dijenuhkan dengan aseton 70 didiamkan selama 1 malam pada suhu 4ºC
disentrifugasi pada 10000 rpm selama 30 menit
3.4.2. Penyediaan Ekstrak Kasar Enzim Lipase dari Kecambah Biji Karet
300 g kecambah biji karet
ditambahkan 500 mL buffer fosfat pH 7,0 diblender hingga halus
disaring
Residu Filtrat
disentrifugasi pada 5000 rpm selama 30 menit
Endapan Supernatan
Suspensi
Supernatan Endapan
1,96 g
dilarutkan dengan 75 mL buffer fosfat pH 7,0
Ekstrak Kasar Enzim Lipase
Universitas Sumatera Utara
3.4.3. Penentuan Suhu Optimum Untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase Pada Hidrolisis PKO
1 g PKO
dimasukkan masing-masing ke dalam 5 gelas Erlenmeyer 250 mL ditambahkan 4 mL buffer fosfat pH 7,0
ditambahkan 1 mL crude enzim lipase dipanaskan gelas Erlenmeyer dengan variasi suhu 30ºC; 35ºC; 40ºC;
45ºC; dan 50ºC selama 60 menit ditambahkan 6 mL larutan aseton : etanol 1:1
ditambahkan 3 tetes indikator fenolftalein dititrasi dengan KOH 0,0912 N sampai terjadi perubahan warna
menjadi merah lembayung dicatat volume KOH 0,0912 N yang terpakai
dihitung ALB nya dihitung aktivitasnya
Hasil
Universitas Sumatera Utara
3.4.4. Penentuan pH Optimum Untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase Pada Hidrolisis PKO
Aktivitas crude enzim lipase dapat dihitung dengan rumus dibawah ini :
Aktivitas lipase UmL = 60
1000
NKOH B
A Dengan : A = mL KOH untuk titrasi sampel
B = mL KOH untuk titrasi blanko 1000 = konversi dari mmol ke µmol
60 = waktu reaksi 1 jam = 60 menit dimasukkan masing-masing ke dalam 5 gelas Erlenmeyer 250 mL
ditambahkan 4 mL buffer fosfat dengan variasi pH 6,0; 6,5; 7,0; 7,5; dan 8,0
ditambahkan 1 mL crude enzim lipase dipanaskan gelas Erlenmeyer pada suhu 40ºC selama 60 menit
ditambahkan 6 mL larutan aseton : etanol 1:1 ditambahkan 3 tetes indikator fenolftalein
dititrasi dengan KOH 0,0912 N sampai terjadi perubahan warna menjadi merah lembayung
dicatat volume KOH 0,0912 N yang terpakai dihitung ALB nya
dihitung aktivitasnya
1 g PKO
Hasil
Universitas Sumatera Utara
BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Hasil Penelitian
