Rahmad Lingga : Uji Nematisidal Jamur Endofit Tanaman Padi Oryza sativa L. Terhadap Nematoda Puru Akar Meloidogyne SPP., 2010.
3.1 Waktu dan Tempat
Penelitian ini dilakukan pada bulan April 2009 sampai September di Laboratorium Mikrobiologi FMIPA USU dan Laboratorium Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian
USU, Medan.
3.2 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan adalah akar padi Oryza sativa L., natrium hipoklorit 1,5 , natrium hipoklorit 5,3 , akuadest, HgCl2 0,01 , streptomisin sulfat 0,1 , potato
dextrose agar PDA, etanol, methanol, dan streptomisin sulfat, gliserin, HCl pekat, acid fuksin.
3.3 Isolasi dan Perbanyakan Nematoda
Isolasi nematoda puru akar padi dilakukan dengan modifikasi teknik corong Bearmann Southey, 1985. Akar tanaman padi yang menunjukkan gejala terserang
nematoda puru akar dipotong-potong kecil, lalu diletakkan di atas kertas saring dan dibiarkan selama 2 x 24 jam. Setelah itu, air di dasar corong ditampung dalam beaker
glass dan diamati di bawah mikroskop stereo. Nematoda puru akar padi stadium 2 Gambar 2.2.1 yang diisolasi dari akar tanaman padi, kemudian diperbanyak untuk
memperoleh jumlah yang diinginkan. Perbanyakan dilakukan pada tanaman padi muda
Rahmad Lingga : Uji Nematisidal Jamur Endofit Tanaman Padi Oryza sativa L. Terhadap Nematoda Puru Akar Meloidogyne SPP., 2010.
yang berumur satu minggu. Isolat nematoda dituangkan ke bagian akar muda yang ditanam pada tanah yang steril. Selanjutnya, nematoda diekstraksi kembali setelah satu
bulan.
Gambar 2.2.1. Juvenil Stadium 2 Meloidogyne spp.
3.4 Isolasi dan Perbanyakan Endofit
Isolasi fungi endofit dari akar padi dilakukan dengan metode Radu and Kqueen 2002 dengan modifikasi. Akar dan batang padi dicuci dengan air mengalir selama 20 menit,
dikeringkan dengan tissu, disterilisasi dengan etanol 2 menit, natrium hipoklorit 5,3 selama 5 menit. Terakhir dibilas dengan akuades steril sebanyak 2 kali, dan dikeringkan
dengan kertas saring steril. Batang padi dipotong 4 bagian dan sedangkan bagian akar dihaluskan terlebih dahulu kemudian diambil ekstraknya, diletakkan pada media PDA.
Jamur endofit yang diperoleh diinkubasi pada suhu ruang selama 5 hari. Koloni jamur yang diperoleh dibuat biakan murninya untuk diidentifikasi berdasarkan ukuran, bentuk,
pinggir, warna permukaan bawah koloni, serta pengamatan mikroskopik hifa.
3.5 Uji Aktifitas Nematisidal Jamur Endofit secara In Vitro
