BAB III BAHAN DAN METODE
3.1. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Universitas Sumatera Utara USU Medan, yang dimulai pada bulan Mei sampai Oktober
2014.
3.2. Bahan dan Alat Penelitian
Bahan tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah bonggol tanaman pisang yang berumur 3 bulan yang berasal dari kebun rakyat, Kabupaten
Nias Utara. Bahan untuk media meliputi larutan stok media MS, ZPT 2,4-D dan kinetin, agar-agar, NaOH 0,1 N, HCl 0,1 N, pH meter, aluminium foil, dan
aquades. Bahan sterilisasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah alkohol 70 dan klorox 2.
Alat-alat yang digunakan adalah autoklaf, laminar air flow LAF, botol kultur, erlenmeyer, pipet skala, gelas ukur, petridis, skalpel, gunting, bunsen,
timbangan analitik, hot plate, batang pengaduk, lemari es, kertas milimeter, pinset, dan oven.
3.3. Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan metode eksperimen dengan Rancangan Acak Lengkap RAL faktorial dengan dua faktor yaitu:
Faktor I : Tingkat konsentrasi pemberian ZPT 2,4-D
D0 = 0 mgl D1 = 1 mgl
D2 = 1,5 mgl D3 = 2 mgl.
D4 = 2,5 m
Universitas Sumatera Utara
13 Faktor II
: Tingkat konsentrasi pemberian ZPT Kinetin K0 = 0 mgl
K1 = 5 mgl K2 = 6 mgl
K3 = 7 mgl K4 = 8 mgl
Penelitian dilakukan dalam dua tahap berdasarkan pada posisi pengambilan eksplan yaitu bagian basal dan bagian apikal. Kombinasi perlakuan
ada 50 yaitu terdiri dari 25 perlakuan pada posisi eksplan bagian apikal dan 25 perlakuan pada posisi eksplan bagian basal Tabel 3.3.1 dan Tabel 3.3.2.
Tabel 3.3.1 Kombinasi perlakuan pada posisi eksplan bagian apikal
Konsentrasi ZPT 2,4-D
Konsentrasi ZPT Kinetin K
K
1
K
2
K
3
K
4
D D
K D
K
1
D K
2
D K
3
D K
4
D
1
D
1
K D
1
K
1
D
1
K
2
D
1
K
3
D
1
K
4
D
2
D
2
K D
2
K
1
D
2
K
2
D
2
K
3
D
2
K
4
D
3
D
3
K D
3
K
1
D
3
K
2
D
3
K
3
D
3
K
4
D
4
D
4
K D
4
K
1
D
4
K
2
D
4
K
3
D
4
K
4
Tabel 3.3.2 Kombinasi perlakuan pada posisi eksplan bagian basal
Konsentrasi ZPT 2,4-D
Konsentrasi ZPT Kinetin K
K
1
K
2
K
3
K
4
D D
K D
K
1
D K
2
D K
3
D K
4
D
1
D
1
K D
1
K
1
D
1
K
2
D
1
K
3
D
1
K
4
D
2
D
2
K D
2
K
1
D
2
K
2
D
2
K
3
D
2
K
4
D
3
D
3
K D
3
K
1
D
3
K
2
D
3
K
3
D
3
K
4
D
4
D
4
K D
4
K
1
D
4
K
2
D
4
K
3
D
4
K
4
Jumlah pengulangan : 3 ulangan
Jumlah seluruh unit perlakuan : 50 x 3 = 150 unit
Universitas Sumatera Utara
14
3.4. Prosedur Kerja 3.4.1. Sterilisasi Alat dan Bahan