UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3.3 Bahan untuk Pembuatan Media Pertumbuhan Mikroba
Potato Dextrose Agar Merck, Nutrient Agar Merck, Mueller Hinton Agar Oxoid, Nutrient Broth Merck, Kalsium karbonat CaCO
3
, Potato Dextrose Broth Oxoid, dan Yeast Extract Merck.
3.3.4 Bakteri uji
Bakteri uji yang digunakan yaitu bakteri Gram positif Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus subtilis ATCC 6633 dan Gram negatif Escherichia
coli ATCC 35218, Shigella dysenteriae ATCC 13313, Salmonella typhimurium ATCC 14028.
3.3.5 Bahan untuk Karakterisasi Mikroba Endofit dan Uji Kemurnian
Bakteri Uji
Larutan kristal violet, lugol, alkohol 96, larutan safranin, aquades steril, NaCl 0,9.
3.3.6 Kontrol Uji Aktivitas Antibakteri
Cakram kloramfenikol konsentrasi 30 µgcakram Oxoid dan aquades
steril.
3.4 Prosedur Penelitian
3.4.1 Pembuatan Media Pertumbuhan Mikroba
3.4.1.1 Pembuatan Media PDA Potato Dextrose Agar
Media Potato Dextrose Agar PDA plate dibuat untuk isolasi kapang endofit dan pemurnian kapang endofit. Media ini dibuat dengan cara PDA
ditimbang sebanyak 39 gram, kemudian ditambahkan aquades hingga 1 liter. Larutan tersebut kemudian dipanaskan di atas hot plate dan diaduk dengan
magnetic stirrer hingga homogen. Selanjutnya disterilisasi dengan autoklaf selama 15 menit pada suhu 121ºC. Media dituang ke dalam cawan petri secara
aseptis masing-masing ±10 mL, lalu dibiarkan di suhu ruang hingga media memadat Ramadhan, 2011.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.4.1.2 Pembuatan Media Agar Miring PDA Potato Dextrose Agar
Media agar miring Potato Dextrose Agar PDA dibuat untuk pemurnian pembuatan stock culture kapang endofit. Media ini dibuat dengan cara Potato
Dextrose Agar PDA ditimbang sebanyak 39 gram, kemudian ditambahkan aquades hingga 1 liter. Larutan tersebut kemudian dipanaskan di atas hot plate dan
diaduk dengan magnetic stirrer hingga homogen. Kemudian media dituang ke dalam tabung slant masing-masing ±5 mL. Selanjutnya disterilisasi dengan
autoklaf selama 15 menit pada suhu 121ºC. Media yang telah steril diletakkan dalam posisi miring ±45º dan media dibiarkan memadat Rustanti, 2007.
3.4.1.3 Pembuatan Media NA Nutrient Agar
Media Nutrient Agar NA plate dibuat untuk isolasi dan pemurnian bakteri endofit, skrining antibakteri mikroba endofit serta peremajaan bakteri uji.
Media ini dibuat dengan cara Nutrient Agar NA ditimbang sebanyak 20 gram dan dilarutkan dalam aquades hingga 1 liter. Larutan tersebut kemudian
dipanaskan di atas hot plate dan diaduk dengan magnetic stirrer hingga homogen. Media disterilisasi dengan autoklaf selama 15 menit dengan suhu 121ºC.
Kemudian media dituang ke dalam cawan petri masing-masing ±10 mL, media dibiarkan memadat Rustanti, 2007.
3.4.1.4 Pembuatan Media Agar Miring NA Nutrient Agar