSTRAK ETANOL DAUN AFRIKA (Vernonia amygdalina Delile) DALAM LARUTAN KREBS - HENSELEIT DENGAN

DAN TANPA KALSIUM PADA ISOLAT JANTUNG TIKUS

ABSTRAK

Daun Afrika(Vernonia amygdalina Delile) merupakan tumbuhan tradisional yang telah digunakan dimasyarakat. Beberapa penelitian membuktikan daun Afrika memiliki efek antikanker, antidiabetes, analgetik, inotropik dan kronotropik positif. Daun Afrika memiliki efek sebagai inotropik dan kronotropik positif disebabkan karena daun Afrika mengandung senyawa vernonioside yang memiliki kemiripan struktur dengan digoksin.

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek inotropik dan kronotropik yang ditimbulkan ekstrak etanol daun Afrika pada isolat jantung tikus dengan menggunakan larutan fisiologis Krebs Henseleit dengan dan tanpa kalsium. Pengujian ini dilakukan dengan menggunakan alat Langendorff. Penelitian ini menggunakan 6 kelompok perlakuan. Kelompok 1 diberikan ekstrak etanol daun Afrika 0,5 mg, kelompok 2 diberikan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg, kelompok 3 diberikan ekstrak etanol daun Afrika 0,5 mg dengan dialiri larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium, kelompok 4 diberikan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg dengan dialiri larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium, kelompok 5 diberikan digoksin 0,1 mg, dan kelompok 6 diberikan digoksin 0,1 mg yang dialiri larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium. Data yang didapat berupa persen peningkatan kontraktilitas dan denyut isolat jantung dianalisis menggunakan ANOVA satu arah dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc, yaitu Tukey.

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kalsium memiliki pengaruh terhadap efek inotropik dan kronotropik ekstrak etanol daun Afrika. Ekstrak etanol daun Afrika 0,5 mg (-7,00±17,77) dan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg (-2,67±10,11) dengan Krebs-Henseleit tanpa kalsium memberikan efek penurunan kontraktilitas (inotropik negatif) jika dibandingkan dengan digoksin 0,1 mg yang memiliki peningkatan kontraktilitas sebesar 90,67±17,92 (p<0,05), dan juga dengan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg dengan peningkatan kontraktilitas sebesar 54,67±21,03 (p<0,05). Ekstrak etanol daun Afrika 1 mg dengan Krebs-Henseleit tanpa kalsium (-41,00±25,86) memberikan efek penurunan denyut (kronotropik negatif) jika dibandingkan dengan ekstrak etanol daun Afrika 0,5 mg (61,33±6,65) dan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg (107,00±26,23) (p<0,05).

Kata Kunci : daun Afrika, Krebs-Henseleit tanpa kalsium, inotropik, kronotropik.

INOTROPIC AND CHRONOTROPIC EFFECT OF AFRICAN LEAVES (Vernonia amygdalina Delile) ETHANOL EXTRACT

IN KREBS - HENSELEIT SOLUTION WITH AND WITHOUT CALCIUM ON ISOLATED

RAT HEART ABSTRACT

African leaves (Vernonia amygdalina Delile) is a traditional plant which has been used in the community. Several studies have shown thatAfrican leaves have the effect of anticancer, antidiabetic, analgesic, inotropic and chronotropic positive. African leaves have the effect as positive inotropic and chronotropic due to African leaves contain vernonoside compounds which is similar to digoxin structure.

This study aims to determine inotropic and chronotropic effectof African leaves ethanol extract in Krebs-Henseleit solution with and without calcium on isolated rat heart. This assessment used Langendorff apparatus. This study used 5 treatment groups. First group received African leaves ethanol extract dose 0.5 mg, second group received African leaves ethanol extract dose 1 mg, third group received African leaves ethanol extract dose 0,5 mg with Krebs-Henseleit calcium free, fourth group received African leaves ethanol extract dose 1 mg with Krebs-Henseleit calcium free, the fifth group received digoxin dose 0,1 mg, and the sixth group received digoxin dose 0,1 mgwith Krebs-Henseleit calcium free. The data of percent increase in contractility and heart rate iare analyzed with one way ANOVA and continued with Post Hoc test, is Tukey.

The results of this study showed that calcium has an influence on inotropic and chronotropic effect ofAfrican leaves ethanol extract. African leaves ethanol extract 0.5 mg (-7.00 ± 17.77) and African leaves ethanol extract 1 mg (-2.67 ± 10.11) with Krebs-Henseleit calcium free showed decreased heart contractility (negative inotropic) when compared to digoxin dose 0,1 mg that have an increased heart contractility of 90.67 ± 17.92 (p <0.05), and also with African leaves ethanol extract 1 mg with increased heart contractility of 54.67 ± 21.03 (p <0.05). African leaves ethanol extract 1 mg with Krebs-Henseleit calcium free (-41.00 ± 25.86) showed the effect of decreased heart rate (negative chronotropic) when compared with African leaves ethanol extract 0.5 mg (61.33 ± 6.65) and African leaves ethanol extract 1 mg (107.00 ± 26.23) (p <0.05).

EFEK INOTROPIK DAN KRONOTROPIK EKSTRAK

ETANOL DAUN AFRIKA (

Vernonia amygdalina

Delile)

DALAM LARUTAN KREBS - HENSELEIT DENGAN

DAN TANPA KALSIUM PADA ISOLAT

JANTUNG TIKUS

SKRIPSI

OLEH:

MAULIDA IFRAH LUBIS

NIM 111501103

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

EFEK INOTROPIK DAN KRONOTROPIK EKSTRAK

ETANOL DAUN AFRIKA (

Vernonia amygdalina

Delile)

DALAM LARUTAN KREBS - HENSELEIT DENGAN

DAN TANPA KALSIUM PADA ISOLAT

JANTUNG TIKUS

SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperolehgelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

OLEH:

MAULIDA IFRAH LUBIS

NIM 111501103

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

PENGESAHAN SKRIPSI

EFEK INOTROPIK DAN KRONOTROPIK EKSTRAKETANOL DAUN AFRIKA (Vernonia amygdalina Delile)DALAM LARUTAN KREBS -

HENSELEIT DENGAN DAN TANPA KALSIUM PADA ISOLAT JANTUNG TIKUS

OLEH:

MAULIDA IFRAH LUBIS NIM 111501103

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

Pada tanggal: 29 Agustus 2015 Disetujui oleh:

Pembimbing I, Panitia Penguji,

Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt. Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. NIP 19780603200512004 _NIP 195103261978022001

Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.

Pembimbing II, NIP 19780603200512004

Hari Ronaldo Tanjung, S.Si., M.Sc., Apt. Marianne, S.Si., M.Si.,Apt.

197803142005011002 NIP 198005202005012006

Drs. Saiful Bahri, M.S., Apt NIP 195208241983031001 Medan, Oktober 2015

Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara Pejabat Dekan,

Dra. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang berjudul “Efek Inotropik dan Kronotropik Ekstrak Etanol Daun Afrika (Vernonia amygdalina Delile) Dalam Larutan Krebs Henseleit Dengan dan Tanpa Kalsium Pada Isolat Jantung Tikus”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Pejabat Dekan Fakultas Farmasi dan Ibu Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt., selaku Wakil Dekan I Fakultas Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Ibu Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.,dan BapakHari Ronaldo Tanjung, S.Si., M.Sc., Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt., selaku ketua penguji, Ibu Marianne, S.Si., M.Si.,Apt., dan BapakDrs. Saiful Bahri, M.S., Apt., selaku anggota penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini, dan Bapak Drs. Maralaut Batubara, M.Phill., Apt., selaku dosen pembimbing akademik serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak membimbing penulis selama masa perkuliahan hingga selesai.

Penulis juga mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga kepada keluarga tercinta, Ayahanda Adnin Lubis dan Ibunda Samroh Lubis, kakak-kakakku Nuraini Lubis dan Siti Khalijah Lubis atas limpahan kasih sayang, semangat dan doa yang tak ternilai dengan apa pun. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada teman-teman angkatan 2011 khususya jurusan Farmasi Klinis dan Komunitas ; kepada para sahabat, Khadijah, Marta, Ila, Nurul, Merna; kepada kak Tiwi, kepada para asisten farmakologi, yaitu Nana, Marta, Albert, Indah, Elvi, Rendy, Gita, Bang Yunus, Bang Fauzan, Kak Dara, Kak Ridha, Bang Denny, dan Bang Asyrun yang telah memberikan semangat dan dukungan dalam menyelesaikan skripsi ini.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.

Medan, 29 Agustus 2015 Penulis,

Maulida Ifrah Lubis NIM 111501103

EFEK INOTROPIK DAN KRONOTROPIK EKSTRAK ETANOL DAUN AFRIKA (Vernonia amygdalina Delile) DALAM LARUTAN KREBS - HENSELEIT DENGAN

DAN TANPA KALSIUM PADA ISOLAT JANTUNG TIKUS

ABSTRAK

Daun Afrika(Vernonia amygdalina Delile) merupakan tumbuhan tradisional yang telah digunakan dimasyarakat. Beberapa penelitian membuktikan daun Afrika memiliki efek antikanker, antidiabetes, analgetik, inotropik dan kronotropik positif. Daun Afrika memiliki efek sebagai inotropik dan kronotropik positif disebabkan karena daun Afrika mengandung senyawa vernonioside yang memiliki kemiripan struktur dengan digoksin.

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek inotropik dan kronotropik yang ditimbulkan ekstrak etanol daun Afrika pada isolat jantung tikus dengan menggunakan larutan fisiologis Krebs Henseleit dengan dan tanpa kalsium. Pengujian ini dilakukan dengan menggunakan alat Langendorff. Penelitian ini menggunakan 6 kelompok perlakuan. Kelompok 1 diberikan ekstrak etanol daun Afrika 0,5 mg, kelompok 2 diberikan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg, kelompok 3 diberikan ekstrak etanol daun Afrika 0,5 mg dengan dialiri larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium, kelompok 4 diberikan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg dengan dialiri larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium, kelompok 5 diberikan digoksin 0,1 mg, dan kelompok 6 diberikan digoksin 0,1 mg yang dialiri larutan Krebs-Henseleit tanpa kalsium. Data yang didapat berupa persen peningkatan kontraktilitas dan denyut isolat jantung dianalisis menggunakan ANOVA satu arah dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc, yaitu Tukey.

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kalsium memiliki pengaruh terhadap efek inotropik dan kronotropik ekstrak etanol daun Afrika. Ekstrak etanol daun Afrika 0,5 mg (-7,00±17,77) dan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg (-2,67±10,11) dengan Krebs-Henseleit tanpa kalsium memberikan efek penurunan kontraktilitas (inotropik negatif) jika dibandingkan dengan digoksin 0,1 mg yang memiliki peningkatan kontraktilitas sebesar 90,67±17,92 (p<0,05), dan juga dengan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg dengan peningkatan kontraktilitas sebesar 54,67±21,03 (p<0,05). Ekstrak etanol daun Afrika 1 mg dengan Krebs-Henseleit tanpa kalsium (-41,00±25,86) memberikan efek penurunan denyut (kronotropik negatif) jika dibandingkan dengan ekstrak etanol daun Afrika 0,5 mg (61,33±6,65) dan ekstrak etanol daun Afrika 1 mg (107,00±26,23) (p<0,05).

Kata Kunci : daun Afrika, Krebs-Henseleit tanpa kalsium, inotropik, kronotropik.

INOTROPIC AND CHRONOTROPIC EFFECT OF AFRICAN LEAVES (Vernonia amygdalina Delile) ETHANOL EXTRACT

IN KREBS - HENSELEIT SOLUTION WITH AND WITHOUT CALCIUM ON ISOLATED

RAT HEART ABSTRACT

African leaves (Vernonia amygdalina Delile) is a traditional plant which has been used in the community. Several studies have shown thatAfrican leaves have the effect of anticancer, antidiabetic, analgesic, inotropic and chronotropic positive. African leaves have the effect as positive inotropic and chronotropic due to African leaves contain vernonoside compounds which is similar to digoxin structure.

This study aims to determine inotropic and chronotropic effectof African leaves ethanol extract in Krebs-Henseleit solution with and without calcium on isolated rat heart. This assessment used Langendorff apparatus. This study used 5 treatment groups. First group received African leaves ethanol extract dose 0.5 mg, second group received African leaves ethanol extract dose 1 mg, third group received African leaves ethanol extract dose 0,5 mg with Krebs-Henseleit calcium free, fourth group received African leaves ethanol extract dose 1 mg with Krebs-Henseleit calcium free, the fifth group received digoxin dose 0,1 mg, and the sixth group received digoxin dose 0,1 mgwith Krebs-Henseleit calcium free. The data of percent increase in contractility and heart rate iare analyzed with one way ANOVA and continued with Post Hoc test, is Tukey.

The results of this study showed that calcium has an influence on inotropic and chronotropic effect ofAfrican leaves ethanol extract. African leaves ethanol extract 0.5 mg (-7.00 ± 17.77) and African leaves ethanol extract 1 mg (-2.67 ± 10.11) with Krebs-Henseleit calcium free showed decreased heart contractility (negative inotropic) when compared to digoxin dose 0,1 mg that have an increased heart contractility of 90.67 ± 17.92 (p <0.05), and also with African leaves ethanol extract 1 mg with increased heart contractility of 54.67 ± 21.03 (p <0.05). African leaves ethanol extract 1 mg with Krebs-Henseleit calcium free (-41.00 ± 25.86) showed the effect of decreased heart rate (negative chronotropic) when compared with African leaves ethanol extract 0.5 mg (61.33 ± 6.65) and African leaves ethanol extract 1 mg (107.00 ± 26.23) (p <0.05).

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

HALAMAN JUDUL ... ii

HALAMAN PENGESAHAN ... iii

KATA PENGANTAR ... iv

ABSTRAK ... vi

ABSTRACT ... vii

DAFTAR ISI ... viii

DAFTAR TABEL ... xi

DAFTAR GAMBAR ... xii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiii

BAB I PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Perumusan Masalah ... 3

1.3 Hipotesis ... 3

1.4 Tujuan Penelitian ... 4

1.5 Manfaat Penelitian ... 4

1.6 Kerangka Pikir Penelitian ... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 6

2.1 Uraian Tumbuhan ... 6

2.1.1 Habitat ... 6

2.1.3 Sistematika tumbuhan ... 7

2.1.4 Nama asing ... 7

2.1.5 Kandungan kimia dan kegunaan ... 7

2.2 Ekstraksi ... 8

2.3 Kontraksi Jantung ... 9

2.4 Gagal Jantung Kongestif ... 12

2.5 Pengobatan Gagal Jantung ... 15

2.5.1 Terapi non-farmakologi ... 15

2.5.2 Terapi farmakologi ... 16

2.5.2.1 Vasodilator ... 16

2.3.2.2 Antagonis angiotensin II (AT1-bloker) ... 18

2.3.2.3 Diuretik ... 18

2.3.2.4 Antagonis aldosteron ... 19

2.3.2.5 Obat-obat inotropik ... 20

BAB III METODE PENELITIAN ... 23

3.1 Jenis Penelitian ... 23

3.2 Alat .. ... 23

3.3 Bahan ... 23

3.4 Hewan Percobaan ... 24

3.5 Penyiapan Sampel ... 24

3.5.1 Pengambilan, pengolahan sampel dan pembuatan EEDA .. 24

3.6 Pemeriksaan Karakteristik EEDA ... 24

3.6.1 Penetapan kadar air ... 24

3.7.1 Pemeriksaan alkaloid ... 25

3.7.2 Pemeriksaan flavonoid ... 26

3.7.3 Pemeriksaan saponin ... 26

3.7.4 Pemeriksaan tanin ... 27

3.7.5 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ... 27

3.7.6 Pemeriksaan glikosida ... 27

3.7.7 Pemeriksaan glikosida jantung ... 28

3.8 Pembuatan Larutan Krebs-Henseleit ... 28

3.9 Pembuatan Larutan Krebs-Henseleit Tanpa Kalsium ... 28

3.10 Pembuatan Larutan Induk EEDA ... 29

3.11 Pembuatan Larutan Uji EEDA ... 29

3.12 Uji Efek EEDA Terhadap Kontraktilitas dan Denyut pada Isolat Jantung Tikus ... 29

3.14 Analisis Hasil ... 30

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 32

4.1 Bahan Baku Ekstrak ... 32

4.2 Hasil Uji Efek Inotropik dan Kronotropik EEDA ... 33

4.2.1 Uji Inotropik ... 33

4.2.2 Uji Kronotropik ... 37

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 42

5.1 Kesimpulan ... 42

5.2 Saran ... ... 42

DAFTAR PUSTAKA ... 43

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

2.1 Klasifikasi gagal jantung ... 13

4.1 Hasil skrining fitokimia EEDA ... 33

4.2 Persen peningkatan kontraktilitas EEDA ... 34

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1 Kerangka pikir penelitian ... 5 4.1 Grafik peningkatan kontraktilitas EEDA ... 35 4.2 Grafik peningkatan denyut EEDA ... 39

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Hasil persetujuan etik penelitian ... 46

2. Gambar tumbuhan ... 47

3. Gambar alat, bahan, dan objek penelitian ... 48

4. Bagan penelitian ... 51

5. Perhitungan penetapan kadar air EEDA ... 52