3.4.2 Pembuatan Media
Media yang digunakan pada tahap inisiasi dan tahap multiplikasi adalah media MS yang diberi perlakuan dengan penambahan BAP pada konsentrasi 0, 110, 120, dan
130 ppm dikombinasi dengan 2,4-D pada konsentrasi 0, 0,17, 0, 23, dan 0,29 ppm,. Tahap awal pembuatan media adalah pembuatan media adalah pembuatan larutan
stok, yang terdiri dari stok hara mikro, mikro, myo-inositol, iron, vitamin, BAP dan 2,4-D. Sukrosa, agar, dan arang aktif ditimbang langsung sesuai kebutuhan tanpa
harus dijadikan larutan stok. Media yang digunakan sebanyak 1,6 liter. Pembuatan larutan MS dengan
cara memasukan hara makro, iron, vitamin, sukrosa ke dalam erlenmeyer dan ditambahkan akuades hingga 100 ml kemudian ditambahkan akuades dibuat sampai
volume 1000 ml, Larutan dibagi ke 16 perlakuan yang setiap perlakuan berisi 100 ml. Selanjutnya untuk setiap perlakuan dimasukkan BAP dan 2,4-D. Derajat
keasaman media diukur pada setiap perlakuan dengan menggunakan pH meter 5,8. Untuk menetralkan pH ditambahkan NaOH 0,1 N atau HCl 0,1 N.
Setiap perlakuan media ditambahkan 0,8 gram agar, 3 gram gula, dan 0,3 gram arang aktif sambil dimasak. Media dimasukkan ke dalam botol-botol kultur,
mulut botol kultur ditutup alumunium foil, dilapisi plastik kemudian diikat dengan karet. Botol-botol disterilkan dengan autoklaf pada tekanan 15 psi, pada suhu 121
C selama 30 menit, setelah selesai kemudian disimpan dalam rak kultur dalam
ruangan AC.
3.4.3 Sterelisasi Bahan
Eksplan berupa tunas apikal kelapa sawit dipotong dan dicuci dengan air kran mengalir dan dibilas dengan akuades steril hingga bersih. Tunas apikal direndam
dalam larutan fungisida 0,2g 100 ml yang ditambahkan tween 80 sebanyak 2 tetes selama 30 menit dan dibilas dengan akudes steril sebanyak 2 kali. Tunas direndam
dalam HgCl
2
0,1 selama 5 menit dan dibilas dengan akuades steril sebanyak 2 kali. Sterilisasi dilanjutkan dengan merendam eksplan dalam larutan Na-hipoklorit
0,5 selama 10 menit. Tunas pucuk dicuci dengan akuades steril sebanyak 2 kali. Eksplan disterilkan dengan Na-hipoklorit 1 selama 10 menit. Tunas apikal dibilas
Universitas Sumatera Utara
dengan akuades sebanyak 3 kali. Selanjutnya eksplan diletakkan ke dalam cawan petri dan dikeringkan dengan kertas saring steril
3.4.4 Penanaman Eksplan
Kategori