Gambar 4. Denah peletakan setiap unit percobaan Keterangan:
M = MVA
K = Kompos
1,2,3,4 = Unit perlakuan ke-1, ke-2, ke-3, ke-4
1, 2, 3, 4 = Unit ulangan
D. Bahan dan Alat Penelitian
Bahan penelitian meliputi bibit tanaman kawista Limonia acidissima L. dengan tinggi rata-rata ±30-33 cm dan umur ± tiga bulan yang diperoleh
dari CV. Harapan Tani Rembang, inokulan MVA dengan kandungan jamur
M5K60 1 M15K30 1
M5K90 4 M15K60 3
M10K30 1 M10K30 3
M0K90 3 M15K90 4
M15K0 1 M5K0 2
M10K30 4 M10K0 2
M5K0 1 M15K90 2
M0K0 4 M5K0 3
M0K0 1 M10K60 1
M15K60 2 M0K60 2
M5K90 1 M15K0 3
M10K90 2 M15K60 4
M0K90 1 M15K90 3
M10K0 1 M5K30 4
M90K0 2 M0K90 2
M0K30 2 M10K0 4
M15K60 2 M10K60 2
M10K60 4 M5K60 4
M5K60 2 M5K30 2
M0K90 4 M0K904
M5K30 1 M15K30 2
M5K30 3 M0K60 3
M5K90 1 M5K60 3
M10K90 3
M0K0 2 M0K0 3
M10K90 3 M5K90 3
M15K30 3 M15K30 4
M5K0 4
M0K30 4 M0K60 4
M15K90 1 M0K30 1
M10K60 3 M60K0 3
M10K30 2 M10K90 1
M0K60 1 M0K30 3
didalamnya: Gigaspora sp, Glomus sp, dan Acaulospora sp yang diperoleh dari Universitas Gadjah Mada, kompos dari ampas teh PT. Sinar Sosro dengan
kandungan 0,32 N; 0,64 P
2
O
5
; 0,32 K
2
O; 14,18 CN;5,34 Corg; 0,13 Fe; 20 Cu; 10 Mg; dan 13 Ca dalam setiap satu kg kompos. Bahan
untuk mengamati derajat infeksi MVA yaitu KOH, HCl, methylene blue, dan aquades.
Alat yang digunakan yaitu polybagdengan diameter 28,66 cm, penggaris dengan ketelitian 1 mm, kertas label, selang air, timbangan analitik
dengan ketelitian 0,01 gram, ember, pisau lipat, mikroskop binokuler, kaca preparat, kamera, pipet tetes, botol falkon, dan beker gelas untuk mengetahui
derajat infeksi MVA pada akar tanaman kawista dengan metode Clearing and Staining dan dilanjutkan dengan perhitungan derajat infeksi MVA.
E. Prosedur Penelitian 1. Persiapan media
Media tanam yang digunakan yaitu campuran tanah grumosol di desa Landoh yang diambil sampai kedalaman 25 cm dan kompos dengan
dosis sesuai perlakuan kemudian diisikan ke dalam polybag ukuran 45 x 45 cm dengan berat media 12 kgpolybag. Pemberian MVA diberikan pada
lubang tanam bersamaan dengan pemindahan bibit kawista ke media tanam.
2. Penanaman
Sebelum ditanam, akar bibit kawista dibersihkan dahulu dengan air mengalir. Setelah itu, bibit dipindahkan pada media yang telah disiapkan
sebagai objek penelitian, yaitu polybag ukuran 45 x 45 cm yang sudah terisi media sesuai dengan perlakuan dan kompos diberikan bersamaan dengan
pengisian tanah kedalam polybag. Satu polybag diisi satu bibit tanaman kawista dengan kedalaman ±15 cm.
3. Pemeliharaan
Penyiraman dilakukan sehari dua kali pagi dan sore, terutama pada fase awal adaptasi pada media baru. Penyiraman dilakukan dengan volum
yang sama pada setiap polybag sampai kapasitas lapang. Pemupukan rutin dilakukan 2 minggu sekali dan pengendalian gulma dilakukan setiap hari.
4. Pengamatan dan Pengukuran
Pengukuran terhadap setiap unittanaman sampel dilakukan 2 minggu sekali dan diakhir pengamatan.
a. Pertambahan tinggi bibit cm Tinggi tanaman diukur dari pangkal batang sampai pangkal daun
tertinggi pada tanaman sampel. Pertambahan tinggi bibitditentukan berdasarkan selisih dari setiap kali pengamatan dikurangi dengan tinggi
awal tanaman. b. Pertambahanjumlah daun helai
Daun yang dihitung adalah daun yang telah membuka penuh pada tanaman sampel. Pertambahanjumlah daun ditentukan berdasarkan selisih
dari jumlah daun setiap kali pengamatan dikurangi dengan jumlah awal daun.
c. Pertambahandiameter batang cm Diameter
batang diukur
2 cm
dari pangkal
batang. Pertambahandiameter batangditentukan berdasarkan selisih dari diameter
batang setiap kali pengamatan dikurangi dengan diameter batang awal. d. Pertambahan panjang akar cm
Pertambahan panjang akarutama diukur dari pangkal batang hingga ujung akar terpanjang. Pertambahan panjang akar diukur pada akhir
pengamatan dikurangi dengan panjang akar awal. e. Pertambahan berat segar bibit gram
Pengukuran pertambahan berat segar bibit dilakukan dengan menimbang seluruh tanaman sampel yang sudah dibersihkan akarnya
dari tanah pada akhir pengamatan dikurangi dengan berat segar tanaman awal. Berat segar tanaman awal ditimbang sebelumbibit kawista
dipindahkan ke media tanam perlakuan. f. Derajat infeksi MVA pada akar
Pengamatan derajat infeksi MVA pada akar kawista dilakukan di laboratorium Mikroteknik Biologi Universitas Negeri Semarang.
Metode identifikasi derajat infeksi MVAmenggunakan metode Clearing and Staining, dengan cara sebagai berikut:
1. Akar tanaman kawista diambil kemudian dicuci bersih dengan air mengalir, dipilih akar yang muda dan dipotong dengan panjang 1 cm.
2. Potongan akar tersebut direndam dalam KOH 10 selama ±24 jam sampai menjadi bening atau transparan.
3. Setelah potongan akar menjadi bening atau transparan kemudian diambil dan dicuci bersih dengan aquades dan selanjutnya direndam
dalam larutan HCl 2 selama ±24 jam. 4.Membuat larutan pewarna dari methylene blue yang ditambah aquades
dengan konsentrasi 0,05 . 5. Potongan akar yang telah direndam dengan larutan HCl 2 , diambil
namun tidak dicuci dengan air. Kemudian direndam dalam larutan pewarna methylene blue 0,05 selama ±24 jam.
6.Akar tersebut kemudian diletakkan pada kaca preparat untuk diamati di bawah
mikroskop, dihitung
derajat infeksi
MVA, dan
didokumentasikan. 7. Dalam pengamatan, jumlah total potongan akar yang dipakai untuk
setiap perlakuan yaitu 50 potong. Rumus jumlah derajat infeksi MVA adalahSyah 2005
Derajat infeksi MVA = x 100
F. Metode Pengumpulan Data
Data awal diambil ketika bibit kawista dipindah dalam media penelitian. Pengamatan dilakukan setiap dua minggu sekali, setiap hasil pengukuran
diambil selisihnya dengan data awal. Hal ini dilakukan untuk untuk parameter pertambahan tinggi tanman, pertambahan jumlah daun, dan pertambahan
diameter batang. Data untuk parameter pertambahan panjang akar dan pertambahan berat segar bibit diambil selisih dari data awal dengan data
minggu ke-12 atau data minggu terakhir. Parameter derajat infeksi MVA pada akar diamati dari 50 ujung akar yang diambil dari masing-masing kombinasi
percobaan, karena ada 16 kombinasi percobaan jadi total ujung akar yang diamati dalam penelitian adalah 800 ujung akar.
G. Tabel Penyajian Data
