Validasi Metode pada Penetapan Kadar Piroksikam dalam Sediaan Kapsul dengan Nama Generic dan Nama Dagang Secara Spektrofotometri Ultraviolet

(1)

Lampiran 1. Contoh Perhitung Pengambilan Sampel

Rumus yang digunakan :

n =

N

+

1

n = 21+1

n = 5,6 n = 6 Keterangan:

n = Jumlah sampel yang diteliti N = Jumlah populasi

(2)

Lampiran 2. Daftar Spesifikasi Sampel

1. Piroxicam (PT. INDOFARMA) No. Batch : 1107192

No. Reg : GKL 9320911901A1 Expire Date : Sep 2016

Komposisi : Piroxicam 20mg 2. Pirofel® (PT. SANBE FARMA)

No. Batch : 3401225

No.Reg : DKL972223935A1 Expire date : Juni 2016

Komposisi : Piroxicam 20mg 3. Infeld® (PT. INTERBAT)

No. Batch :038D001

No.Reg :DKL9017602201B1 Expire date : Juli 2016

Komposisi : Piroxicam 20mg 4. Pirocam® (PT. DEXA MEDICA)

No. Batch : 4503536

No.Reg : DKL8705003D1B1 Expire date : Maret 2019

(3)

Lampiran 2.(Lanjutan)

5. Omeretik® (PT.MUTIFA) No. Batch : 421192

No.Reg : DKL9216905301A1 Expire date : Oct 2016

Komposisi : Piroxicam 20mg 6. Mecodene® (Mecosin Indonesia)

No. Batch : 100421

No.Reg : DKL0814514901B1 Expire date : April 2015

(4)

Lampiran3.PerhitunganKonsentrasiPengukuran

Diketahui : Nilai A1₁, yaitu A1%

1cm= 813 b ( λ = 375) Tebalsel (b) = 1 cm

A = A1%

1cmx b x c ( c = g/100ml) c =

xb A

A cm

% 1 1

c =

813 4343 , 0

c = 0,000534 g/100ml c = 5,34 µg/ml

(5)

Lampiran4.PerhitunganPersamaanRegresiPiroksikam(Sigma–Aldrich)

No X Y XY X2 _Y2

1 0 0 0 0 0

2 2,000 0,178 0,356 4 0,031684

3 3,000 0,268 0,804 9 0,071824

4 4,000 0,355 1,420 16 0,126025

5 5,000 0,453 2,265 25 0,205209

6 6,000 0,540 3,240 36 0,2916

Ʃ 20,000 1,794 8,085 90 0,726342

Rata-rata

3,333 0,299 1,3475 15 0,121

Y = ax + b

a =

n x x n y x xy / ) ( / ) )( ( 2 2−Σ

Σ − Σ Σ

b = Y – a X

= 6 / ) 20 ( 90 6 / ) 794 , 1 )( 20 ( 085 , 8 2 − −

= 0,299 – (0,09018) (3,333)

= 34 , 23 105 , 2

= 0,299 – 0,3002994

= 0,09018 = = - 0,00129

r =

) / ) ( )( / ) ( ( / ) )( ( 2 2 2 n y y n x xy n y x xy Σ − Σ Σ − Σ Σ Σ − Σ = ) / ) 794 , 1 ( 726342 , 0 )( 6 / ) 20 ( 90 ( 6 / ) 794 , 1 )( 20 ( 085 , 8 2 2 n − − −

= 0,9998

Jadipersamaanregresi: Y = ax – b

(6)

Lampiran 5. Contoh Perhitungan Penetapan Kadar Piroksikam dalam sampel

(KapsulPirofel® SANBE)

Berat20 kapsul = 4978.6 mg

Kandungan piroksikampadaetiket = 20 mg Bobot rata-rata 1 kapsul = 248.93 mg

Ditimbangseksamaserbuk setara dengan 20.0 mg piroksikam, makaberatsampel yang ditimbangadalah :

= x mg

mg x

6 , 4978 20

20 20

= 248,93 mg

Sampel yang telahditimbangdimasukkankedalamlabutentukur 50ml, lalu ditambahkan metanol – HCl 0.1M dikocokhingga larut dan diencerkan dengan metanol – HCl 0.1 M sampaigaristanda.Kemudian, filtrate larutanujidipipet 0,25ml, laludimasukkankedalamlabutentukur 25ml dandicukupkandenganmetanol – HCl 0.1M sampaigaristanda.

Absorbansi yang diperolehadalah 0.368 Konsentrasiperolehan :

Y = 0,09012x – 0,00128

0,368 =

09012 , 0

00128 , 0 09012 ,

0 −

= 4,0976 µg/ml

Konsentrasipiroksikamsebelumdiencerkan100x

(7)

Lampiran5.(Lanjutan)

Kadar piroksikamdalamlabuawal (50 ml):

= 409,76 µg/ml x 50 ml = 20488 µg = 20,488 mg Kadarperolehanpiroksikamperkapsulnya

= x mg mg

mg mg

488 , 20 9

, 248 9

, 248

488 , 20

% Kadar = 100%

20 488 , 20

(8)

Lampiran6.Data PiroksikamdalamSediaanKapsul Nama Sediaan Bobotserbuk yang ditimbang (mg) Bobot rata-rata (mg) Absorbansi Kadar Perolehan / kapsul Kadar Etiket (mg) Kadar (%) Piroxicam (PT.Indofarma) 247,3 247,37

0,367 20,430

102,16

248,2 0,365 20,320 101,60

246,3 0,365 20,320 101,60

247,1 0,365 20,320 101,60

248,5 0,366 20,375 101,88

247,6 0,367 20,430 102,16

Pirofel® (PT.SanbeFarma)

248,9

248,93

0,368 20,485

102,44

247,8 0,375 20,095 104,37

248,2 0,374 20,150 104,37

248,1 0,351 20,010 97,72

248,0 0,357 19,875 99,38

248,5 0,355 19,765 98,83

Infeld® (PT.Interbat)

245,2

245,21

0,361 20,095

100,49

246,1 0,362 20,150 100,77

245,9 0,362 20,150 100,77

246,0 0,363 20,210 101,05

245,3 0,365 20,320 101,60

245,5 0,363 20,210 101,05

Pirocam® (PT.DexaMedica)

246,7

246,76

0,353 19,655 98,28

246,5 0,353 19,655 98,28

246,6 0,354 19,710 98,55

247,8 0,356 19,820 99,11

248,9 0,354 19,710 98,55

247,8 0,356 19,820 99,10

Omeretik® (PT.MutifaPharma)

203,4

203,42

0,356 19,820

99,10

204,4 0,360 20,040 100,22

208,1 0,361 20,095 100,49

205,3 0,364 20,265 101,33

204,9 0,363 20,210 101,05

(9)

Lampiran6.(Lanjutan)

NamaSediaan

Bobotserbuk yang ditimbang

(mg)

Bobot

rata-rata (mg)

Absorbansi

Kadar perolehan/

kapsul (mg)

Kadar etiket

(mg) Kadar (%)

Mecodene ® (PT.Mecosin Indonesia)

204,3

240,36

0,286 15,935

79,69

242,1 0,288 16,045 80,24

241,1 0,288 16,045 80,24

240,5 0,288 16,045 80,24

(10)

Lampiran7. PerhitunganStatistik Kadar

PiroksikampadaKapsulPiroxicamGenerik (PT.Indofarma)

No Kadar (X) (%)

Xi – X (Xi – X)2

1 102,16 0,33 0,1089

2 101,60 -0,23 0,0529

3 101,60 -0,23 0,0529

4 101,60 -0,23 0,0529

5 101,88 0,05 0,0025

6 102,16 0,33 0,1089

X = 101,83 Ʃ = 0,3790

SD = 1 ) ( 2 −− Σ n X Xi = 1 6 3790 , 0

− = 0,275318

Jikatarafkepercayaan 99% dengannilai∝ = 0,01 ; n = 6 ; dk = 5 daridaftar table distribusi t diperolehnilai t tabel = 4,03

Dataditolakjika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ -t tabel

thitung =

n SD X X / −

thitung 1 = 2,93599

112398 , 0 33 , 0 =

thitung 2 = 2,04629

112398 , 0 23 , 0 − = −

thitung 3 = 2,04629

112398 , 0 23 , 0 − = −

thitung 4 = 2,04629

112398 , 0 23 , 0 − = −

(11)

Lampiran7.(Lanjutan)

thitung 5 = 0,44484

112398 ,

0 05 , 0

= −

thitung 6 = 2,93599 112398

, 0

33 , 0

= −

Karena thitung ≤ t tabel maka data diterima. Kadar

piroksikamdalamsampelpiroksikam generik (PT.Indofarma):

µ = X % ± t (1-1/2∝) dk x % n SD

µ = 101,83 % ± (4,03 x 0,112398)% = (101,83± 0,453)%

(12)

Lampiran8. PerhitunganStatistik Kadar PiroksikampadaKapsulPirofel®

(PT.SanbeFarma) No Kadar (X)

(%)

Xi – X (Xi – X)2

1 102,44 1,3 1,69

2 104,37 3,23 10,4329

3 104,10 2,23 8,7616

4 97,72 -3,23 11,6964

5 99,38 -1,76 3,0976

6 98,83 -2,31 5,3361

X = 101,14 Ʃ = 41,0146

SD = 1 ) ( 2 −− Σ n X Xi = 1 6 0146 , 41

− = 2,864074

Jikatarafkepercayaan 99% dengannilai∝ = 0,01 ; n = 6 ; dk = 5 daridaftar table distribusi t diperolehnilai t tabel = 4,03

Data ditolakjika t hitung ≥ t table atau t hitung ≤ -t tabel

thitung =

n SD X X / −

thitung 1 = 1,11182

169253 , 1 3 , 1 =

thitung 2 = 2,76244

169253 , 1 23 , 3 =

thitung 3 = 2,53153

169253 , 1 96 , 2 =

thitung 4 = 2,92494

169253 , 1 42 , 3 − = −

(13)

Lampiran8. (Lanjutan)

thitung 5 = 1,50523

169253 ,

1 76 , 1

− = −

thitung 6 = 1,97562 169253

, 1

31 , 2

− = −

Karena thitung ≤ t tabel maka data diterima.Kadar piroksikamdalamsampelPirofel® (PT.SanbeFarma):

µ = X % ± t (1-1/2∝) dk x % n SD

µ = 101,83 % ± (4,03 x 1,169253)% = (101,14± 4,71)%

(14)

Lampiran9.PerhitunganStatistik Kadar PiroksikampadaKapsulInfeld®

(PT.Interbat)

No Kadar (X) (%)

Xi – X (Xi – X)2

1 100,49 -0,465 0,216225

2 100,77 -0,185 0,034225

3 100,77 -0,185 0,034225

4 101,05 0,095 0,009025

5 101,60 0,645 0,416025

6 101,05 0,095 0,009025

X = 100,95 Ʃ = 0,71875

SD = 1 ) ( 2 −− Σ n X Xi = 1 6 71875 , 0

− = 0,379144

Jikatarafkepercayaan 99% dengannilai∝ = 0,01 ; n = 6 ; dk = 5 daridaftar table distribusi t diperolehnilai t tabel = 4,03

Data ditolakjika t hitung ≥ t table atau t hitung ≤ -t tabel

thitung =

n SD X X / −

thitung 1 = 3,004167

154785 , 0 465 , 0 − = −

thitung 2 = 1,195206

154785 , 0 185 , 0 − = −

thitung 3 = 1,195206

154785 , 0 185 , 0 − = −

thitung 4 = 0,613754

154785 , 0 095 , 0 − = −

(15)

Lampiran9.(Lanjutan)

thitung 5 = 4,167070

154785 , 0 645 , 0 = (ditolak) thitung 6 = 0,613754

154785 , 0 095 , 0 − = −

No Kadar (X) (%)

Xi – X (Xi – X)2

1 100,49 -0,34 0,1156

2 100,77 -0,06 0,0036

3 100,77 -0,06 0,0036

4 101,05 0,022 0,0484

5 101,05 0,022 0,0484

X = 100,83 Ʃ = 0,2196

SD = 1 ) ( 2 −− Σ n X Xi = 1 6 2196 , 0

− = 0,23426

Jikatarafkepercayaan 99% dengannilai∝ = 0,01 ; n = 6 ; dk = 5 daridaftar table distribusi t diperolehnilai t tabel = 4,03

Dataditolakjika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ -t tabel

thitung =

n SD X X / −

thitung 1 = 3,2073

10476 , 0 336 , 0 − = −

thitung 2 = 0,5345

10476 , 0 056 , 0 − = −

thitung 3 = 0,5345

10476 , 0 056 , 0 − = −

(16)

Lampiran9.(Lanjutan)

thitung 4 = 2,1382

10476 , 0

224 , 0

= thitung 5 = 2,1382

10476 , 0

224 , 0

Karena thitung ≤ t tabel maka data diterima.Kadar piroksikamdalamsampelInfeld® (PT.Interbat):

µ = X % ± t (1-1/2∝) dk x % n SD

µ = 100,83 % ± (4,03 x 0,10476)% = (101,83 ± 0,422)%

(17)

Lampiran10.PerhitunganStatistikKadar PiroksikampadaKapsulPirocam®

(PT.DexaMedica)

No Kadar (X) (%)

Xi – X (Xi – X)2

1 98,28 -0,37 0,1369

2 98,28 -0,37 0,1369

3 98,55 -0,1 0,0100

4 99,11 0,46 0,2116

5 98,55 -0,1 0,0100

6 99,10 0,45 0,2025

X = 98,65 Ʃ = 0,7079

SD = 1 ) ( 2 −− Σ n X Xi = 1 6 7079 , 0

− = 0,376271

Jikatarafkepercayaan 99% dengannilai∝ = 0,01 ; n = 6 ; dk = 5 daridaftar table distribusi t diperolehnilai t tabel = 4,03

Dataditolakjika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ -t tabel

thitung =

n SD X X / −

thitung 1 = 2,4087

153612 , 0 37 , 0 − = −

thitung 2 = 2,4087 153612 , 0 37 , 0 − = −

thitung 3 = 0,6509

153612 , 0 1 , 0 − = −

thitung 4 = 2,9946

153612 , 0 46 , 0 =

(18)

Lampiran10.(Lanjutan)

thitung 5 = 0,6509

153612 ,

0 1 , 0

− = −

thitung 6 = 2,9295 153612

, 0

45 , 0

Karena thitung ≤ t tabel maka data diterima. Kadar piroksikamdalamsampelPirocam® (PT.DexaMedica):

µ = X % ± t (1-1/2∝) dk x % n SD

µ = 98,65 % ± (4,03 x 0,153612)% = (98,65± 0,619)%

(19)

Lampiran11.PerhitunganStatistik Kadar

PiroksikampadaKapsulOmeretik®(PT.Mutifa)

No Kadar (X) (%)

Xi – X (Xi – X)2

1 99,10 -1,23 1,5129

2 100,22 -0,37 0,1369

3 100,49 -0,1 0,0100

4 101,49 0,74 0,5476

5 101,05 0,46 0,2116

6 101,33 0,74 0,5476

X = 100,59 Ʃ = 2,9666

SD = 1 ) ( 2 −− Σ n X Xi = 1 6 9666 , 2

− = 0,770273

Jikatarafkepercayaan 99% dengannilai∝ = 0,01 ; n = 6 ; dk = 5 daridaftar table distribusi t diperolehnilai t tabel = 4,03

Dataditolakjika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ -t tabel

thitung =

n SD X X / −

thitung 1 = 3,9114

314462 , 0 23 , 1 − = −

thitung 2 = 1,1766

314462 , 0 37 , 0 − = −

thitung 3 = 0,3180

314462 , 0 1 , 0 − = −

thitung 4 = 2,3532

314462 , 0 74 , 0 =

(20)

Lampiran11.(Lanjutan)

thitung 5 = 1,4628

314462 ,

0 46 , 0

thitung 6 = 2,3532 314462

, 0

74 , 0

Karena t hitung ≤ t tabel maka data diterima. Kadar piroksikamdalamsampelOmeretik®(PT.Mutifa):

µ = X % ± t (1-1/2∝) dk x % n SD

µ = 100,59 % ± (4,03 x 0,314462)% = (100,59 ± 1,27)%

(21)

Lampiran12.PerhitunganStatistik Kadar

PiroksikampadaKapsulMecodene®(PT.Mecosin)

No Kadar (X) (%)

Xi – X (Xi – X)2

1 79,69 -0,515 0,2652

2 80,24 0,045 0,0020

3 80,24 0,045 0,0020

4 80,24 0,045 0,0020

5 80,24 0,045 0,0020

6 80,52 0,325 0,1056

X = 80,195 Ʃ = 0,37895

SD = 1 ) ( 2 −− Σ n X Xi = 1 6 9666 , 2

− = 0,770273

Jikatarafkepercayaan 99% dengannilai∝ = 0,01 ; n = 6 ; dk = 5 daridaftar table distribusi t diperolehnilai t tabel = 4,03

Data ditolakjika t hitung ≥ t table atau t hitung ≤ -t tabel

thitung =

n SD X X / −

thitung1 = 0,4004

1124 , 0 045 , 0 =

thitung2 = 0,4004

1124 , 0 045 , 0 =

thitung3 = 0,4004

1124 , 0 045 , 0 =

thitung4 = 0,4004

1124 , 0 045 , 0 =

(22)

Lampiran12.(Lanjutan)

thitung5 = 2,8918

1124 , 0

325 , 0

Karena thitung ≤ t tabel maka data diterima.Kadar piroksikamdalamsampelMecodene®(PT.Mecosin):

µ = X % ± t (1-1/2∝) dk x % n SD

µ = 80,195 % ± (4,03 x 0,1123)% = (80,195 ± 0,4529)%

Persenkadarobat yang menurun:

= 100% 20%

100 80 100

(23)

Lampiran13.ContohPerhitunganPerolehanKembali (% recovery)

Sampel yang digunakanadalahkapsulpirofel( PT.SanbeFarma)

Berat20 kapsul = 4978,6 mg

Kandunganpiroksikampadaetiket = 20 mg Ditimbangseksamaserbuksetaradengan 20.0 mg piroksikam.

Piroksikam =

Perolehan 80%

mg mg

x20 16

100 80

Analit 70% = x16mg 11,2mg

100 70

Sampel yang ditimbang = x mg x mg 6 , 4978 20 20 2 , 11 = 139,4mg

Baku 30% = x16mg

100 30

= 4,8 mg

Absorbansisebelumpenambahanbaku = 0,256 Konsentrasipiroksikam:

Y = 0,09012x – 0,00128

= 09012 , 0 00128 , 0 256 , 0 +

X = 2,8548µg/ml Konsentrasipiroksikamsebelumdiencerkan100x

= 2,8548 µg/ml x 100 = 285,48 µg/ml Kadar piroksikamdalamlabuawal (50 ml)

= 285,48 µg/ml x 50 ml = 14274,3 µg = 14,274mLampiran13.(Lanjutan)

(24)

Lampiran13. (Lanjutan)

KonsentrasiPiroksikam:

Y = 0,09012x – 0,00128

= 09012 , 0 00128 , 0 344 , 0 +

x = 3,8313µg/ml

Konsentrasipiroksikamsebelumdiencerkan100x = 3,8313 µg/ml x 100 = 383,13 µg/ml Kadar piroksikamdalamlabuawal (50 ml)

= 383,13µg/ml x 50 ml = 19156,6 µg = 19,156mg Makapersenperolehankembalipiroksikam:

= 100%

8 , 4 274 , 14 156 , 19 x mg mg mg− = 101,7% Piroksikam = Perolehan 100% mg mg

x20 20

100 100

Analit 70% = x20mg 14mg

100 70

Sampel yang ditimbang = x mg x mg 6 , 4978 20 20 14 = 174,25mg

Baku 30% = x20mg

100 30

= 6mg

Absorbansisebelumpenambahanbaku= 0,256 Y = 0,09012x – 0,00128

(25)

Lampiran13. (Lanjutan) = 09012 , 0 00128 , 0 256 , 0 +

x = 2,8549µg/ml

Konsentrasipiroksikamsebelumdiencerkan100x = 2,8549 µg/ml x 100 = 285,49 µg/ml Kadar piroksikamdalamlabuawal (50 ml)

= 285,49µg/ml x 50 ml = 14274 µg = 14,274mg Absorbansisetelahpenambahanbakuadalah 0,365

Y = 0,09012x – 0,00128

x =

09012 , 0 00128 , 0 365 , 0 + = 4,0643µg/ml Konsentrasipiroksikamsebelumdiencerkan100x = 4,0643 µg/ml x 100 = 406,43 µg/ml Kadar piroksikamdalamlabuawal (50 ml)

= 393,12µg/ml x 50 ml = 20321,8 µg = 20,322mg Makapersenperolehankembalipiroksikam:

= 100%

6 274 , 14 322 , 20 x mg mg mg− = 100,8%

(26)

Lampiran13.(Lanjutan)

Piroksikam =

Perolehan 120%

mg mg

x20 24

100 120

Analit 70% = x24mg 16,8mg

100 70

Sampel yang ditimbang = x mg x mg 6 , 4978 20 20 8 , 16 = 209,1mg

Baku 30% = x24mg

100 30

= 7,2mg

Absorbansisebelumpenambahanbaku = 0,308 Y = 0,09012x – 0,00128

x =

09012 , 0 00128 , 0 308 , 0 + = 3,4319µg/ml Konsentrasipiroksikamsebelumdiencerkan100x = 3,4319µg/ml x 100 = 243,19 µg/ml Kadar piroksikamdalamlabuawal (50 ml)

= 243,19µg/ml x 50 ml = 17159,3 µg = 17,159mg Absorbansisetelahpenambahanbakuadalah 0,440

Y = 0,09012x – 0,00128

x =

09012 , 0 00128 , 0 440 , 0 + = 4,8966µg/ml Konsentrasipiroksikamsebelumdiencerkan100x = 4,8966 µg/ml x 100 = 489,66 µg/ml

(27)

Lampiran13.(Lanjutan)

Kadar piroksikamdalamlabuawal (50 ml)

= 489,66µg/ml x 50 ml = 2448,3 µg = 24,483mg Makapersenperolehankembali:

= 100%

2 , 7

159 , 17 483

, 24

x mg

mg mg−

(28)

Lampiran14.Data HasilPersenPerolehanKembalipadaKapsulPirofel® (PT.Sanbe

Farma) denganMetodePenambahan Baku (Standard Addiation Method)

Konsentrasi (%)

Absorbansi

Kadar Baku yang

ditambahkan (C) (mg) Per �−� � Setelahpenambahanbaku (A) (mg) Sebelumpenambahanbaku (B) (mg) 1 80

0,344 19,157 14,274

4,8

2 0,342 19,046 14,274

3 0,344 19,157 14,329

4 100 0,365 20,322 14,274

5 0,368 20,488 14,329

6 0,368 20,488 14,385

7 120 0,440 24,483 17,159

7,2

8 0,442 24,594 17,436

9 0,444 24,705 17,270

Rata –rata (%Recovery) 101,26

Standard Deviation (SD) 1,315

Relative Standard Deviation 1,299

SD = 1 ) ( 2 − − n X X = 8 8389 , 13 = 1,315 RSD = X SD x 100% = 26 , 101 315 , 1 x 100%

= 1,299 %

(29)

Persamaangarisregresinyaadalah Y = 0,09012 x – 0,00128 No Konsentrasi

µg/ml

Absorbansi Y

Yi Y - Yi (Y-Yi)2

1 0 0 0 0 0

2 2 0,178 0,179 -0,001 0,000001

3 3 0,268 0,269 -0,001 0,000001

4 4 0,355 0,359 -0,004 0,000016

5 5 0,453 0,449 0,004 0,0016

6 6 0,540 0,539 0,001 0,000001

Ʃ 20 1,794 0,001619

Rata-rata 3,333

SY/X =

2 ) ( 2 − − Σ n yi y = 2 6 001619 , 0 − = 0,0201

LOD =

Slope X xSY / 3 = 09012 , 0 0201 , 0 3x

= 0,669 µg/ml

LOQ =

Slope X xSY / 10 = 09012 , 0 0201 , 0 10x

= 2,23 µg/ml

(30)

Sebelumpenambahanbahanbaku

Rentang 80%

SesudahPenambahan Baku

Sebelumpenambahanbaku

Rentang 100%

(31)

Setelahpenambahanbaku

Sebelumpenambahanbaku

Rentang 120%

Setelahpenambahanbaku

(32)

(33)

Lampiran19.AlatSpektrofotometri Ultraviolet (UV-1800 Shimadzu UV

(34)

Lampiran 19. Data Sampel Piroksikam Omeretik

(35)

Infield

(36)

Lampiran 19. (Lanjutan) PiroxicamPT. Dexa Medica

Pirofel

(37)

DAFTAR PUSTAKA

Anief, M. (1986).Ilmu Farmasi. Galia Indonesia, Jakarta. Hal. 59-60.

Chinese Pharmacopeia Commision.(2005). Pharmacopeia of People’s Republic of China, Volume 2. People’s Medical Publishing House. Pages.665-667. Day, R. A., dan Underwood, A. L. (1998). Quantitative Analysis Sixth Edition.

Penerjemah: Sopyan, I. (2002). Analisis Kimia Kuantitatif Edisi Keenam. Jakarta: Erlangga. Hal.413-415.

Dibbern, H.W,. Muller, R. M., Wirbitzki, E. (2002). UV and IR Spectra.Edisi cantor Verlag Jerman Aulendrof. German: Hal. 1350.

Ditjen, POM. (1995). Farmakope Indonesia Edisi ke IV. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Hal.3, 683, 1133.

Ditjen, Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan.(2014). Farmakope Indonesia Edisi ke V Buku II. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Hal.1030.

Ermer, J. and McB. Miller, J. H. (2005).Methode Validasi in Pharmaceutical Analysis.Electric Version.

Fernanda, H. F. (2011). Validasi Method Penetapan Kadar Piroxicam Dalam Campuran Paracetamol dan Piroxicam menggunakan spektrofotometri UV-Vis.

Gandjar, I. G., dan Rohman, A. (2012). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 378-390, 406, 456-473.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Review Artikel. Majalah Ilmu Kefarmasian. Vol 1 (3). Hal. 117-135.

Madhukar.A., Sudheer Kumar, P., Anand, CH., Samrat, T., Hemlatha dan Tajuddin Baba, Mohd. (2011). Rapid Analytical method Development and Validation of Piroxicam by RP-HPLC. India: J.Chem.Pharm.Res. Hal. 464-469.

Moffat, A.C.,Oseselton, M. D. Dan Widdop, B. (2004). Clarke’s Analysis Of Durg And Poisons. Thirt Edition London: Pharmaceutical Press. Electric Version.

Munson, J. W. (1984). Pharmaceutical Analysis – Part B Maodern Methods. Penerjemah: Harjana. (1991). Analisis Farmasi Metode Modern Bagian-B. Surabaya: Airlangga University Press. Hal. 15 – 20.

(38)

Puspitasari, I. (2006). Cerdas Mengenali Penyakit dan Obat. Yogyakarta: Bentang Pustaka. Hal. 4.

Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.Hal.240-243.

Satiadarma, K., Mulya, M., Tjahjono, D. H., dan Kartasasmita, R. E. (2004).Azas Pengmbangan Prosedur Analisis.Surabaya: Airlangga University Press. Hal.87-91.

Sudjadi dan Rohman, A. (2012).Analisis Farmasi. Yogyakarta: pustaka Pelajar. Hal.67-68.

Sudjana.(2002). Metode Statistika. Edisi VI. Bandung: Tarsito. Hal. 168. Syamsuni, H. A. (2006). Ilmu Resep. Jakarta; EGC. Hal.54-56.

Torbeck, L. D. (2009). Pharmaceutical Technology Volume 33, Issue 10, pp 128. Watson, G. D. (2005). Pharmaceutical Analysis: A Textbook for Pharmacy

Students and Pharmaceutical. Penerjemah: Syarief W. R. (2009).Analisis farmasi: Buku Ajar untuk Mahasiswa Farmasi dan Praktisi Kimia Farmasi. Edisi II. Jakarta: EGC. Hal. 9,110.

Wilmana, P.F dan Gan, S. (2009).Analgesik – Antipiretik Analgesik Anti – Inflamasi Nonsteroid dan Obat Pirai. Dalam: Ganiswarna, S.G. Setiabudy, R. Suyatna, F.D. Purwantyastuti. Nafrialdi.(2007).Farmakologi dan Terapi.Edisi kelima.Jakarta: Gaya Baru. Halaman 230-241.

Yakin, S. N. (2011). Pembuatan Tablet Piroksikam Dengan Metode Cetak Langsung Menggunakan Superdesintegran Ac-Di-Sol dan Krospovidon. Medan: USU press.

(39)

BAB III

METODE PENELITIAN

Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif yang bertujuan untuk menggambarkan kondisi sampel sebenarnya,dilakukan pada Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara dari bulan Juni sampai Agustus 2015.

3.1Alat − alat

Alat – alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Spektrofotometer ultraviolet (UV Spectrophotometer Shimadzu 1800), neraca analitik (Mettler Toledo), dan alat-alat gelas.

3.2Bahan − bahan

Bahan − bahan yang digunakan adalah metanol,asam klorida, piroksikam (Sigma-Aldrich), kapsul piroxicam (PT Indofarma), kapsul pirofel (PT Sanbe Farma), kapsul mecodene (PT. Mecosin Indonesia), kapsul omeretik (PT. Mutifa Pharma), kapsul infeld (PT. Interbat), kapsul pirocam (PT. Dexamedica).

3.3Pengambilan Sampel

Pengambilan sampel dilakukan secara purposif(Sudjana,2002), yaitu tanpamembandingkan satu tempat dengan tempat yang lain, karena semua sampel dianggap homogen. Piroksikam dalam sediaan kapsul yang beredar dipasaran terdapat 21 sediaan yang diproduksi.Rumus yang digunakan untuk penentuan

(40)

jumlah sampel yaitu

N

+

1

(Torbeck, 2009).Masing-masing dari nama obat piroksikam dalam sediaan kapsul tersebut kemudian ditulis dikertas dan dimasukkan kedalam wadah. Selanjutnya diambil 6 sampel secara acak dan diperoleh masing-masing 5 sediaan piroksikam dengan nama dagang dan 1 sediaan piroksikam dengan nama generik (contoh perhitungan pengambilan sampel dapat dilihat pada Lampiran 1, Halaman 37).

3.4Prosedur Penelitian 3.4.1 Pembuatan Pereaksi

3.4.1.1Pembuatan Metanol–HCl 0.1M

Asam klorida (pekat) sebanyak 8.5 ml diencerkan dengan metanol sampai 1000 ml (Ditjen.POM.,1995).

3.4.2 Pembuatan Kurva Serapan dan Kurva Kalibrasi Larutan Piroksikam dalam Metanol–HCl 0.1M

3.4.2.1Pembuatan Larutan Induk Baku I Piroksikam (Sigma – Aldrich)

Piroksikam ditimbang sebanyak 50 mg dan dimasukkan kedalam labu tentukur 50.0 ml, ditambahkan metanol−HCl 0.1M, dikocok lebih kurang 5 menit, kemudian dicukupkan dengan metanol−HCl 0.1M sampai garis tanda.Konsentrasi piroksikam Larutan Induk Baku (LIB) I adalah 1000 µg/ml.

3.4.2.2Pembuatan Larutan Induk Baku II Piroksikam (Sigma – Aldrich)

Dipipet 5.0 ml Larutan Induk Baku I kemudian dimasukkan kedalam labu tentukur 50.0 ml dan dicukupkan dengan metanol−HCl 0.1M sampai garis tanda.Konsentrasi piroksikam Larutan Induk Baku (LIB) II adalah 100.0 µ g/ml.

(41)

3.4.2.3Pembuatan Blanko dan Penentuan Baseline

Pelarut Metanol−HCl 0.1M dimasukkan kedalam kedua kuvet sebagai blanko, kemudian diukur absorbansinya sehingga didapat baseline untuk pengukuran sampel.

3.4.2.4Pembuatan Kurva Serapan Piroksikam (Sigma – Aldrich)

Dari Larutan Induk Baku II dipipet sebanyak 1.0 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 25.0 ml dicukupkan dengan metanol–HCl 0.1M sampai garis tanda. Konsentrasi piroksikam adalah 4.0 µ g/ml. Lalu diukur serapannya dengan Spektrofotometer UV pada panjang gelombang 200 − 400 nm.

3.4.2.5Pembuatan danPenentuan Linieritas Kurva Kalibrasi Piroksikam (Sigma – Aldrich) dalam Larutan Metanol–HCl 0.1 M

Dari Larutan Induk Baku II dibuat larutan piroksikam dengan berbagai konsentrasi yaitu : 2.0; 3.0; 4.0; 5.0; 6.0 µg/ml dengan memipet Larutan Induk Baku II masing – masing : 1.0; 1.5; 2.0; 2.5; 3.0 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml kemudian dicukupkan dengan metanol–HCl 0.1M sampai garis tanda, dikocok sampai homogen. Diukur serapannya dengan Spektrometer UV pada panjang gelombang maksimum yang diperoleh dengan menggunakan metanol–HCl 0.1M.

3.4.2.6Penentuan Kadar Piroksikam dalam Sediaan Kapsul

Ditimbang piroksikam sebanyak 20 kapsul, dicatat beratnya, isi piroksikam dalam kapsul dikeluarkan kemudian digerus homogen, cangkang kapsul ditimbang. Serbuk piroksikam ditimbang setara dengan 20 mg sebanyak 6 kali, masing-masing dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, kemudian dilarutkan dengan metanol−HCl 0.1M, dikocok lebih kurang 5 menit, dicukupkan

(42)

dengan metanol−HCl 0.1M sampai garis tanda, konsentrasi piroksikam adalah 400.0 µg/ml.

Disaring dan lebih kurang 5.0 ml filtrat pertama dibuang dan filtrat selanjutnya ditampung. Dari larutan dipipet 0.25 ml dan dimasukkan kedalam labu tentukur 25.0 ml, dicukupkan dengan metanol–HCl 0.1M sampai garis tanda, konsentrasi piroksikam adalah 4.0 µg/ml. Kemudian ukur serapannya pada panjang gelombang dengan menggunakan metanol–HCl 0.1M sebagai blanko.

3.5 Uji Validasi dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi, dan Batas Kuantitasi.

3.5.1 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali (% Recovery)

Menurut Harmita (2004), uji akurasi dilakukan dengan metode penambahan baku (Standard Addition Method) yaitu dengan membuat 3 konsentrasi analit sampel dengan rentang spesifik 80%, 100%, 120%, dihitung dari jumlah piroksikam yang terdapat pada etiket, dimana masing masing dilakukan sebanyak 3 kali replikasi. Setiap rentang spesifik mengandung 70 % analit dan 30% baku pembanding, kemudiaan dianalisis dengan perlakuan yang sama seperti pada penetapan kadar sampel (hasil dapat dilihat pada Tabel 4, Halaman 30).

Menurut Harmita (2004), persen perolehan kembali (% Recovery) dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut :

% Recovery = C

B A−

x 100 %

Keterangan : A = konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan baku B = konsentrasi sampel sebelum penambahan baku

(43)

C = konsentrasi baku yang ditambahkan.

3.5.2 Uji Presisi

Menurut Harmita(2004), uji presisi (keseksamaan) ditentukan dengan parameter RSD (Relative Standard Deviation) dengan rumus:

RSD = x100%

X SD

Keterangan : RSD = Relative Standard Deviation SD = Standard Deviation

X = Kadar rata-rata piroksikam dalam sampel

3.5.3 Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)

Menurut Watson (2005), nilai batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ) dihitung dari persamaan regresi yang diperoleh dari kurva kalibrasi. Batas Deteksi (Limit Of Detection/ LOD) dan Batas Kuantitasi (Limit Of Quantitation/ LOQ)dapat dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut :

2 ) ( /

− −

∑

n Yi Y x

Slope x Sy x

LOD=3 /

Slope x Sy x

LOQ=10 /

Keterangan:

Sy/x = Standar Deviasi Slope = Derajat Kemiringan

LOD = Batas Deteksi (Limit Of Detection) LOQ = Batas Kuantitasi (Limit Of Quantitation)

(44)

3.5.4Analisis Data Statistik

Data perhitungan kadar dianalisis secara statistik menggunakan uji t.

Menurut Harmita (2004), rumus yang digunakan untuk menghitung Standar Deviasi (SD) adalah :

1 )

(

−

=

∑

n

X

SD

Kadar dapat dihitung dengan persamaan garis regresi dan untuk menentukan data diterima atau ditolak digunakan rumus:

t hitung

n SD

X X

/ − =

Dengan dasar penolakan apabila t hitung ≥ t tabel , pada taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n – 1.

Keterangan:

SD = Standar deviasi

X = Kadar dalam satu perlakuan

X = Kadar rata-rata dalam satu sampel

n = Jumlah perlakuan

Menurut Harmita (2004), untuk mencari kadar sebenarnya dapat digunakan rumus:

n SD x t

X (11/2α)dk

µ

= ± −

Keterangan:

μ = Kadar sebenarnya dk = Derajat kebebasan

(45)

X = Kadar sampel n = Jumlah perlakuan

(46)

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Menurut Farmakope Indonesia Edisi IV (1995), sepektrum serapan ultraviolet menggunakan pelarut asam klorida−metanol 0,01 N.

Berdasarkan pada penelitian sebelumnya dari Yakin (2011), yaitu Pembuatan Tablet Piroksikam Dengan Metode Cetak Langsung Menggunakan Superdisintegran Ac-Di-sol dan Krospovidon, bahwa pelarut yang digunakan pada penetapan kadar dari obat piroksikam tablet yang telah dimodifikasi adalah metanol-HCl 0,1 M dengan panjang gelombang 333,0 nm.

Dari hasil orientasi ternyata piroksikam sukar larut dalam metanol dan demikian juga dalam HCl 0.01M. Menurut Chinese Pharmacopeia Commision tahun 2005, piroksikam memberikan serapan maksimum dalam pelarut metanol − HCl 0.1M pada panjang gelombang 334,0 nm, berdasarkan hal tersebut peneliti menggunakan metanol − HCl 0.1M sebagai pelarut dari piroksikam.

4.1 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum Piroksikam

Sebelum dilakukan penetapan kadar kapsul piroksikam, terlebih dahulu dilakukan penetapan panjang gelombang maksimum oleh karena panjang gelombang maksimum suatu senyawa dapat berbeda bila ditentukan dengan kondisi dan alat yang berbeda.

Penentuan panjang gelombang ini dilakukan dalam pelarut metanol − HCl 0.1M pada konsentrasi yang memberikan serapan dengan kesalahan fotometrik terkecil, yaitu ± 0.4343. Untuk mendapatkan konsentrasi tersebut dilakukan

(47)

orientasi. Dari orientasi dapatdiperoleh konsentrasi pengukuran terbaik yaitu 4.0 µg/ml(contoh perhitungan dapat dilihat pada Lampiran3, Halaman 40).

Hasil yang diperoleh dari penentuan panjang gelombang maksimum dengan konsentrasi 4.0 µg/ml yaitu 335 nm dengan serapan 0.363, seperti terlihat padaGambar4.1. danTabel 4.1. Adanya perbedaan panjang gelombang ini masih dalam batas-batas yang diterima menurut Farmakope Indonesia edisi V.

Gambar 4.1.Kurva serapan baku piroksikam (Sigma − Aldrich) dalam pelerut metanol − HCl 0.1M (konsentrasi 4.0 µg/ml)

Tabel 4.1. Data absorbansi dari kurva serapan

Selanjutnya, untuk penetapan kadar piroksikam dalam sediaan kapsul generik dan namadagang yang beredar dipasaran dilakukan pada panjang gelombang maksimum yang diperoleh.

(48)

4.2 Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi Piroksikam

Penentuan kurva kalibrasi piroksikam dilakukan pada rentang konsentrasi 2.0− 6.0 µg/ml pada panjang gelombang 335 nm menggunakan metanol − HCl 0.1M sebagai blanko. Kurva kalibrasi dapat dilihat pada Gambar4.2. Dari hasil pembuatan kurva kalibrasi diperoleh hubungan yang linier antara serapan dan konsentrasi dengan koefisien korelasi (r) = 0.99982 dan persamaan garis regresi Y= 0.09012X – 0.00128. Nilai koefisien korelasi ini memenuhi kriteria penerimaan untuk korelasi yaitu r ≥ 0. 995 (Moffat, dkk., 2004) (contoh perhitungan dapat dilihat pada Lampiran4,Halaman 41).

Gambar 4.2.Kurva kalibrasi baku piroksikam (Sigma−Aldrich) dalam pelarut metanol-HCl 0.1M pada panjang gelombang 335 nm

(49)

4.3 Penentuan Kadar Piroksikam dalam Sediaan Kapsul

Hasil penetuan kadar piroksikam dalam sediaan kapsul dapat dilihat pada tabel dibawah ini.

Tabel 4.3.Rentang kadar rata-rata piroksikam dalam sediaan kapsul

No Nama Sediaan Kadar rata-rata

Kadar sebenarnya

% 1 Piroxicam (PT.Indofarma) 101.83 101.83 ± 0.45 2 Pirofel® (PT.Sanbe Farma) 101.14 101.14 ± 4.71 3 Infeld ®(PT.Interbat) 100.95 100.95 ± 0.42 4 Omeretik® (PT. Mutifa) 100.59 100.59 ± 1.27 5 Pirocam® (PT.Dexa Medica) 98.65 98.65 ± 0.62 6 Mecodene ®(PT.Mecosin) 80.19 80.19 ± 0.45

Dari data di atas menujukan bahwa kadar Piroxicam (PT.Indofarma), Pirofel® (PT.Sanbe Farma), Infeld ®(PT.Interbat), Pirocam® (PT.Dexa Medica),Omeretik® (PT.Mutifa), dengan nama dagang dan nama generik yang beredar di pasaran memenuhi persyaratan yang tertera dalam Farmakope Indonesia edisi V tahun 2014, yaitu tidak kurang dari 92.50% dan tidak lebih dari 107.50% dari jumlah yang tertera pada etiket sedangkan kapsul Mecodene®(PT.Mecosin) tidak memenuhi syarat, dan telah mengalami penurunan kadar sekitar 20% dan ini disebabkan karena sampel yang ditentukan telah kadaluarsa selama 3 bulan pada saat penetapan kadar piroksikam (contoh perhitungan dapat dilihat pada Lampiran6,Halaman 44).

4.4 Uji Validasi Metode Spektrofotometri Ultraviolet

Uji validasi dilakukan dengan metode penambahan bahan baku (standard addition method) terhadap sampel kapsul pirofel (PT.Sanbe Farma), yang meliputi

(50)

uji akurasi dengan parameter persen perolehan kembali (% recovery), uji presisi dengan parameter RSD (Relative Standard Deviation), batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ).

Uji akurasi dengan parameter persen perolehan kembali dilakukan dengan membuat 3 konsentrasi sampel dengan rentang spesifik 80%, 100%, dan 120% dihitung dari kadar piroksikam yang terdapat pada etiket, dimana masing – masing dengan 3 kali replikasi dan setiap rentang spesifik mengandung 70% sampel dan 30% baku pembanding (contoh perhitungan dapat dilihat pada Lampiran13,Halaman 59).

Tabel 4.4.Data hasil uji validasi piroksikam dengan metode penambahan baku

standar (Standard Addition Method)

Rentang Spesifik %

Konsentrasi (µg/ml)

Perolehan kembali (%)

3.257 101.70

3.255 99.42

2.272 100.58

100

3.935 100.80

4.013 102.65

4.030 101.72

120

4.894 101.72

4.923 99.42

4.942 103.26

Rata-rata (% Recovery) Standard deviation (SD)

Relative Standard Deviation (RSD) (%) Batas Deteksi (LOD) (µg/ml)

Batas Quatitasi (LOQ) (µ g/ml) Koefisien Korelasi (r )

101.26 1.315 1.299 0.669 2.23 0.99982

Dari data diatas diperoleh kadar rata-rata persen recovery, yaitu 101.26% dengan Standard Deviation (SD) sebesar 1.315. Hasil persen peroleh kembali ini

(51)

memenuhi persyaratan uji akurasi dimana rentang rata-rata hasil perolehan kembali yang diizinkan adalah 98.0 − 102.0%. Sedangkan hasil uji presisi dengan parameter Relative Standard Deviation (RSD) diperoleh 1.299%. Hasil Relative Standard Deviation (RSD) ini memenuhi persyaratan presisi, dimana nilai RSD yang diizinkan adalah ≤ 2% (Harmita, 2004). Ini berarti metode Spektrofotometri Ultraviolet memberikan ketepatan dan ketelitian yang baik. Dengan memberikan batas deteksi (LOD) yaitu 0.669 µg/ml dan batas kuantitasi (LOQ) yaitu 2.23 µg/ml (contoh perhitungan dapat dilihat pada Lampiran15,Halaman 65).

(52)

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan

Dari hasil penelitan menunjukan bahwa metode Spektofotometri Ultraviolet dapat digunakan untuk penetapan kadar piroksikam dengan pelarut metanol − HCl 0,1M, dan memenuhi persyaratan uji validasi metode dengan parameter akurasi (% recovery) yaitu 101.26%, presisi yaitu 1.299%, batas deteksi (LOD) sebesar 0.669 µg/ml, batas kuantitasi (LOQ) yaitu 2.23 µg/ml, dan koefisien korelasi (r) yaitu 0.99982.

Hasil penetapan kadar piroksikam dalam sediaan kapsul yang ditentukanternyata 5 sampel memenuhi persyaratan kadar dan 1 sampel tidak memenuhi syarat oleh karena sampel tersebut telah kadaluarsa.

5.2 Saran

Karena mutu obat generik sama dengan mutu obat nama dagang ditinjau dari kadar zat berkhasiatnya, maka disarankan kepada dokter dan petugas medis untuk tidak ragu menggunakan obat generik.

Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk menentukan kadar piroksikam dengan metode lain.

(53)

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Piroksikam

2.1.1 Uraian Umum

Menurut Ditjen. BKAK tahun 2014, uraian umum tentang piroksikam sebagai berikut:

Rumus molekul : C₁₅H₁₃N₃O₄S Berat molekul : 331,35

Rumus bangun :

Nama kimia : 4-hidroksi-2-metil-N-2-piridil-2H-1,2-benzotiazin-3-karboksimida-1,1-dioksidasi (36322-90-4).

Pemerian : serbuk hampir putih atau coklat terang atau kuning terang, tidak berbau. Bentuk monohidrat berwarna kuning.

Kelarutan : sangat sukar larut dalam air, dalam asam-asam encer dan sebagaian besar pelarut organik; sukar larut dalam etanol dan dalam larutan alkali mengandung air.

(54)

Persyaratan : piroksikam mengandung tidak kurang 97,0% dan tidak lebih dari 103,0%.

Penyimpanan : wadah dan penyimpanan dalam wadah tertutup rapat tidak tembus cahaya.

Penandaan : pada etiket harus jugatertera kadaluarsa. Khasiat dan Penggunaan : analgetik anti-inflamasi.

2.1.2 Analgetik Anti-inflamasi Nonsteroid

Obat analgetik serta obat anti-inflamasi nonsteroid (AINS) merupakan salah satu kelompok obat yang banyak diresepkan dan juga digunakan tanpa resep dokter.Obat ini merupakan suatu kelompok obat yang heterogen secara kimiawi.Walaupun demikian obat-obat ini ternyata memiliki banyak persamaan dalam efek terapi maupun efek samping.Prototip obat golongan ini adalah piroksikam dengan struktur baru yaitu oxsikam, derivat asam enolat. Waktu paruh dalam plasma lebih dari 45 jam sehingga dapat diberikan hanya sekali sehari. Absorpsi berlangsung cepat dilambung, terikat 99% pada protein plasma.Obat ini menjalani siklus enterohepatik (Wilmana dan Gan, 2009).

Frekuensi kejadian efek samping dengan piroksikam mencapai 11- 46 %, dan 4-12 % dari jumlah pasien terpaksa menghentikan obat ini.Efek samping yang sering terjadi adalah gangguan saluran cerna, yang menyebabkan tukak lambung.Efek samping lainnya adalah pusing, tinitus, nyeri kepala dan eritema kulit.Piroksikam tidak dianjurkan diberikan pada wanita hamil, pasien tukak lambung dan pasien yang sedang minum antikoagulan.Indikasi piroksikam hanya untuk penyakit inflamasi sendi, misalnya rheumatoidarthritis, osteoarthritis, spondilitis ankilosa.Dosis 10-20 mg sehari diberikan pada pasien yang tidak

(55)

memberikan respons cukup baik dengan obat anti-inflamasi nonsteroid (AINS) yang lebih aman (Wilmana dan Gan, 2009).

2.2Pengertian Obat

Menurut undang-undang, yang dimaksud obat adalah suatu bahan atau campuran bahan untuk digunakan dalam menentukan diagnosis, mencegah, mengurangi, menghilangkan, menyembuhkan penyakit atau gejala penyakit, luka atau kelainan badaniah atau rohaniah pada manusia atau hewan termasuk untuk memperelok tubuh atau bagian tubuh manusia (Syamsuni, 2006).

Menurut Syamsuni tahun 2006, obat-obat yang diperdagangkan juga dapat digolongkan menjadi obat paten, obat generik, dan obat tradisional, yaitu:

a. Obat Paten adalah obat jadi dengan nama dagang yang terdaftar atas nama pembuat yang diberi kuasa dan dijual dalam bungkus asli dari pabrik yang memproduksinya.

b. Obat Generik adalah obat yang dipasarkan dengan nama umum yang ditetapkan oleh organisasi kesehatan dunia (WHO).

c. Obat Tradisional adalah dimaksudkan untuk menyebut obat yang berasal dari bahan alam baik berupa bagian tumbuhan, hewan, maupun mineral yang telah digunakan secara turun temurun berdasarkan pengalaman. Biasanya berupa ramuan jamu dari daun, akar, biji, tumbuhan yang dikeringkan. Obat tradisional juga harus didaftarkan pada Badan POM RI.

(56)

2.3Kapsul

Kapsul adalah sediaan padat yang terdiri dari obat dalam cangkang keras atau lunak yang dapat larut. Cangkang umumnya terbuat dari gelatin, tetapi dapatjuga terbuat dari pati atau bahan lain yang sesuai (Ditjen.BKAK., 2014).

2.3.1 Macam – macam Kapsul

Menurut Syamsuni (2006), ada dua macam kapsul cangkang keras dan kapsul lunak, yaitu:

a. Kapsul cangkang keras (Capsulae durae, hard capsule) terdiri atas bagian wadah dan tutup (capsulae overculateae) yang terbuat dari metilselulosa, gelatin, pati, atau bahan lain yang sesuai. Kapsul dengan tutup diberi warna-warna. Diberi tambahan warna adalah untuk dapat menarik dan dibedakan warnanya. Menurut besarnya, kapsul diberi nomor urut dari besar ke kecil sebagai berikut No. 000; 00; 0; 1; 2; 3. Kapsul harus disimpan dalam wadah gelasyang tertutup kedap,terlindungi dari debu, kelembaban dan temperatur yang ektrim (panas).

b. Kapsul lunak atau (Soft Capsules, capsulae molles), merupakan satu kesatuan berbentuk bulat atau silindris (pearl) atau bulat telur (globula) yang dibuat dari gelatin (kadang disebut gel lunak), kapsul ini biasanya mengandung air 6-13 %, mempunyai bermacam-macam bentuk yang dapat dipakai untuk rute oral, vaginal, rectal dan topical.

2.3.2 Keuntungan dan Kerugiaan Bentuk Sediaan Kapsul

Menurut Syamsuni tahun 2006, kapsul mempunyai keuntungan dan kerugian sebagai berikut:

(57)

a. Keuntungan pemberian bentuk sediaan kapsul: 1. Bentuk menarik dan praktis.

2. Cangkang kapsul tidak berasa sehingga dapat menutupi obat yang berasa dan berbau tidak enak.

3. Mudah ditelan dan cepat hancur atau larut dalam lambung sehingga obat cepat diabsorpsi.

4. Dokter dapat mengkombinasikan beberapa macam obat dan dosis yang berbeda-beda sesuai dengan kebutuhan pasien.

5. Kapsul dapat diisi dengan cepat karena tidak memerlukan bahan zat tambahan atau penolong seperti pada pembuatan pil maupun tablet. b. Kerugian pemberian bentuk sediaan kapsul:

1. Tidak dapat untuk zat-zat yang mudah menguap, karena pori-pori kapsul tidak dapat menahan penguapan.

2. Tidak dapat untuk zat-zat yang higroskopis (menyerap lembab).

3. Tidak dapat untuk zat-zat yang dapat bereaksi dengan cangkang kapsul.

4. Tidak dapat diberikan untuk balita. 5. Tidak dapat dibagi-bagi.

2.4 Spektrofotometri Ultraviolet

2.4.1 Teori Spektrofotometri Ultraviolet

Spektroskopi serapan elektron (spektrofotometri) mungkin merupakan metode analisis yang paling luas dalam laboratorium klinik dan tepat dibawah

(58)

pengukuran pH dari metode instrumental yang digunakan dalam analisis kimia (Munson, 1984).

Piroksikam mengandung inti benzen dan mengandung gugus kromofor.Selain itu juga memiliki gugus –OH yang merupakan gugus ausokrom sehingga dapat dianalisis dengan metode spektrofotometri ultraviolet.Syarat suatu zat bisa dianalisis menggunakan spektrofotometer yaitu zat tersebut memiliki gugus kromofor dan ausokrom (Fernanda, 2011).

Gugus kromofor adalah gugus yang menghasilkan warna atau gugus yang mengabsorbsi energi dan perpindahan elektron n → π*, π → π*, σ → σ*, dan n → σ*.Gugus ausokrom adalah gugus fungsi yang tidak mengabsorbsi gelombang ultraviolet sebagaimana gugus kromofor, namun karena adanya ikatan gugus ausokrom pada gugus kromofor pada suatu senyawa dapat meningkatkan intensitas senyawa tersebut (Gandjar dan Rohman, 2012).

Spektrofotometri ultraviolet adalah penentuan panjang gelombang dan intensitas sinar ultraviolet yang diabsorbsi oleh sampel.Sinar ultraviolet memiliki energi yang cukup untuk mempromosikan elektron pada kulit terluar ke tingkat energi yang lebih tinggi (Rohman, 2007).

Sinar UV berada pada panjang gelombang 200-400 nm.Spektroskopi UV biasanya digunakan untuk molekuldan ion anorganik atau kompleks didalam larutan.Spektrum UV mempunyai bentuk yang lebar dan hanya sedikit informasi tentang struktur yang biasa didapatkan dari spektrum ini.Tetapi spektrum tersebut berguna untuk pengukuran secara kuantitatif. Konsentrasi analit didalam larutan biasa ditentukan dengan mengukur absorbansi pada panjang gelombang tertentu dengan menggunakan Hukum Lambert-Beer (Rohman, 2007).

(59)

Gugus fungsi yang menyerap radiasi didaerah ultraviolet dekat disebut gugus kromofor dan hampir semua gugus ini mempunyai ikatan tak jenuh. Pada kromofor jenis ini transisi elektron terjadi dari π →π*, yang menyerap radiasi pada panjang gelombang maksimum kurang dari 200nm, misalnya pada >C=C< dan −C≡C−, kromofor ini merupakan tipe transisi dari sistem yang mengandung elektron π pada orbital molekulnya.Untuk senyawa yang mempunyai sistem konyugasi, perbedaan energi antara keadaan dasar dan keadaan tereksitasi menjadi lebih kecil sehingga penyerapan terjadi pada panjang gelombang yang lebih besar (Rohman, 2007).

Gugus fungsi, seperti –OH, −O, −NH ₂, −Cl, dan −OCH ₃ yang mempunyai elektron-elektron valensi bukan ikatan (memberikan transisi n → π*) disebut gugus ausokrom yang tidak dapat menyerap radiasi ultraviolet, tetapi apabila gugus ini terikat pada gugus kromofor mengakibatkan pergeseran panjang gelombang kearah yang lebih besar (pergeseran batokromik) dengan intensitasyang lebih kuat.Efek hipsokromik adalah suatu pergeseran pita serapan ke panjang gelombang lebih pendek, yang sering kali terjadi bila muatan positif dimasukkan kedalam molekul dan bila pelarut berubah dari non polar kepelarut polar (Rohman, 2007).

Ada tiga macam proses penyerapan energi ultraviolet dan sinar tampak yaitu:

1. Penyerapan oleh transisi elektron ikatan dan elektron anti ikatan (elektron sigma (σ), elektron phi (π), dan elektron yang tidak berikatan atau non bonding electron (n).

(60)

Transisi-transisi elektronik yang terjadi diantara tingkat-tingkat energi didalam suatu molekul ada 4, yaitu transisi sigma-sigma star (σ →σ*), transisi non bonding electron (n → σ*), Transisi (n → π*) dan Transisi (π → π*)

2. Penyerapan oleh transisi yang melibatkan electron d dan f dari molekul kompleks

3. Penyerapan karena perpindahan muatan

2.4.2 Hukum Lambert-Beer

Menurut hukum lambert, serapan berbanding lurus terhadap ketebalan sel yang disinari. Menurut Hukum Beer, yang hanya berlaku untuk cahaya monokromatik dan larutan yang sangat encer, serapan berbanding lurus dengan konsentrasi (banyak molekul zat). Kedua pernyataan ini dapat dijadikan satu Hukum Lambert Beer sehingga diperoleh bahwa serapan berbanding lurus terhadap konsentrasi dan ketebalan sel, yang dapat dituliskan dalam persamaan (Munson, 1984; Rohman, 2007):

A = a.b.c (g/liter) atau A = ε.b.c (mol/liter) Dimana: A = serapan

a = absorptivitas b = ketebalan sel c = konsentrasi

ε = absorptivitas molar

Hukum Lambert-Beer menjadi dasar aspek kuantitatif spektrofotometri dimana konsentrasi dapat dihitung berdasarkan rumus di atas.

Absorptivitas (a) merupakan konstanta yang tidak tergantung pada konsentrasi, tebal kuvet dan intensitas radiasi yang mengenai larutan sampel.Absorptivitas

(61)

tergantung pada suhu, pelarut, struktur molekul, dan panjang gelombang radiasi(Rohman, 2007; Munson, 1984).

Menurut Sudjadi dan Rohman tahun 2012, absorptivitas spesifik juga sering digunaknan untuk mengganti absorptivitas. Absorptivitas spesifik adalah serapan yang dihasilkan oleh larutan 1% (b/v) dengan ketebalan sel 1 cm, sehingga dapat diperoleh persamaan:

A = A1₁.b.c

Dimana: A1₁ = absorptivitas spesifik b = ketebalan sel

c = konsentrasi senyawa terlarut (g/100 ml larutan)

2.4.3 Penggunaan Spektrofotometri Ultraviolet

Spektrum UV dapat digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif. a. Aspek kualitatif

Pengguna terbatas pada konfirmasi identitas dengan menggunakan parameter panjang gelombang puncak absorptivitas molar atau nilai ekstingsi yang khas untuk suatu senyawa yang dilarutkan dalam suatu pelarut pada pH tertentu (Satiadarma, dkk., 2004).

b. Aspek kuantitatif

Dalam aspek kuantitatif, suatu berkas radiasi dikenakan pada cuplikan (larutan sampel) dan intensitas sinar radiasi yang diteruskan diukur besarnya.Radiasi yang diserap oleh cuplikan ditentukan dengan membandingkan intensitas sinar yang diteruskan dengan intensitas sinar yang diserap jika tidak ada spesies penyerapan lainnya.Intensitas atau kekuatan radiasi cahaya sebanding dengan jumlah foton yang melalui satuan luas penampang perdetik. Serapan dapat

(62)

terjadi jika foton/radiasi yang mengenai cuplikan memiliki energi yang sama dengan energi yang dibutuhkan untuk menyebabkan terjadinya perubahan tenaga(Rohman, 2007; Satiadarma, dkk., 2004).

Penetapan kadar dilakukan dengan mengukur absorban pada panjang gelombang maksimum, agar dapat memberikan absorban tertinggi untuk setiap konsentrasi. Bila suatu senyawa mempunyai lebih dari satu puncak, lebih diutamakan panjang gelombang maksimum yang absorptivitasnya terbesar dan memberikan kurva kalibrasi linier dalam rentang konsentrasi yang relatif lebar dan meningkat, yang ditentukan dengan persamaan regresi dan merupakan hubungan antara konsentrasi dangan serapan, dan dapat dinyatakan sebagai berikut (Sudjadi dan Rohman, 2012):

Y = aX + bb Dimana : Y = absorbansi

X = konsentrasi

a = koefisien regresi ( juga menyatakan slope / kemiringan) b = tetapan regresi dan juga disebut dengan intersep

koefisien regresi (a) dapat diperoleh dengan metode kuadrat terkecil ( last square method).

a =

(

)(

)}

{

(

)

∑

− − −

i N

X Xi

Y Yi X Xi

Selanjutnya b dihitung dari hubungan b = Y- aX

Sebelum dilakukan perhitungan analisis lebih lanjut berdasarkan persamaan regresi linier yang didapat, terlebih dahulu harus ditentukan apakah ada koreksi yang bermakna antara kedua besaran yang diukur. Untuk itu perlu

(63)

dihitung besarnya koefisien korelasi (r) berdasarkan rumus berikut (Sudjadi dan Rohman, 2012): r =

(

)(

)}

{

(

)

(

)

      ₋       ₋ − −

∑

N i N i N i Y Yi X Xi Y Yi X Xi 2 2

2.4.4 Peralatan Untuk Spektrofotometri

Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmitans atau serapan suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Alat ini terdiri dari spektrometer yang menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer sebagai alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang diabsorpsi ( Day dan Underwood, 1998).

Gambar 2.1.Diagram komponen perangkat dasar spektrofotometri ultraviolet.

Menurut Day dan Underwood (1998) dan Watson (2005), unsur-unsur terpenting suatu spektrometer adalah sebagai berikut :

(64)

b. Monokromator : digunakan untuk menghamburkan cahaya kedalam panjang gelombang unsur-unsurnya, yang diseleksi lebih lanjut dengan celah. Monokromator berotasi sehingga rentang panjang gelombang yang dilewati melalui sampel ketika instrument tersebut mendeteksi sepanjang spektrum.

c. Kuvet (sel) : digunakan sebagai wadah sampel yang akan dianalisis. Untuk pengukuran pada daerah ultraviolet harus menggunakan sel kuarsa karena gelas tidak tembus cahaya pada daerah ini. Kuvet umumnya mempunyai ketebalan 1cm.

d. Detektor : berperan untuk memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang gelombang. Detektor akan mengubah cahaya menjadi sinyal listrik yang selanjutnya akan ditampilkan oleh penampil data dalam bentuk angka digital. e. Recorder : digunakan sebagai perekam absorbansi yang dihasilkan dari

pengukuran.

2.5Validasi Prosedur Analisis

Validasi adalah suatu tindakan terhadap parameter tertentu pada prosedur penetapan yang dipakai untuk membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya. Validasi dilakukan untuk manjamin bahwa metode analisis yang dilakukan akurat, spesifik, reproduksibel, dan tahan pada kisaran analit yang akan dianalisis ( Ermer dan McB. Miller, 2005; Satiadarma, dkk., 2004).

(65)

2.5.1 Prosedur Analisis

Menurut Watson (2005), prosedur analisis memberikan deskripsib yang tepat bagaimana suatu analisis dilakukan. Tahap-tahap penting untuk melakukan tiap uji analisis harus dijelaskan secara terperinci. Metode lengkap harus menjelaskan:

1. Mutu dan sumber baku pembanding untuk senyawa yang dianalisis 2. Prosedur yang digunakan untuk menyiapkan larutan baku pembanding 3. Mutu semua pereaksi atau pelarut yang digunakan dalam penetapan kadar

dan metode pembuatannya

4. Prosedur dan keadaan yang digunakan untuk pengoperasian semua perlengkapan yang diperlukan dalam penetapan kadar tersebut, dan

5. Metodologi yang digunakan untuk kalibrasi penetapan kadar dan metodologi yang digunakan untuk pemrosesan sampel tersebut sebelum analisis.

Metode analisis yang digunakan pada uji validasi yaitu: a. Kecermatan (accuracy)

Kecermatan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil analisis dengan kadar analit sebenarnya. Kecermatan dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (% recovery) analit yang ditambahkan dan dapat ditentukan melalui dua cara, yaitumetode simulasi (spiked placebo recovery) dan metode panambahan bahan baku (standard addition method) (Harmita, 2004).

Dalam metode simulasi, sejumlah analit bahan murni (senyawa pembanding) ditambahkan kedalam campuran bahan pembawa sediaan farmasi lalu campuran tersebut dianalisis dan hasilnya dibandingkan dengan kadar analit

(66)

yang ditambahkan (kadar yang sebenarnya). Dalam metode penambahan baku sampel dianalisis lalu sejumlah tertentu analit yang diperiksa ditambahkan kedalam sampel dicampur dan dianalisis lagi. Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya (Harmita, 2004).

Dalam metode penambahan baku sampel dianalisis lalu sejumlah tertentu analit diperiksa ditambahkan ke dalam sampeldicampur dan dianalisis lagi. selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya (hasil yang diharapkan). Dalam kedua metode tersebut persen perolehan kembali ditentukan sebagai rasio antara hasil yang diperoleh dengan hasil sebenarnya.Perolehan kembali dapat ditentukan dengan cara membuat sampel placebo (eksepien obat, cairan biologis) kemudian ditambah analit dengan konsentrasi tertentu (biasanya 80% sampai 120% dari kadar analit yang diperkirakan), kemudian dianalisis dengan metode yang akan divalidasi (Harmita, 2004).

Hal yang penting untuk diperhatikan adalah metode kuantitasi yang digunakan dalam penentuan akurasi harus sama dengan metode kuantitasi yang digunakan untuk menganalisis sampel dalam penelitian (Harmita, 2004).

% Perolehan Kembali = 100%

* x

C C C

A A F −

Keterangan : C_F = konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan baku

C = konsentrasi sampel sebelum penambahan baku C*_A = konsentrasi baku yang ditambahkan

b. Presisi

Presisi dari suatu metode analisis adalah derajat kesesuaian diantara masing masing hasil uji, jika prosedur analisis diterapkan berulang kali pada

(67)

sejumlah cuplikan yang diambil dari sampel homogen. Presisi juga diartikan sebagai ukuran keterulangan metode analisis dan biasanya diekspresikan sebagai standar deviasi relatif (RSD) (Satiadarma., dkk., 2004).

Menurut Watson (2005), Sesuai dengan International Conference on Harmonization (ICH), presisi harus dilakukan pada 3 tingkatan yang berbeda yaitu:

a. Keterulangan yaitu ketepatan pada kondisi percobaan yang sama (berulang) baik orangnya, peralatannya, tempatnya, maupun waktunya. b. Presisi antara yaitu ketepatan pada kondisi percobaan yang berbeda, baik

orangnya, peralatannya, tempatnya maupun waktunya.

c. Ketertiruan merujuk pada hasil-hasil dari laboratorium yang lain.

Pengujian pada presisi biasanya dilakukan replikasi sebanyak 6-15 pada sampel tunggal untuk tiap-tiap konsentrasi. Nilai RSD antara 1-2% biasanya dipersyaratkan untuk senyawa-senyawa aktif dalam jumlah yang banyak, sedangkan untuk senyawa-senyawa dengan kadar sekelumit, RSD berkisar antara 5-15% (Rohman, 2007).

c. Kespesifikan

Kespesifikan dari suatu metode analisis adalah suatu ukuran seberapa mampu metode tersebut mengukur analit saja dengan adanya senyawa-senyawa lain yang terkandung didalam sampel (Watson, 2005).

d. Batas Deteksi

Menurut Harmita (2004), batas deteksi (limit of detection) didefinisikan sebagai konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih dapat terdeteksi. Batas deteksi dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

(68)

Batas deteksi =

slope X xSY /

e. Batas kuanitasi

Menurut Harmita (2004), batas kuanitasi (limit of quantitation) didefenisikan sebagai konsentrasi analit terendah dalam sampel yang dapat ditentukan dengan presisi dan akurasi yang dapat diterima pada kondisi operasional metode yang digunakan.

Batas kuantitasi =

Slope X xSY /

f. Linieritas

Linieritas suatu metode merupakan ukuran seberapa baik kurva kalibrasi yang menghubungkan antara respon (y) dengan konsentrasi (x).metode ini dapat diukur dengan melakukan pengukuran tunggal pada konsentrasi yang berbeda-beda. Data yang diperoleh selanjutnya diproses dengan metode kuadrat kecil, untuk selanjutnya dapat ditentukan nilai kemiringan (slope), intersep, dan koefisien korelasinya (Harmita, 2004).

Penentuan linieritas suatu prosedur analisis dilakukan dengan perlakuan matematika dari hasil uji yang diperoleh pada analisis sampel yang mengandung analit dalam rentang konsentrasi yang dituntut oleh prosedur. Perlakuan tersebut pada umumnya adalah perhitungan garis regresi (Satiadarma., dkk., 2004).

g. Rentang

Rentang suatu metode analisis adalah interval antara batas konsentrasi tertinggi dan terendah analit yang terbukti dapat ditentukan menggunakan prosedur analisis, dengan presisi, akurasi kelinieran yang memadai. Rentang biasanya dinyatakan dalam satuan yang sama dengan hasil uji (persen, bagian

(69)

persejuta). Untuk pengujian komponen utama, maka konsentarasi baku harus diukur didekat atau sama dengan konsentrasi kandungan analit yang diharapkan. Suatu strategi yang baik adalah mengukur baku dengan kisaran 25%, 50%, 75%, 100%, 125%, dan 150%dari konsentrasi analit yang diharapkan (Satiadarma., dkk., 2004; Rohman, 2007).

h. Ketahanan

Ketahanan merupakan kapasitas metode untuk tetap tidak terpengaruh oleh adanya variasi parameter metode yang kecil. Ketahanan dievaluasi dengan melakukan variasi parameter-parameter metode seperti: persentase pelarut organik, pH, kekuatan ionik, suhu dan sebagainya (Rohman, 2007).

i. Kesalahan acak majemuk

Kesalahan sistematik dalam analisis biasanya dapat dieliminasi, tetapi kesalahan acak nyata disebabkan oleh pelaksanaan dalam suatu pengujian yang belum sepenuhnya dikendalikan.Jenis kesalahan acak umumnya berasal dari penerimaan toleransi pabrik terhadap alat-alat gelas (Watson, 2005).

j. Pelaporan hasil

Dalam menghitung jawaban dari data yang diperoleh dalam suatu analisis, penting untuk tidak menunjukkan presisi tingkat tinggi daripada yang sebenarnya mungkin dalam penetapan kadar tersebut. Akurasi alat gelas yang digunakan dengan anggapan bahwa hal tersebutsesuai dengan standar BS untuk kualitas A, jelas ada beberapa ketidakpstian dalam semua angka yang < 1%. Lima angka dapat tetap digunakan dan dibulatkan menjadi empat angka pada akhir perhitungan. SBR tidak boleh dilaporkan sampai dibawah 0,1% (Watson, 2005).

(70)

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang

Piroksikam merupakan salah satu obat anti-inflamasi non-steroid (AINS) yang banyak digunakan untuk pengobatan rheumatik, sebagian besar penyakitrheumatik membutuhkan pengobatan simtomatik untuk meredakan nyeri (Madhukar, dkk., 2011). Piroksikam sangat sukar larut dalam air, dalam asam-asam encer dan sebagian besar pelarut organik, sukar larut dalam etanol dan dalam larutan alkali mengandung air.Efek samping yang sering terjadi adalah gangguan saluran cerna, salah satunya adalah tukak lambung (Wilmana dan Gan, 2009).

Dalam bidang farmasi, pemeriksaan mutu obat diperlukan agar obat dapat sampai pada titik tangkapnya dan memberikan efek terapi yang dikehendaki dengan kadar yang tepat. Salah satu parameter dari uji mutu tersebut adalah kadar zat berkhasiat dari suatu sediaan obat harus memenuhi persyaratan Farmakope Indonesia edisi ke V atau ditentukan buku standar lainnya.

Obat dengan nama generik merupakan obat yang harganya murah dibandingkan obat merek dagang. Masyarakat menganggap obat generik yang harganya murah tidak memiliki mutu sebaik obat merek dagang yang harganya jauh lebih mahal (Puspitasari, 2006).

Setiap produk farmasi yang akan dirilis harus teruji secara ilmiah untuk menjamin khasiat, toksisitas, dan kualitasnya. Agar dapat diperoleh hasil yang relatif sama pada tiap tahapan maka masing-masing tahapan harus diuji secara terpisah dalam validasi metode untuk menjamin kualitas dan realibilitas suatu

(71)

hasil analisis. Pengembangan metode tidak dapat dipisahkan dari validasi metode analisis, karena metode analisis hasil pengembangan baru dapat dikatakan baik, kalau dapat dibuktikan secara ilmiah sesuai dengan tujuan pengembangan metode tersebut.Pembuktian kesesuaian secara ilmiah itu disebut sebagai validasi (Fernanda, 2011).

Menurut Farmakope Indonesia edisi V tahun 2014, penetapan kadar piroksikam dilakukan secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi(KCKT).Metode ini membutuhkan biaya operasional yang mahal dan waktu analisis yang relative lama.Menurut Dibbern, dkk., (2002), piroksikam dapat diidentifikasi antara lain dalam pelarut metanol pada panjang gelombang 325 nm (A1₁ = 556 b), dalam

pelarut larutan asam klorida 0.1 M pada panjang gelombang 334 nm (A1₁ = 813 b).Dari struktur molekul piroksikam mempunyai gugus kromofor dan ausokrom, sehingga kemungkinan piroksikam dalam sediaan kapsul dapat ditentukan kadarnya secara spektrofotometri ultraviolet.

Berdasarkan Uraian diatas, maka penulis tertarik untuk melakukan penetapan kadar piroksikam kapsulmenggunakan spektrofotometri ultraviolet dengan pelarut metanol–HCl 0.1 M. Metode ini divalidasi, selanjutnya metode yang divalidasi ini digunakan untuk menentukan kadar kapsul piroksikam generik dan dagang yang beredar dipasaran.

(72)

1.2 Perumusan Masalah

Berdasarkan uraian diatas, maka perumusan masalah pada penelitian ini adalah:

a. Apakah metode Spektrofotometri Ultraviolet pada penetapan kadar piroksikam dengan pelarut metanol−HCl 0.1 M dalam sediaan kapsul memenuhi uji validasi metode?

b. Apakahkadarpiroksikam dalam sediaan kapsul dengan nama dagang dan generik yang beredar di pasaranmemenuhi persyaratan kadar yang ditetapkan Farmakope Indonesia Edisi V tahun 2014?

1.3Hipotesis

Berdasarkan uraian diatas, maka hipotesa pada penelitian ini adalah: a. Metode Spektrofotometri Ultraviolet pada penetapan kadar piroksikam dengan

pelarut metanol−HCl 0.1 M dalam sediaan kapsul memenuhi persyaratan uji validasi metode.

b. Kadar piroksikam dalam sediaan kapsul dengan nama dagang dan generik yang beredar dipasaran memenuhi persyaratan kadar yang ditetapkan Farmakope Indonesia Edisi V tahun 2014.

1.4Tujuan Penelitian

Berdasarkan uraian diatas, tujuan penelitian ini adalah:

a. Mengetahui validasi metode Spektrofotometri Ultraviolet pada penetapan kadar piroksikam dalam sediaan kapsul memenuhi syarat uji validasi dengan

(73)

parameter uji ketepatan (akurasi), ketelitian (presisi) batas deteksi (Limit of Detection), dan batas kuantitasi (Limit of Quantitation)

b. Mengetahui kesesuaian kadarkapsulpiroksikam dengan nama dagang dan generik yang beredar dipasaran dengan persyaratan kadar yang ditetapkan dalamFarmakope IndonesiaEdisi V tahun 2014.

1.5Manfaat Penelitian

Pengembangan ilmu, bahwa metode spektrofotometri UV menggunakan pelarut metanol−HCl 0.1 M dapat digunakan pada penetapan kadar piroksikam dalam sediaan kapsul. Hasil penelitian diharapkan menjadi informasi bagi instansi terkait dan tenaga kesehatan.

(74)

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL

DENGANNAMAGENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA

SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

Abstrak

Piroksikam merupakan salah satu obat anti inflamasi non−steroid ( AINS) yang banyak digunakan untuk pengobatan rheumatoid arthritis, osteoarthritis dan spondilitis ankilosa. Menurut Farmakope Indonesia Edisi V (2014), penetapan kadar piroksikam kapsul dilakukan secara KCKT. Metode ini membutuhkan biaya operasional yang mahal dan waktu analisis yang relatif lama.Tujuan dari penelitian ini adalah mencari metode alternatif yang lebih sederhana dan murah, selanjutnya metode ini divalidasi serta mengaplikasikannya pada penetapan kadar piroksikam dalam sediaan kapsul.

Metode yang digunakan pada penelitian ini yaitu secara Spektrofotometri Ultraviolet menggunakan pelarut metanol−HCl 0,1M pada panjang gelombang 335 nm. Sampel yang ditentukan terdiridari 5 sediaan kapsul nama dagang dan 1 nama generik. Parameter validasi yang ditentukan yaitu akurasi, presisi, LOD dan LOQ.

Hasil uji validasi metode diperoleh persen perolehan kembali (% recovery) sebesar 101,26%, presisi sebesar 1,299%. Ini menunjukkan bahwa metode memberikan ketepatan dan ketelitian yang memenuhi syarat dengan batas deteksi (LOD) sebesar 0,669 µg/ml dan batas kuantitasi (LOQ) sebesar 2,23 µg/ml. Hasil penentuan kadar diperoleh 5 sampel yang memenuhi syarat yaitu kapsul dengan nama dagang Pirofel® (PT. Sanbe Farma) 101,14% ± 4,71%, Infeld® (PT. Interbat) 100,83% ± 0,422%, Pirocam® (PT. Dexa Medica) 98,65% ± 0,619%, Omeretik® (PT. Mutifa) 100,59% ± 1,27%, dan kapsul generik Piroxicam (PT. Indofarma) 101,83% ± 0,453%. Dan 1 kapsul yang tidak memenuhi persyaratan yaitu kapsul Mecodene® (PT. Mecosine Indonesia) dengan kadar 80,195% ± 0,4529%.

Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa penetapan kadar piroksikam dalam sediaan kapsul yang ditentukan ternyata 5 sampel memenuhi persyaratan kadar dan 1 sampel tidak memenuhi syarat oleh karena sampel tersebut telah kadaluarsa.

(75)

VALIDATION METHOD OF DETERMINING

CONTRACTION OF PIROXICAM IN ACAPSULE WITH A

GENERIC NAME AND TRADE NAME USING

ULTRAVIOLET SPEKTROPHOTOMETRY

Abstract

Piroxicam is one of non-steroidal anti−inflamatory (NSAID) drug that is widely used for the treatment of rheumatoid arthritis, osteoarthritis and spondilitis ankilosa. According to the Indonesian Pharmacopoeia Edition V (2014), assay is performed by HPLC. This method requires a high operational costs and relatively long analysis times. The purpose of this study is to findan alternative method that is simpler and cheaper, thenthe method is validated and applies this to the assay of piroxicam the capsule.

The method used in this research is by ultraviolet spectrophotometry using methanol−HCl 0.1M as a solved on 335 nm wavelength. Samples were determined consists of 5 capsule and one trade name generic name. Is validation parameters specified accuracy, precision, LOD and LOQ.

Results of validation method on obtained percent recovery (% recovery) of 101.26%, a precision of 1.299%.This shows that the method gives the accuracy and precision are eligible to the limit of detection (LOD) of 0.669 µ g/ml and the limit of quantitation (LOQ) of 2.23 µg/ml. Obtained assay results of 5 samples qualify namely capsule sunder the trade name Pirofel®(PT. Sanbe Farma) 101.14% ± 4.71%, Infeld® (PT. Interbat) 100.83% ± 0.422%, Pirocam® (PT. Dexa Medica) 98.65% ± 0.619%, Omeretik® (PT. Mutifa) 100.59% ± 1.27%, and the capsule generic piroxicam (PT. Indofarma) 101.83% ± 0.453%. And 1 capsule which does not meet the requirements that the capsule Mecodene® (PT. Mecosine Indonesia) with the 80.195% level of ± 0.4529%.

Based of the research it can be concluded the assay of piroxicam in a capsule dosage prescribed 5 sample was the requirements of content and 1sample was not eligible because the sampel has expired.

(76)

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL

DENGANNAMAGENERIK DAN NAMA DAGANG

SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

SKRIPSI

OLEH:

ASTRIED FARADITA NIM 111524102

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

(77)

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL

DENGANNAMAGENERIK DAN NAMA DAGANG

SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

SKRIPSI

Diajukan untuk Melengkapi Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara OLEH:

ASTRIED FARADITA NIM 111524102

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

(78)

PENGESAHAN SKRIPSI

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA

GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA

SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

OLEH:

ASTRIED FARADITA NIM 111524102

Dipertahankan dihadapanPanitiaPenguji FakultasFarmasi Universitas Sumatera Utara

Padatanggal: 29 Januari 2016 DisetujuiOleh:

Pembimbing I, Panitia Penguji:

Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt. Prof. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt. NIP 195306191983031001 NIP 195006221980021001

Medan, April 2016 Disahkan Oleh:

Pejabat Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001 Dosen Pembimbing II,

Drs. FathurRahmanHarun, M.Si., Apt. NIP 195201041980031002

Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt. NIP 195306191983031001

Dra.Sudarmi, M.Si., Apt. NIP 195409101983032001

Dra.TutyRoidaPerdede, M.Si., Apt. NIP 195401101980032001

(79)

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadiran ALLAH SWT yang senantiasa melimpahkan nikmat, rahmat, karunia dan ridhoNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Validasi Metode Pada Penetapan Kadar Piroksikam Dalam Sediaan Kapsul Dengan Nama Generic Dan Nama Dagang Secara Spektrofotometri Ultraviolet". Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada: Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Pejabat Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan. Bapak Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt., dan Bapak Drs. Fatur Rahman Harun, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Bapak Prof. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt., Ibu Dra. Sudarmi., M.Si., Apt., dan Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan kritikan kepada penulis.

Penulis juga tidak lupa mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus kepada kedua orang tua tercinta Ayahanda Edi Sucipto dan Ibunda Fitri Manja Sari, Alm. H. Ryan Suganda yang telah menjadi abg terbaik juga sebagai penyemangat, buat adik-adik tersayang Saras Dewinta, S.T.PP., dan Nazwa Artika yang telah memberikan doa, semangat dan motivasi baik moril maupun materil selama masa perkuliahan hingga selesainya penyusunan skripsi ini.

(80)

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih banyak kekurangan, oleh karena itu sangat diharapkan kritikan dan saran yang dapat menyempurnakan skripsi ini.Semoga skripsi ini bermanfaat bagi kita semua.

Medan 25 januari 2016 Penulis

Astride Faradita Nim 111524102

(81)

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL

DENGANNAMAGENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA

SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

Abstrak

(82)

VALIDATION METHOD OF DETERMINING

CONTRACTION OF PIROXICAM IN ACAPSULE WITH A

GENERIC NAME AND TRADE NAME USING

ULTRAVIOLET SPEKTROPHOTOMETRY

Abstract

Based of the research it can be concluded the assay of piroxicam in a capsule dosage prescribed 5 sample was the requirements of content and 1sample was not eligible because the sampel has expired.

(83)

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

LEMBAR PENGESAHAN ... ii

ABSTRAK ... iii

ABSTRACT ... iv

DAFTAR ISI ... v

DAFTAR TABEL ... viii

DAFTAR GAMBAR ... ix

DAFTAR LAMPIRAN ... x

BAB I PENDAHULUAN ... 1

1.1.LatarBelakang ... 1

1.2.PerumusanMasalah ... 2

1.3.HipotesisPenelitian ... 3

1.4.TujuanPenelitian ... 3

1.5.ManfaatPenelitian ... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5

2.1Piroxicam ... 5

2.1.1. Uraian Umum ... 5

2.1.2. Analgesik Anti-Inflamasi Nonsteroid ... 6

2.2. Pengertian Obat ... 7

2.3. Kapsul ... 8

2.3.1. Macam-macam Kapsul ... 8

2.3.2. Keuntungan dan Kerugian Bentuk Sediaan kapsul ... 8

2.4. Spektrofotometri Ultraviolet ... 9

(1)

2.4.2. Hukum Lambert-Beer ... 12

2.4.3. Penggunaan Spektrofotometri Ultraviolet ... 13

2.4.4. Peralatan Untuk Spektrofotometri ... 15

2.5. Validasi ... 16

BAB III METODE PENELITIAN ... 22

3.1Alat– alat ... 22

3.2Bahan − bahan ... 22

3.3PengambilanSampel ... 22

3.4Prosedur Penelitian... 23

3.4.1 Pembuatan Pereaksi ... 23

3.4.1.1 Pembuatan Metanol – HCl 0,1M ... 23

3.4.2 Pembuatan Kurva Serapan dan Kurva Kalibrasi Larutan Piroksikam dalam Metanol – HCl 0.1M ... 23

3.4.2.1 Pembuatan Larutan Induk I Piroksikam (Sigma – Aldrich) ... 23

3.4.2.2 Pembuatan Larutan Induk II Piroksikam (Sigma− Aldrich) ... 23

3.4.2.3 Pembuatan Blanko dan Baseline ... 24

3.4.2.4 Pembuatan Kurva Serapan Baku Piroksikam (Sigma− Aldrich) ... 24

3.4.2.5 Penentuan dan Pembuatan Linieritas Kurva Kalibrasi Piroksikam dalam Metanol − HCl0.1M ... 24

3.4.2.6 Penentuan Kadar Piroksikam dalam Sediaan Kapsul ... 24

3.5 Uji Validasi dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 25

3.5.1 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali (%recovery) 25

3.5.2 Uji Presisi ... 26

3.5.3 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) ... 26

3.5.4 Analisis Data Statistik ... 27

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 29

(2)

4.2 Penentuan Lineritas Kurva Kalibrasi Piroksikam ... 31

4.3 Penentuan Kadar Piroksikam dalam Sediaan Kapsul ... 32

4.4 Uji Validasi Metode Spektrofotometer Ultraviolet ... 32

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 35

5.1 Kesimpulan ... 35

5.2 Saran ... 35

DAFTAR PUSTAKA ... 36

(3)

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1. Data absorbansi dari kurva serapan... 30 4.2. Data kurva kalibrasi dari baku piroksikam (Sigma − Aldrich) ... 31 4.3. Rentang kadar rata − rata piroksikam dalam sediaan kapsul ... 32 4.4. Data hasil uji validasi piroksikam dengan metode penambahan

(4)

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1. Diagram komponen Perangkat Dasar Spektrofotometri Ultraviolet ... 15 4.1. Kurva serapan baku piroksikam (Sigma − Aldrich) dalam

pelarut Metanol − HCl 0.1M (konsentrasi 4.0µg/ml) ... 30 4.2. Kurva kalibrasi baku piroksikam (Sigma − Aldrich) dalam

(5)

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Contoh Perhitungan Pengambilan Sampel ... 38 2. Daftar Spesifik Sampel ... 39 3. Perhitungan Konsentrasi Pengukuran ... 41 4. Perhitungan Persamaan Regresi Piroksikam (Sigma − Aldrich) . 42 5 Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel Kapsul Pirofel®(PT.

Sanbe Farma) ... 43 6 Data Piroksikam dalam Sediaan Kapsul ... 45 7 Perhitungan Statistik Kadar Piroksikam Pada Kapsul

Piroxicam Generik (PT. Indofarma) ... 47

8 Perhitungan Statistik Kadar Piroksikam Pada Kapsul

Pirofel®(PT. Sanbe Farma) ... 49 9 Perhitungan Statistik Kadar Piroksikam Pada Kapsul Infeld®

(PT. Interbat) ... 51 10 Perhitungan Statistik Kadar Piroksikam Pada Kapsul Pirocam®

(PT. Dexa Medica) ... 54 11 Perhitungan Statistik Kadar Piroksikam Pada Kapsul Omeretik®

(PT. Mutifa) ... 56 12 Perhitungan Statistik Kadar Piroksikam Pada Kapsul

Mecodene® (PT. Mecosin Indonesia) ... 58 13ContohPerhitunganPerolehanKembali (% recovery) ... 60 14 Data Hasil Persen Perolehan Kembali Pada Kapsul Pirofel®

(PT. Sanbe Farma) dengan Metode Penambahan Baku (Standard Addiation Method) ... 65 15 Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) .. 66 16Data Uji Perolehan kembali (% recovery) ... 67 17 Nilai Distribusi t ... 68 18 Sertifikat Bahan Baku Piroksikam (Sigma − Aldrich) ... 70

19 Alat Spektrofotometri Ultraviolet (UV−1800 Shimadzu UV

(6)

Validasi Metode pada Penetapan Kadar Piroksikam dalam Sediaan Kapsul dengan Nama Generic dan Nama Dagang Secara Spektrofotometri Ultraviolet

N

+

1

N

+

1

∑

1

)

(

−

−

=

∑

n

X

X

SD

µ

(

)(

)}

{

(

)

∑

∑

(

)(

)}

{

(

)

(

)

∑

∑

∑

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL

DENGANNAMAGENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA

SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

VALIDATION METHOD OF DETERMINING

CONTRACTION OF PIROXICAM IN ACAPSULE WITH A

GENERIC NAME AND TRADE NAME USING

ULTRAVIOLET SPEKTROPHOTOMETRY

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL

DENGANNAMAGENERIK DAN NAMA DAGANG

SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL

DENGANNAMAGENERIK DAN NAMA DAGANG

SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

PENGESAHAN SKRIPSI

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA

GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA

SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

VALIDASI METODE PADA PENETAPAN KADAR

PIROKSIKAM DALAM SEDIAAN KAPSUL

DENGANNAMAGENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA

SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

VALIDATION METHOD OF DETERMINING

CONTRACTION OF PIROXICAM IN ACAPSULE WITH A

GENERIC NAME AND TRADE NAME USING

ULTRAVIOLET SPEKTROPHOTOMETRY

Parts

Dokumen yang terkait

Penetapan Kadar Omeprazol Dalam Sediaan Kapsul Secara Spektrofotometri Ultraviolet

Validasi Metode pada Penetapan Kadar Piroksikam dalam Sediaan Kapsul dengan Nama Generic dan Nama Dagang Secara Spektrofotometri Ultraviolet