a. Pengujian MIC Minimum Inhibitory Concentration
Membuat seri pengenceran bakteri uji, menyiapkan dan 9 tabung reaksi yang berisi 9 ml aquades steril. Pengenceran 10
-1
dibuat dengan cara mengambil 1 ml suspensi bakteri uji yang sudah diaktifasi dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi
yang sudah berisi 9 ml aquades steril, lalu di homogenkan dengan vortex. Untuk pengenceran 10
-2
, mengambil 1 ml dari suspensi bakteri pada tabung pengenceran 10
-1
tadi kemudian dimasukan ke dalam tabung reaksi lain yang juga berisi 9 ml aquades steril, begitupun pengenceran pada seri pengencerean 10
-3
sampai 10
-8
. Biakan bakteri yang bisa dipakai dalam uji aktivitas adalah biakan bakteri pada
seri pengenceran 10
-6
– 10
-8
cfuml. Inokulasi bakteri dilakukan dengan metode pour plate. Penentuan nilai MIC
ditentukan dengan melihat kadar terkecil dimana konsentrasi ekstrak menghambat pertumbuhan bakteri pada media dilusi agar padat. Hasil MIC bisa dilihat setelah
di incubator selama 24 jam dengan suhu 37 C.
b. Pengujian MBC Minimum Bactericidal Concentration
Penentuan Nilai MBC dimulai dengan mengamati media agar pada masing- masing konsentrasi dan memilih dua diantaranya yang terlihat paling bening atau
terlihat tidak ditumbuhi bakteri, kemudian dilakukan uji penegasan untuk menentukan MBC, dari uji penegasan barulah didapatkan MBC.
E. Variabel Penelitian
Variabel dalam penelitian ini adalah : 1. Variabel bebas
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah konsentrasi ekstrak daun dan getah.
2. Variabel terikat Variabel terikat dalam penelitian ini adalah diameter zona hambat pada
paper disc.
F. Populasi dan Sampel
Populasi dalam penelitian ini adalah tanaman Jarak tintir Jatropha multifida L. yang terdapat pada Kebun Tanaman Obat Kampus III Universitas Sanata
Dharma dan Ngekong, Gayamharjo, Prambanan, Sleman. Sedangkan untuk sampel dari penelitian ini adalah getah Jarak tintir Jatropha multifida L. dan
daun Jarak tintir Jatropha multifida L..
G. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilakukan pada bulan Juni - Juli 2013, di Laboratorim Pendidikan Biologi, Jurusan Pendidikan Matematika dan IPA, Fakultas Keguruan
dan Ilmu Pendidikan, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta dan Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta .
H. Alat dan Bahan Penelitian
Peralatan yang digunakan dapat dilihat pada Tabel 3.1 Tabel 3.1 Daftar Alat Penelitian
No. Nama Alat
Jumlah
1. Cawan Petri 40 buah
2. Beker Glass 1 L 1 buah
3. Paper disc 100 buah
4. Corong Kaca 2 buah
Kategori